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Diagnóstico y Enfermedades de la Vid Efectos Sobre la Producción y la Calidad Enológica Judit Monis, Ph.D. STA Laboratories Temario Primera Parte: Enfermedades y Diagnósticos de la Vid • Enfermedades de mayor importancia en la viticultura (hongos, bacteria, y virus ) • Descripción de síntomas y transmisión natural • Importancia de la detección y reconocimiento de patógenos • Influencia de virus en incompatibilidad al Injerto STA Laboratories Eurofins Scientific • Mas de 150 laboratorios en el mundo • Servicio de testado analitico • Sirviendo las siguientes industrias: Alimentos, Sanidad Animal, Sanidad Vegetal, Neutracéuticas, Suplemento Dietético, Grano y Semilla. STA Laboratories Eurofins STA Laboratories Plant Health Services (California) – Diagnóstico de enfermedades y productos diagnosticos Seed Quality Services (California y Colorado) – Análisis de Semillas y Sanidad de la semilla Genetic Services (Colorado) – Mejoramiento Molecular, Marcadores de ADN, la identificación de rasgos, la pureza e híbridos STA Laboratories Enfermedades Transmitidas por Injerto Una vez establecidas en el viñedo, no existe cura Causadas por Bacterias: Enfermedad de Pierce’s (aun no ocurre en Argentina) Tumores o Agallas del cuello Causadas por hongos: Decaimiento Joven de la Vid (Enfermedad de Petri o Esca), Pie Negro, Cancros, etc. Causadas por Virus: Fanleaf o Decaimiento Enrollamiento (Leafroll)/Mancha Roja (Red Blotch) Rupestris Stem Pitting Jaspeado (Fleck) Complejo de Madera Rugosa STA Laboratories Triángulo de Enfermedad (Viñedo) Agentes Patógenos (bacteria, hongo o virus) Razas severas Transmision y Propagacion (insectos, maquinas gente) Clón y portainjerto Huésped (vid) STA Laboratories Suelo, estres, helada Condiciones ambientales El Triángulo de la Enfermedad en el Viñedo Desarrollo de la enfermedad: Agentes patógenos (bacteria, hongo o virus), un huésped susceptible (vid), y condiciones ambientales favorables. • Variedades de vid y portainjertos pueden ser más o menos susceptibles a la infección • Agentes patógenos pueden ser más o menos virulentos y se propagan en la viña (virus pueden ser transmitidos por nematodes e insectos) • Condiciones ambientales (Congelación, sequia, etc.) aumentan la susceptibilidad de la vid a patógenos virales, micóticas y bacterianas. STA Laboratories Enfermedades Causadas por Bacterias Enfermedad de Pierce’s Tumores o Agallas del cuello STA Laboratories STA Laboratories Enfermedad de Pierce’s Enfermedad de Pierce Xylella fastidiosa STA Laboratories Enfermedad de Pierce’s Pierce’s Disease • Descrita en 1892 (N. B. Pierce) • Distribuida en el sur y oeste de EEUU • Causado por Xylella fastidiosa, una bacteria Gram negativa que se encuentra en el xilema • Tiene un amplio rango de huéspedes, cepas de X.f. causa otras enfermedades en cítricos, almendra y durazno • X.f. se transmite por insectos chicharritas o cicadélidos (Homóptero: Cidadelidae) STA Laboratories Enfermedad de Pierce’s • La bacteria se multiplica y bloquea el xilema (las venas que conducen agua) causando decaimiento • Las plantas infectadas desarrollan síntomas de hojas escorchadas o secas • Una vez que la planta esta infectada con la bacteria, actúa como un reservario de inoculo • Las chicharritas que se alimentan en plantas infectadas transmiten la enfermedad a plantas sanas • Una vez que una chicharrita adquiere la bacteria, puede transmitir la enfermedad por el resto de su vida STA Laboratories Chicharrita verde-azul Chicharrita de alas transparentes adapted from UC Publication “Pierce’s Disease” STA Laboratories Agrobacterium vitis Simtomas Aereos STA Laboratories Tumores o Agallas del cuello (Crown Gall) • Causado por Agrobacterium vitis • Bacteria se encuentra en el suelo y rizoplano de plantas herbáceas y leñosas • La vid puede estar infectada sistemicamente con A. vitis por un periodo largo sin mostrar síntomas. • Heridas causadas por cultivación o heladas pueden iniciar nuevas infecciones muchas veces con la aparición de muchas agallas STA Laboratories Tumores o Agallas del cuello • La enfermedad es severa en