Download Monoclonal Mouse

Monoclonal Mouse
Anti-Human Neuron-Specific Enolase
Clone BBS/NC/VI-H14
Nº de catálogo M 0873
Edición 20.01.03
Indicaciones de uso
Para uso diagnóstico in vitro.
Monoclonal Mouse Anti-Human Neuron-Specific Enolase (NSE), Clone BBS/NC/VI-H14, está indicado para su
uso en inmunocitoquímica. El anticuerpo marca a células tanto normales como neoplásicas de origen neuronal
y neuroendocrino (1), y aunque la NSE no es un marcador exclusivo de las neuronas, puede utilizarse para la
identificación de tumores de nervios periféricos, neurales y neuroendocrinos, tales como neuroblastomas,
retinoblastomas, melanoma desmoplásico maligno y cáncer de células pequeñas pulmonares (2, 3). La
identificación diferencial es facilitada por los resultados de un panel de anticuerpos. La interpretación de los
resultados debe realizarla un patólogo cualificado teniendo en cuenta el historial clínico del paciente y otras
pruebas diagnósticas.
Sinónimos del antígeno
-enolasa y proteína 14-3-2 (4).
Introducción
Las enolasas (2-fosfo-D-glicerato hidrolasa) son isoenzimas glicolíticas homo o heterodiméricas que catalizan
la interconversión entre 2-fosfoglicerato y fosfoenolpiruvato. Tres subunidades,  (46 kDa),  (44 kDa) y  (46
kDa), constituyen los elementos con los que se construyen las moléculas de enolasa, y se han identificado
cinco formas (, , ,  y ) de la enzima (5). Las enolasas se dividen en tres grupos principales en
función de su ubicación: enolasa no neuronal (NNE o ), enolasa específica del músculo (MSE o ), y enolasa
específica de las neuronas (NSE o ) (3).
Reactivos suministrados
Anticuerpo monoclonal murino suministrado en forma líquida como sobrenadante de cultivo celular dializado en
Tris/HCl 0,05 mol/L, pH 7,2 y con un contenido en NaN3 de 15 mmol/L.
Clon: BBS/NC/VI-H14 (1). Isotipo: IgG1, kappa.
Concentración de IgG murina: ver la etiqueta del vial.
Inmunógeno
-enolasa purificada a partir de cerebro humano utilizando un método de disociación-reasociación en una
columna de cromatoenfoque (1).
Especificidad
Cuando se aplica la técnica Western blotting con -enolasa y -enolasa humanas así como extracto de
músculo humano que contiene -enolasa humana, purificadas, desnaturalizadas con SDS y reducidas, el
anticuerpo marca únicamente a la subunidad -enolasa (1).
Como se demuestra mediante inmunocitoquímica, el anticuerpo reacciona de forma cruzada con proteína
equivalente a la NSE en la cobaya (1).
Precauciones
1. Para uso por profesionales.
2. Este producto contiene azida sódica (NaN3), un compuesto altamente tóxico en su forma pura. A las
concentraciones en que está presente en el producto, aunque no se clasifican como peligrosas, la azida sódica
puede reaccionar con las cañerías de plomo y cobre, formando acumulaciones de azidas metálicas altamente
explosivas. Tras desechar el producto, abra el grifo y deje que salga abundante agua para despejar las
cañerías de cualquier acumulación de azidas.
3. Como con cualquier producto derivado de fuentes biológicas, deben utilizarse los procedimientos de
manipulación apropiados.
Almacenamiento
Preparación de las
muestras
Procedimiento de tinción
(103071-002)
Almacénelo a una temperatura de 2 a 8 C. No lo utilice después de la fecha de caducidad impresa en el vial.
Si los reactivos se almacenan bajo condiciones distintas de las especificadas, éstas deben ser verificadas por
el usuario. No existen signos obvios que indiquen que este producto sea inestable. Por lo tanto, deben llevarse
a cabo controles positivos y negativos en simultaneidad con el ensayo de las muestras de los pacientes. Si
observa tinciones inesperadas que no puedan atribuirse a las variaciones en los procedimientos de laboratorio
y sospeche que exista un problema con el anticuerpo, contacte con nuestro servicio de asistencia técnica.
Secciones de parafina: el anticuerpo puede utilizarse para marcar secciones de tejido incluidas en parafina
fijadas en formol. Se recomienda pretratar los tejidos mediante recuperación de epítopo inducida por calor. Se
obtienen resultados óptimos con Dako Target Retrieval Solution número de catálogo S 1700, con Dako Target
Retrieval Solution número de catálogo S 3308 a pH alto, con tampón citrato 10 mmol/L, pH 6,0, o con tampón
Tris 10 mmol/L, EDTA 1 mmol/L, pH 9,0. Se encontró que el pretratamiento de los tejidos con proteinasa K
destruye el epítopo. No permita que las secciones de tejido se sequen durante el tratamiento ni durante el
procedimiento de tinción inmunocitoquímica siguiente.
