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Ecología de la Resistencia Bacteriana Entidad Universidad de Zaragoza Departamento Laboratorio de Microbiología. Dpto. de Microbiología y Medicina Preventiva Facultad Medicina Investigador Principal Rafael Gómez-Lus Lafita Dirección Domingo Miral s/n., 50009 Zaragoza Tel +34 976 76 16 92 Fax +34 976 76 16 93 Email gomezlus@unizar.es Web www.unizar.es Presentación Grupo de investigación calificado de consolidado por la DGA, cuyo objetivo general es el establecimiento de los principios que permitan un mejor conocimiento de las causas que influyen en la génesis y la diseminación de la resistencia bacteriana a los antibióticos, como punto de partida para diseñar e implementar medidas racionales de control que permitan limitar el desarrollo experimentado por este problema en las últimas décadas, ya que si bien es cierto que se trata de un fenómeno natural, se ve favorecido y aumentado por factores como el uso incorrecto y masivo de los agentes antimicrobianos, así como por su aplicación en algunos campos diferentes al de la medicina como pueden ser veterinaria, agricultura, etc. Actividad investigadora 1. Epidemiología de la resistencia antibiótica en gram-positivos gram negativo Vigilancia epidemiológica de la resistencia antibiótica y su caracterización fenotípica y genotípica en gram-positivos gram-negativos. Búsqueda de nuevos genes y mecanismos de resistencia. 2. Mecanismos genéticos de la resistencia a antimicrobianos en bacilos gram negativos, multirresistencia y transferencia de resistencia entre cepas bacterianas de diferentes nichos ecológico Vigilar la aparición de genes de resistencia a aminoglicósidos y otros antibióticos vehiculados por plásmidos, transposones e integrones, con riesgo de resistencia múltiple. Se valora especialmente la transferencia de cepas resistentes entre animales y humanos y la transferencia de genes de resistencia entre cepas medioambientales y cepas clínicas. 3. Epidemiología molecular de la legionelosis en Aragón, interacciones legionelascon otras bacterias, con amebas y diseño de nuevos marcadores Completar la técnica de tipificación por bacteriocinas (piocinas, aeromonacinas y klebocinas), para diferenciar las cepas de L. pneumophila sg. 1 con rapidez y seguridad. Desarrollar y poner a punto la técnica de tipificación molecular para L. pneumophila sg. 1que nos permita el análisis de brotes que puedan surgir en nuestra comunidad. Analizar las interacciones legionelas-amebas, para un control más eficaz. Vigilar la sensibilidad de las legionelas a los antibióticos y a los biocidas, teniendo en cuenta las biopelículas (formas sesiles) y su presencia intracelular en las amebas. Oferta de servicios 1. Estudio sobre mecanismos de resistencia bacteriana 2. Estudio de las bacteriocinas producidas por 18 especies del género Legionella. Contacto: OTRI de la Universidad de Zaragoza Tlf. 976 76 28 48 - promotri@unizar.es www.unizar.es/otri 1/4 Experiencia/Logros El grupo es una referencia obligada, a todos los niveles en el campo de estudio de la resistencia microbiana a los antibióticos. Descubrimiento de bacteriocinas en Legionella sp Los miembros del grupo han publicado un gran número de investigaciones tanto en publicaciones periódicas de renombre nacional e internacional, como a través de monografías. Se ha participado en diversos proyectos; los miembros del grupo dirigen varias tesis doctorales, cursos de doctorado, cursos intensivos, etc.; sus participaciones en congresos mediante conferencias es también elevada. Infraestructura Lab. de Microbiología. Dpto. de Microbiología, Medicina Preventiva y Salud pública. Instrumental y tecnología del laboratorio. Palabras claves Microbiología, medicina preventiva, salud pública, resistencia bacteriana, mecanismos de resistencia, antibióticos, agentes antimicrobianos, vigilancia epidemiológica, gram-positivos, genes de resistencia, aminoglicósidos, plásmidos, transposones, integrones, bacteriocinas, legionelas, legionelosis, amebas. Contacto: OTRI de la Universidad de Zaragoza Tlf. 976 76 28 48 - promotri@unizar.es www.unizar.es/otri 2/4 Estudio sobre mecanismos de resistencia bacteriana Grupo de investigación: Ecología de la Resistencia Bacteriana Investigador: Rafael Gómez-Lus Lafita Resumen Estudio de los mecanismos genéticos y bioquímicos de la resistencia bacteriana: su capacidad de ser transmisibles. Descripción detallada Se investigan los mecanismos bioquímicos de resistencia y sus bases genéticas en aislamientos clínicos gram positivos (Staphylococcus, Streptococcus, Enterococcus) y gram-negativos (Enterobacteriaceae, Pseudomonadaceae, y Vibrionaceae)obtenidos de pacientes asistidos en la Comunidad Autónoma de Aragón, así como bacterias comensales que comparten el mismo nicho ecológico (oral, genital, intestinal, cutáneo,…) para determinar el papel que puedan desempeñar como posibles reservorios y fuentes de