Download PROTOCOLO PARA EL DIAGNOSTICO DEL VIRUS DE LA

PROTOCOLO PARA EL DIAGNOSTICO DEL VIRUS DE LA DIARREA
EPIDÉMICA PORCINA (PEDv)
Objetivo: Definir los pasos que se deben seguir para la toma y envío de muestras para
el diagnóstico del virus de la Diarrea Epidémica Porcina (PEDv por sus siglas en
inglés)
Debido a la reciente introducción del virus de la diarrea epidémica porcina (PEDv) en
Colombia, se ha incrementado el riesgo de propagación de la enfermedad. Por lo tanto,
es necesario conocer el estatus de infección de cada granja para implementar los
protocolos de control y las prácticas de bioseguridad con el fin de prevenir y contener
su diseminación a granjas no infectadas.
Por todo lo anterior también es importante conocer la clasificación de las granjas según
su estatus sanitario frente a la enfermedad:
GUÍA DE CLASIFICACIÓN DE LAS GRANJAS SEGÚN SU ESTATUS FRENTE AL
PEDV
Por: Bob Morrison (P.I Swine Health Monitoring Project), Matt Ackerman, Joe Connor
GRANJAS DE CICLO COMPLETO
1. Granja infectada y con excreción viral
2. Granja Inestable sin signos clínicos:


La granja no presenta signos clínicos de PEDv.
La granja obtiene resultados positivos en los análisis de laboratorio.
3. Granja Inestable con signos clínicos:


La granja presenta animales con signos leves de PEDv que se puede
confundir con otras enfermedades.
Hay circulación viral en la granja, es decir, se obtienen resultados positivos
en los análisis de laboratorio
4. Granja estable:


Los lechones lactantes son negativos a PED
La granja no presenta signos clínicos de PEDv
Versión octubre 2015

Colectar al menos una muestra de heces cada cuatro semanas la cual debe
ser negativa a PCR
 Cada muestra debe estar representada por lechones entre los 7 días de
edad y el destete
 Colecte un hisopo por camada y prefiera las camadas más jóvenes
 Se recomienda hacer por lo menos 2 pooles de 5 hisopos cada uno.
5. Granja Provisionalmente Negativa:



Ningún animal de la granja presenta signos clínicos de PEDv y las hembras
(reemplazos) que hayan sido introducidas a la granja no han presentado
signos clínicos en los últimos 30 días.
Esas hembras centinela no deben tener historia de haber padecido PEDv.
Evidencia diagnóstica por medio de PCR negativas de las hembras que
hayan estado presentes en la granja los últimos 60 días.
6. Granja Negativa

La granja no ha tenido historia clínica de presentación de PED, o

La granja estuvo infectada o fue provisionalmente negativa, no ha tenido evidencia
clínica de PED en los últimos 6 meses y los reemplazos ingresados no han tenido
historia de haber padecido la enfermedad y han permanecido libres de signos
clínicos.
GRANJAS DE CEBA
1. Granja infectada (Positiva)



La granja se encuentra en fase de excreción viral
Es positivo por diagnóstico de PCR
Esta es la categoría de las granjas en las cuales no se tiene información de
diagnóstico o es insuficiente para calificarla como negativa
2. Granja Negativa


No hay evidencia de excreción viral.
Ausencia de signos clínicos de PED y al menos tres pooles de hisopados
rectales (cada uno de cinco animales) negativos por PCR.
Versión octubre 2015
PUNTOS CLAVES PARA EL RECONOCIMIENTO CLÍNICO DE LA ENFERMEDAD:
a. En granjas infectadas por primera vez:
Los lechones lactantes presentan diarrea acuosa y amarillenta con coágulos de leche
no digeridos, deshidratación, vómito, anorexia y puede haber mortalidad entre el 50100%, la cual es mayor en animales de 1 a 14 días de nacido En cerdos en
crecimiento y ceba se observa diarrea, anorexia, depresión y alta morbilidad, la
mortalidad es muy baja, oscila entre el 1 y el 3%. Los animales adultos presentan
diarrea, anorexia y vómito ocasional. Las hembras pueden presentar mastitis, metritis y
agalactia, algunos presentan fiebre.
b. En granjas endémicas:
Los lechones destetos presentan diarrea persistente grave o leve, similar a otras
enfermedades entéricas de los porcinos.
CRITERIOS PARA UN DIAGNÓSTICO CONCLUYENTE DEL PEDv
 Epidemiología
(morbilidad > 50%) de diarrea con mala absorción que puede ocurrir en
cerdos de cualquier edad, pero principalmente en lechones de maternidad.
 Se demuestra enteritis atrófica por histopatología en el intestino delgado.
 El diagnóstico de DEP generalmente, se confirma por medio de la técnica de reacción
en cadena de la polimerasa (PCR) de heces, diarrea y/o intestinos de animales en fase
aguda de la infección o por inmunohistoquímica de tejidos fijados con formalina.
Virus
Bacterias
Parásitos
COMENTARIOS


