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FLUJOGRAMA PARA LA SEROLOGÍA Y
CONFIRMACIÓN DE VIRUS HANTA
DEPARTAMENTO LABORATORIO BIOMÉDICO
NACIONAL Y DE REFERENCIA
SUBDEPARTAMENTO DE ENFERMEDADES
VIRALES
SECCIÓN VIRUS HEPÁTICOS/EMERGENTES
ALERTA SANITARIA
El 06 de febrero del año 2012, el Ministerio de Salud
decretó Alerta Sanitaria por aumento de casos de
Hantavirus para la Región del Bío Bío y la provincia de
Malleco en la Región de La Araucanía.
INSTITUTO DE SALUD PÚBLICA
Desarrollar una red de laboratorio para la detección de
virus Hanta mediante la Técnica de ELISA directa (Kit
IgM Virus Andes), que cubra las necesidades de un
diagnóstico mas oportuno de esta enfermedad
emergente.
INSTITUTO DE SALUD PÚBLICA
Se han seleccionado los siguientes laboratorios de la red
pública:
 Región de Valparaíso:
 Región del Maule:
 Región del Bío Bío:
Hospital Gustavo Fricke
Hospital de Talca
Hospital Guillermo Grant
Benavente
 Región de La Araucanía: Hospital Dr. Hernán
Henríquez Aravena
 Región de Los Lagos:
Hospital Base de Puerto
Montt.
DESARROLLO
09 de Febrero: Hospital Guillermo Grant Benavente.
23 de Febrero: Hospital Dr. Hernán Henríquez Aravena.
Hospital Base de Puerto Montt.
27 de Febrero: Hospital Gustavo Fricke.
07 de Marzo:
Hospital Regional de Talca
OBJETIVOS
Implementar Técnica de ELISA para diagnóstico inicial de
Infección por Virus Hanta, que apoye el criterio para el
diagnóstico clínico.
Conocer el desempeño en la práctica clínica de un test que se
encuentra verificado por ISP y que presenta una sensibilidad
del 100% y una especificidad del 96% en los análisis
realizados por la institución.
TÉCNICA
El Test es una prueba de ensayo por inmunoabsorción ligado a
enzimas (ELISA) que permite la detección de anticuerpos IgM
contra el virus Hanta (virus Andes y virus Sin Nombre) en
muestras de suero o plasma humano.
Técnicas verificadas por ISP:
• Ventajas y desventajas
• Recalcar que el 100% de sensibilidad es con IgM captura Andes,
pero que durante la fase aguda de la enfermedad, como también en
la fase prodrómica, cuando la detección de inmunoglobulinas
específicas es todavía negativa.
• Técnica ELISA al ser directa, puede tener falsos positivos.
NOMBRE
ENSAYO
REAGENA
POC
PUUMALA
IgM
ANTIHANTA
VIRUS
POOL 2
AMERICA
IgM
TIPO DE ENSAYO
ANTIGENO SENSIBILIDAD ESPECIFICIDAD
INMUNOCROMATOGRAFIA
PUUMALA
82.6%
95.37%
ELISA
ANDES Y
VSN
100%
96.2%
EQUIPAMIENTO para tecnica ELISA
Micropipetas de 10, 100 y 1000 µl
Lector de microplacas ELISA con filtros de 450 nm y 620 nm.
Incubador de 37ºC
lavador de microplacas.
CONSIDERACIONES
El objetivo de la implementación de este test a nivel local, no
es reemplazar la confirmación del ISP, sino permitir un
diagnóstico inicial optimizando el tiempo de respuesta para la
atención clínica
Se recomienda centralizar a Nivel Regional la ejecución de
esta metodología con la intención de mejorar el rendimiento
del KIT.
Se realizará estudio de concordancia de los resultados con el
ISP con los diferentes laboratorios. Así mismo, recomendamos
que la mantención de la técnica en dicho hospital sea
responsabilidad de las autoridades locales, mientras que el
ISP se compromete a otorgar la supervisión de la técnica
implementada.