genes de resistencia. Los antimicrobianos objeto de seguimiento son aquellos de uso clínico más habitual para tratar infecciones por gram-positivos y gram-negativos, así como los de más reciente introducción en clínica. Se identifican los fenotipos resistentes para determinar su incidencia y distribución, caracterizando los mecanismo implicados en la resistencia e identificando los genes que los codifican. Se estudia también la transferencia de dichos genes mediante conjugación y transformación en diferentes géneros gram-positivos, su movilidad a bacterias gram-negativas y su origen en bacterias patógenas o comensales. Se determina por tanto, la naturaleza y localización de los elementos genéticos involucrados en su diseminación. Mediante herramientas adecuadas de feno y genotipado se diferenciará la diseminación clonal de cepas resistentes, de la propagación horizontal de genes de resistencia entre diferentes cepas. Ensayos específicos Descripción de un método para detección de bacteriocinas en Legionella spp: uso como marcador. Técnicas y equipos Técnicas bacteriológicas básicas: cultivos, identificación convencional y molecular. Mercado objetivo Hospitales, investigadores, industria farmacéutica. Aplicaciones al mercado Desarrollo de nuevos antibióticos y su evaluación frente a cepas multirresistentes. Informar sobre el empleo de antibióticos. Futuros aplicaciones de nuevas bacteriocinas. Informes a hospitales sobre mecanismos de resistencia. Proyectos y contratos destacables Detección de mecanismos de resistencia y caracterización genotípica de la resistencia mediante la aplicación de técnicas de biología molecular, PCR con sondas específicas, PCR múltiple, hibridación de DNA. In vitro activity of cefditoren. And other antimicrobial agents against 288 Streptococcus pneumoniae and 220 Haemophilus influenzae clinical strains isolated in Zaragoza, Spain. Contacto: OTRI de la Universidad de Zaragoza Tlf. 976 76 28 48 - promotri@unizar.es www.unizar.es/otri 3/4 Estudio de las bacteriocinas producidas por 18 especies del género Legionella Grupo de investigación: Ecología de la resistencia bacteriana Investigador: Rafael Gómez-Lus Lafita Resumen Estudio de los antibióticos de la legionelosis (bacteriocinas) de espectro muy reducido. Se analiza la disposición de las substancias en sus nichos ecológicos con la aplicación de marcadores epidemiológicos. Descripción detallada La aplicación de marcadores epidemiológicos para tipificar Legionella pneumophila serogrupo 1, incluye anticuerpos monoclonales, ribotipia, amplificación con cebadores arbitrariós y con la técnica AFLR Sin embargo, se encuentran aislamientos clínicos y ambientales no-diferenciables por éstos métodos moleculares por lo que hemos desarrollado una nueva técnica, modificación de la clásica bacteriocinotipia ya que determina la sensibilidad de las legionelas a una serie de bacteriocinas producidas por especies de Pseudomonadaceae y Enterobacteriaceae , destacando la capacidad discriminatoria de piocinas, aeromonacinas y klebocinas. Sin embargo, el hallazgo de,bacteriocinas por las 29 especies/serogrupos de Legionella spp probadas en nuestro laboratorio, lo que parece conferirles un valor ecológico y una capacidad discriminatoria, para aplicarse en la tipificación y en la valoración de los antagoismosCon este procedimiento se diferencia a las legionelas interspecíficamente, intraespecíficamente y distingue dentro del sergrupo 1 de Legionella pneumophila, con idéntico patrón a los marcadores moleculares. Asimismo hemos vigilado la sensibilidad de las legionelas a los antibióticos, antes y durante el tratamiento cuando se han obtenido muestras clínicas, pese a que no se ha descrito la participación de plásmidos como vehículo de genes de resistencia. Técnicas y equipos Técnicas bacteriológicas básicas: cultivos, identificación convencional y molecular. Mercado objetivo Ecólogos (tanto macroecólogos como microecólogos), investigadores, empresas farmacéuticas. Aplicaciones al mercado Avanzar en las técnicas de tipificación por bacteriocinas, que permite una diferenciación de las cepas, más segura y rápida, con aplicaciones ecológicas. Proyectos y contratos destacables Determinantes genéticos bacterianos en la adquisición de resistencias”. Trigésimo segundo Curso Intensivo sobre Antibióticoterapia. Cinco conferencias sobre "De los cazadores de microbios a los descubridores de antibióticos". Actividad de las bacteriocinas de Pseudomonaceae, Aeromonadaceae y Enterobacteriaceae frente a cepas clínicas y ambientales del género Legionella. Ponencia Interacciones de amebas de vida libre y Legionella spp Conferencia. Aislamiento e identificación de amebas de vida libre en el sistema de agua del Hospital Clínico Universitario “Lozano Blesa” y su interrelación con Legionella pneumophila. Contacto: OTRI de la Universidad de Zaragoza Tlf. 976 76 28 48 - promotri@unizar.es www.unizar.es/otri 4/4