AGENTES QUE SE DEBEN DIFERENCIAR DE RUTINA
vPED, vGET, Coronavirus y Rotavirus o por lo menos un diagnóstico diferencial para las
familias Alphacoronvirus (vPED) y Deltacoronavirus (un nuevo virus que se está
detectando en EUA, con signología similar al vPED, pero que pertenece a una familia
diferente de los Coronavirus).
Brachyspira spp., Clostridium spp., E. coli, Enterococcus durans, Lawsonia intracellularis,
Salmonella spp. Brachyspira spp.
Coccidia, Cryptosporidia, Nemátodos
Las heces de cerdos en la fase aguda de la infección son útiles para la detección de vDEP, GET, Lawsonia intracellularis y
flotación fecal para parásitos.
Las muestras de diarrea (10-20 ml) deben tomarse en el primer día. La Brachyspira hyodysenteriae ocasionalmente puede
aislarse de las heces (los hisopos son menos confiables). Las Salmonella spp. Son difíciles de recuperar de heces y/o hisopos
rectales.
Versión octubre 2015
COLECCIÓN DE MUESTRAS DE SUPERFICIES (EN CUALQUIER EXPLOTACIÓN)
1. Los sitios a muestrear son los pasillos de conducción de los cerdos y el
embarcadero.
2. Tomar la esponja de toma de muestras e hidratar con 5ml de solución salina.
3. Friccionar en cinco (5) puntos en total, cada uno de una superficie aproximada
de 10 x 10 cm.
4. Introducir la esponja en la misma bolsa en que venían empacadas y agregar
otros 5ml de solución salina.
5. Identificar la bolsa con el formato Muestras y depositarla en la nevera de
icopor junto con los refrigerantes.
COLECCIÓN DE MUESTRAS EN EXPLOTACIONES DE CICLO COMPLETO O
GRANJAS DE CRÍA:
1. Cuando las cerdas y los lechones presentan diarrea
Para RT-PCR:
 Utilizando un hisopo de algodón o
nylon, colecte directamente del recto
15 muestras de materia fecal de
lechones o cerdas con menos de 24
horas de iniciada la diarrea. Se
pueden manejar pooles de 5
animales, tomados de diferentes
camadas o módulos. Coloque los
hisopados de cada pool en bolsas
plásticas nuevas o estériles y
manténgalos en refrigeración.
Tomado de http://www.iowapork.org/FileLibrary/States
 También puede enviar al laboratorio fragmentos del intestino delgado con una
longitud de 20 – 25 centímetros. No requiere atar los extremos. Puede hacer
pool de intestinos por animal. Conserve las muestras en refrigeración.
 Envíe las muestras de heces e intestino al laboratorio lo antes posible, en una
nevera de icopor con suficiente hielo para mantener las condiciones de
refrigeración.
Para histopatología:
 Colecte segmentos de duodeno, yeyuno, íleon y colon con una longitud de 2,5
cm y deposítelos inmediatamente en formalina al 10%.
Versión octubre 2015
 No lleve al laboratorio animales completos, cadáveres o intestinos en proceso de
autólisis.
2. Cuando Las cerdas y los lechones no presentan diarrea
Para RT-PCR:
 Realice hisopados rectales de cualquier lechón o cerdo mayor que presente
heces blandas o sospechosas de diarrea. Colectar mínimo tres pooles de
hisopados rectales (cada uno de cinco animales) de diferentes camadas o
corrales.
 Envíe las muestras al laboratorio lo antes posible en condiciones de
refrigeración.
COLECCIÓN DE MUESTRAS EN EXPLOTACIONES DE PRECEBO, LEVANTECEBA