Dilución: Monoclonal Mouse Anti-Human Neuron-Specific Enolase (NSE), número de catálogo M 0873, puede
utilizarse en un intervalo de diluciones de 1:100 a 1:200 cuando se aplica a secciones de colon humano fijadas
en formol e incluidas en parafina, utilizando 20 minutos de recuperación de epítopo inducida por calor en Dako
M 0873/ES/HEW/20.01.03 pg. 1/2
Dako Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17
Target Retrieval Solution número de catálogo S 1700, y 30 minutos de incubación a temperatura ambiente con
el anticuerpo primario. Las condiciones óptimas pueden variar en función de la muestra y del método de
preparación, y deben ser determinadas por cada laboratorio individual. El control negativo recomendado es
Dako Mouse IgG1, número de catálogo X 0931, diluido a la misma concentración de IgG murina que el
anticuerpo primario. A menos que la estabilidad del anticuerpo y del control negativo diluidos se hayan
establecido en el procedimiento de tinción en sí, le recomendamos que diluya estos reactivos justo antes de
utilizarlos, o que los diluya en Dako Antibody Diluent, número de catálogo S 0809. Deben llevarse a cabo
controles positivos y negativos en simultaneidad con el ensayo de las muestras de los pacientes.
Visualización: le recomendamos que utilice el kit DAKO LSAB™+/HRP número de catálogo K 0679, y los kits
DAKO EnVision™+/HRP números de catálogo K 4004 y K 4006. Siga el procedimiento incluido en el kit de
visualización seleccionado.
Automatización: el anticuerpo es adecuado para la tinción inmunocitoquímica mediante plataformas
automatizadas tales como Dako Autostainer.
Características de tinción
Las células marcadas por el anticuerpo muestran un patrón de tinción del citoplasma. En las neuronas, el
marcado se produce tanto en el citoplasma como en los procesos.
Tejidos normales: el anticuerpo marca a las neuronas de la corteza cerebral humana y a los núcleos del tallo
cerebral (1). Además, el anticuerpo marca a las células ganglionares del tracto gastrointestinal humano y a las
fibras nerviosas mielinadas y no mielinadas (1). En los testículos adultos normales, el anticuerpo muestra una
inmunotinción débil de los espermatogonios (3).
Tejidos anormales: el anticuerpo marca a los tumores derivados de o que contienen neuronas, células
ganglionares y nervios periféricos. No obstante, también puede marcar de forma específica a tumores no
derivados de neuronas, tales como meningiomas, meduloblastomas, astrocitomas, glioblastomas,
oligoastrocitomas,
oligodendrogliomas,
adenomas
pituitarios,
schwannomas,
ependimomas,
meningosarcomas, gliosarcomas y metástasis de diverso origen, concretamente, melanomas, carcinomas de
células pequeñas pulmonares y carcinomas indiferenciados (1, 4). Además, el anticuerpo marca a tumores de
células germinales, concretamente, carcinomas in situ testiculares, seminomas y carcinomas embrionarios (3).
1. Soler Federsppiel BS, Cras P, Gheuens J, Andries D, Lowenthal A. Human -enolase: two-site immunoradiometric assay with a single monoclonal antibody. J Neurochem 1987;48:22-8.
Referencias
2. Anstey A, Cerio R, Ramnarain N, Orchard G, Smith N, Jones EW. Desmoplastic malignant melanoma. An
immunocytochemical study of 25 cases. Am J Dermatopathol 1994;16:14-22.
3. Kang J-L, Meyts ER, Skakkebæk NE. Immunoreactive neuron-specific enolase (NSE) is expressed in
testicular carcinoma-in-situ. J Pathol 1996;178:161-5.
4. Cras P, Martin JJ, Gheuens J. -enolase and glial fibrillary acidic protein in nervous system tumors. An
immunohistochemical study using specific monoclonal antibodies. Acta Neuropathol 1988;75:377-84.
5. Shimizu A, Suzuki F, Kato K. Characterization of , ,  and  human enolase isoenzymes, and
preparation of hybrid enolases (,  and ) from homodimeric forms. Biochim Biophys Acta
1983;748:278-84.
Explicación de los símbolos
(103071-002)
Número de catálogo
Límite de temperatura
Producto sanitario para
diagnóstico in vitro
Código de lote
Consulte las instrucciones de
uso
Fecha de caducidad
Fabricante
M 0873/ES/HEW/20.01.03 pg. 2/2
Dako Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17