Red de laboratorio Virus Hanta
Red Central
U.A.V
I.S.P
P.U.C
Confirmación de casos
CONFIRMACIÓN
•Araucanía
•Los Ríos
•Los Lagos
Red Regional
Acercamiento al
diagnóstico clínico
•Resto del País
•En caso requerido
•Región Valparaíso: Hospital de Viña del Mar
•Región del Maule: Hospital de Talca
•Región de Bío Bío: Hospital Guillermo
Grant Benavente
•Región Araucanía: Hospital de Temuco
•Región Los Lagos: Hospital de Puerto Montt
Métodos verificados por el
ISP
(Puumala y test de ELISA
que utiliza antígeno Andes y
antígeno Virus Sin Nombre)
Nivel Local
Acercamiento al
diagnóstico clínico
•Laboratorios que
realizan
Test
Rápido Puumala
•Centros Asistenciales
que no disponen de
Test
Rápido
y
pertenecen
a
las
Regiones V, VII,VIII,IX y
X; enviar sus muestras
a laboratorio regional
•Centros
Asistenciales que
no disponen de
Test
Rápido
y
pertenecen a otras
regiones del país
CONDICIONES
Horario de Recepción de muestras: de Lunes a Domingo
las 24 horas.
Horario de procesamiento de muestras: de lunes a
viernes.
En estado de alerta sanitaria: de lunes a sábado y domingo
muestras urgentes.
Tipo de muestra: sangre total sin anticoagulante en tubo
estéril tapa rosca o de goma. (tubo tapa roja ) y además
envío de tubo tapa lila con sistema de extracción al vacío
(EDTA)
Adultos: 5-8 ml
Pediátricos: 3- 4ml
En caso de paciente fallecido enviar: tejidos en tubo estéril
tapa rosca y muestra de punción cardiaca.
CONDICIONES
Conservación de la Muestra: conservar las muestras
refrigeradas a 4ºC , por un tiempo no mayor a 7 días
Transporte: enviar en frío con unidades refrigerantes.
Temperatura 2-8ºC en sistema de triple embalaje.
IMPORTANTE
Comunicar por mail la vía de transporte, día y hora del
despacho de la muestra para el examen de Hantavirus.
Cada tubo debe estar identificado con el nombre del paciente,
tipo de muestra y fecha de obtención.
Las muestras deben ser acompañadas con los antecedentes
del paciente en el ”Formulario de Notificación y Envío de
Muestras”, el cual debe consignar claramente la fecha de
toma de muestra, fecha de inicio de los síntomas, y demás
antecedentes clínicos solicitados en el formulario.
Envío de todos los datos, y el SEGUIMIENTO CLINICO, y
diagnóstico en base a antecedentes:
 clínicos ,
epidemiológicos
y de laboratorio
Correo electrónico responsable laboratorio: ________@____________
ANTECEDENTES CLÍNICOS:
Fecha de primeros síntomas: _____/_____/_____
Fecha de Hospitalización:
_____/_____/_____
Fecha de 1° Consulta __/___/___/
Establecimiento: _______________
Estado del Paciente:
Fallecido
( )
Fecha de Defunción:____/_____/___
Grave
( )
No Grave
( )
Diagnóstico Clínico:________________________________________________________________
Enfermedad leve por Hantavirus:
( )
Síndrome Cardiopulmonar por Hantavirus: ( )
Signos y Síntomas (Marque con una X lo que corresponda a):
Fiebre
Si ( ) No ( )
S.Gastrointestinales:
Si ( ) No ( ) Recuento Blancos ______________m3
Cefalea
Si ( ) No ( )
Compromiso respiratorio: Si ( ) No ( ) c/Desviación Izquierda: Si ( ) No ( )
Mialgia: Si ( ) No ( )
Rx. Tórax con infiltrados: Si ( ) No ( ) Hematocrito elevado:
Si ( ) No ( )
Linfocitosis atípica:
Si ( ) No ( ) Trombocitopenia:
Si ( ) No ( )
(inmunoblastos >10%)
(< 150.000 mm3)
Resultado Test local: ( ) Positivo / ( )Negativo
Inmunocromatografía
( )
ELISA
( )*
EXAMENES DE LABORATORIO
Sangre total sin anticoagulante
Sangre con EDTA
Necropsia (Especifique)……………………….
Otros (Especifique)……………………………
Fecha toma muestra:
Fecha :____/____/____ Fecha Envío Laboratorio ____/____/____
Fecha:____/____/____
Enviado a Laboratorio:
ISP
( )
Fecha:____/____/____
U.Austral Valdivia
( )
Fecha:____/____/____
U. Católica
( )
Gracias