1. Cuando los cerdos presentan diarrea en cualquier etapa
Para RT-PCR:
 Colecte mínimo tres pooles de
hisopados rectales (cada uno de cinco
animales) utilizando hisopos de
algodón o nylon de cerdos con menos
de 24 horas de iniciado el cuadro
diarreico. Deposite los hisopos en
bolsas plásticas nuevas o estériles y
manténgalos en refrigeración.
Tomado de http://www.iowapork.org/FileLibrary/States
 También puede enviar al laboratorio
fragmentos del intestino delgado con una longitud de 20 – 25 centímetros, de
animales recientemente sacrificados. Puede hacer pool de intestinos por animal.
Conserve las muestras en refrigeración.
 Envíe cuanto antes al laboratorio, las muestras de heces, fluidos e intestino en
condiciones de refrigeración.
Para histopatología:
 Colecte segmentos de duodeno, yeyuno,
íleon y colon con una longitud de 2,5 cm
y deposítelos inmediatamente en
formalina al 10%.
Versión octubre 2015
Tomado de http://www.iowapork.org/FileLibrary/States
2. Cuando los porcinos destetos/levante/ceba no presentan diarrea
Para RT-PCR:
 Realice hisopados rectales de cualquier animal que presente heces blandas o
sospechosas de diarrea. Colectar mínimo tres pooles de hisopados rectales
(cada uno de cinco animales) de diferentes módulos o corrales.
 Envíe las muestras al laboratorio lo antes posible en condiciones de
refrigeración.
COLECCIÓN DE MUESTRAS EN GRANJAS DE CICLO COMPLETO O DE CRIA EN
FASE POSBROTE (ENDÉMICA)
1. Cuando hay o no presencia de diarrea cualquier etapa
Para RT-PCR:
 Se recomienda seguir el siguiente esquema de diagnóstico inicial y seguimiento
de estabilidad de la granja:
Versión octubre 2015
COLECCIÓN DE MUESTRAS EN GRANJAS DE PRECEBO-LEVANTE-ENGORDE
EN FASE POS-BROTE (ENDÉMICA)
1. Cuando hay o no presencia de diarrea cualquier etapa
Para RT-PCR:
Se recomienda seguir el siguiente esquema:
NOTA: Este protocolo define pautas básicas y lineamientos generales que son recomendadas
para la toma y envío de muestras para el diagnóstico del PEDv y pueden ser modificados
según se requiera.
EL LABORATORIO NACIONAL DE DIAGNÓSTICO VETERINARIO (LNDV) DEL
INSTITUTO COLOMBIANO AGROPECUARIO ICA, PROCESARÁ LAS MUESTRAS
SIN NINGÚN COSTO; EN CASO DE SER USTED QUIEN TOME LAS MUESTRAS,
DEBE ACERCARSE CON ESTAS EN ESTADO DE REFRIGERACIÓN A LA
OFICINA LOCAL ICA MÁS CERCANA
GLOSARIO
AUTÓLISIS: Autodestrucción de los tejidos orgánicos por enzimas propias. Proceso de
descomposición normal de las células.
Versión octubre 2015
BIOSEGURIDAD: Conjunto de medidas y normas preventivas que se integran con el
objetivo de proteger la salud y seguridad de los animales y personas frente a diversos
riesgos.
RT-PCR: Técnica de biología molecular para detección de material genético
BIBLIOGRAFÍA
1. Protocolos de toma de muestra para diagnóstico del virus de la Diarrea epidémica
porcina (PEDv)
2. http://www.pork.org/filelibrary/PEDfsBook3sp
3. http://vetmed.iastate.edu/vdpam/disease-topics/porcine-epidemic-diarrhea-peddiagnostic-testing
4. https://www.aasv.org/aasv%20website/Resources/Diseases/PorcineEpidemicDiarr
hea.php
Versión octubre 2015