zonas con heladas • Las agallas pueden “ahogar” al tallo previniendo el movimiento de nutrientes • Las agallas pueden “invitar” la infección de hongos y otros patógenos • La enfermedad puede destruir el viñedo entero STA Laboratories Enfermedades Causadas por Hongos Phaeoacremonium spp.; Phaeomoniella spp.; Cylindrocarpon spp ; Eutypa spp.; y muchos otros Causan: decaimiento joven de la vid, brazo muerto, pie negro, cancros, etc. STA Laboratories Enfermedades Fungicas STA Laboratories Decaimiento Joven de la Vid Síntomas • Decaimiento lento, vigor pobre, calibre reducido, entrenudos cortos, reducción de follaje y tamaño de hojas. • Los síntomas pueden confundirse con aquellos causados por virus, Pierce’s Disease y deficiencias nutricionales. • Gomosis vascular es típico, incluyendo estrías de color negras o amber en el sistema vascular. STA Laboratories Decaimiento Joven de la Vid • Afecta a vides injertadas (primeros 10 años de establecimiento en el viñedo) • Phaeoacremonium, Phaeomoniella, y otras spp. Endofitos con la habilidad de convertirse en patógenos bajo condiciones de estrés y malas practicas de manejo de cultivo. STA Laboratories Otros hongos • Cylindrocarpon se encuentra colonizando el suelo y penetra la vid por aberturas naturales o heridas en raíces • Eutypa spp., Botryosphaeria spp. , Seimatosporium spp. causan cancros • Verticillium spp. , Phytophthora spp. causan marchitamiento STA Laboratories Puntos Necróticas y Necrosis Seccional STA Laboratories Armillaria (Oak Root Fungus) STA Laboratories Enfermedades Causadas por Virus • • • • • • Fanleaf y Decaimiento Enrollamiento (Leafroll) Mancha Roja (Red Blotch) Complejo de Rugosidad de Madera Enfermedad de Syrah Jaspeado STA Laboratories Decaimiento Viral Grapevine fanleaf, Arabis mosaic, tomato and Tobacco ringspot viruses STA Laboratories Fanleaf y Decaimiento • Variedades sensitivas muestran un decaimiento progresivo, reducción de producción (hasta 80% perdidas) • Inferior calidad de fruta con cuaje pobre y una maduración heterogénea • Vides afectadas tienden a ser más pequeñas que vides sanas • La vida productiva del viñedo se acorta y las plantas tienen menor resistencia a las heladas • El principal método de transmisión de virus es por traslado y propagación de vides infectadas STA Laboratories STA Laboratories Fanleaf leaf symptoms Grapevine Fanleaf Virus y otros Nepoviruses STA Laboratories Grapevine Leafroll Variedad de Uva Negra STA Laboratories Variedad de Uva Blanca Leafroll: Síntomas Foliares STA Laboratories Leafroll Síntomas Foliares Variedad de uva blanca STA Laboratories Variedad de uva negra Leafroll afecta la salud de la vid y calidad de uva • Hasta un 70% de reducción de cosecha • Retardación de maduración de uva, reducción en el contenido de azúcar, y alteración del color de la fruta – en infecciones severas la fruta no madura • Vides infectadas tienen mayor sensitividad al frío y otros estreses • La propagación de la enfermedad ocurre por el movimiento de estacas de plantas enfermas • Varias especies de cochinillas transmiten estos virus a corta/larga distancia STA Laboratories Grapevine leafroll-associated viruses (GLRaV) Closteroviridae (tres generos) Ampelovirus (Cochinillas): GLRaV -1, -3, GLRaV - 4, -5, -6, -9 Closterovirus (afidos): GLRaV-2 and variants (GLRaV-2RG/BD/Alfie) Velarivirus: GLRaV-7 STA Laboratories Grapevine Leafroll Ampeloviruses (LR1, LR3, LR4, LR5, etc.) son transmitidos por cochinillas STA Laboratories Efecto de Porta-injerto • Hasta 1990’s el uso exclusivo de AXR-1 • Una nueva raza de Filoxera rompió la resistencia • Muchos viñedos plantados con portainjertos alternativos muestran brotes de infección (particularmente leafroll y hongos de madera) STA Laboratories Influencia de Virus en Incompatibilidad al Injerto GLRaV-2 causa incompatibilidad • • • • • • 3309C (V. riparia x V. rupestris ) 101-14 V. riparia x V. rupestris Kober 5BB (V. berlandieri x V. riparia) Teleki5C (V. berlandieri x V. riparia) 1103 P (V. berlandieri x V. riparia) 1616C V. solonis x V. riparia STA Laboratories Enfermedad de Shiraz (GVA en Merlot and Syrah) STA Laboratories GVA • • • • • • Enfermedad de Syrah (Merlot y Syrah) Kobber stem grooving Transmisión por cochinillas Reducción calidad y rendimiento de fruta Afecta la lignificación de los tallos Decaimiento de la vid y envejecimiento prematuro STA Laboratories Complejo de Madera Rugosa • Corky bark (GVB,GVD) • Kober stem grooving (GVA) • Rupestris stem pitting (GRSPaV) Estas enfermedades se caracterizan por defectos en los tallos (listados y madera estriada y stem pitting). El efecto en el viñedo varia y puede ser severa si una combinación de virus están presentes STA Laboratories Grapevine Corky Bark GVB, GVD STA Laboratories Sindrome de madera corchosa (Corky Bark) • Causado por GVB y GVD • Abultamiento por encima de la unión del injerto y madera con manchas o estrías visible luego de remover la corteza. • Retraso en la brotación, decaimiento de la vid y la muerte • Síntomas se intensifican con estrés ambiental y/o la combinación con otros patógenos STA Laboratories GVF Vitiviruses • Se encuentran con frecuencia en las infecciones mixtas con GLRaVs • Vitviruses son transmitidos por los mismos vectores (cochinillas) que transmiten Ampeloviruses • GVF associado con incompatibilidad al injerto y decaimiento STA Laboratories Rupestris Stem Pitting Cepa “Syrah” STA Laboratories Rupestris Stem Pitting • Este virus no causa síntomas en el huésped indicador Rupestris St. George • Mucha variación en el genoma del virus • Una cepa de RSPaV (Syrah) apparentemente causa síntomas más severos STA Laboratories Tymoviridae Maculavirus Grapevine fleck virus (GFKV) STA Laboratories Marafivirus Grapevine Syrah virus -1 (GSYV-1) = GVQ infecta portainjertos y variedades silvestres) Jaspeado (Fleck) • Causado por GFkV, un Maculavirus • Síntomas consisten en la aclaración de las venas produciendo un jaspeado típico • Distribución se lleva a cabo por movimiento de plantas infectadas STA Laboratories Decaimiento de Syrah -no se conoce la etiologia STA Laboratories Decaimiento de Syrah • Etiología desconocida • Complejo de hongos patógenos? • Un virus no caracterizado (hasta ahora RSPaV-SY y GSyV 1-no parecen causar la enfermedad) • Factores genéticos / ambientales • Todas las causas mensionadas? STA Laboratories Syrah Decline STA Laboratories Grapevine red blotch associated virus • Descubierto (independientemente) en Cornell U. y U.C. Davis • La secuencia genética tiene 50% similaridad con geminivirus • Encontrado asociado con síntomas foliares y reduccion de azucares (brix) • 94% correlacion con sintomas foliares (mancha roja) -sólo 2,5% de follaje verde probó ser POS (Sudarshana "Sudhi" Mysore) • la biología del virus o la transmisión natural es desconocida • Eurofins STA desarrollo una prueba para detectar el virus STA Laboratories Grapevine red blotch associated virus variedad roja STA Laboratories Grapevine red blotch associated virus variedad blanca STA Laboratories HealthCheck Panel RB Variedades infectadas Cabernet Sauvignon, Cabernet Franc, Chardonnay, Malbec, Merlot, Petite Sirah, Petit Verdot, Pinot Gris, Pinot Noir, Sauvignon Blanc, Syrah, Teroldego and others Colaboracion con Keith Perry y Marc Fuchs (Cornell University) tpara determinar la diversidad genetica delvirus STA Laboratories GRBaV Investigación en Progreso: Postulados de Koch’s • El aislamiento de virus, inoculacion de plantas sanas y la reproduccion de los síntomas de enfermedad es difícil pero posible con la biotecnología • Injerto de transmisión demostró la presencia de virus, pero no hay síntomas (necesita más tiempo?) • La inoculación del injerto permite la transmisión de GRBaV y otros patógenos STA Laboratories Red Blotch (Mancha Roja) En nuestro lab se han asociado hongos con sintomas Close up view STA Laboratories HealthCheck Panel RB detecta Grapevine red blotch associated virus Follaje verde NEGATIVO STA Laboratories Follaje rojo POSITIVO Red Blotch Disease Complex Presentado Junio2012 ICGTV en Valencia, España): Vides con follaje rojo se encontraron infectados con hongos: Cylindrocarpom ,Bionectria, Phoma, and Verticillium spp. (also Phaeoacremonium, Phaeomoniella, Fusarium) STA Laboratories ¿Podría la presencia de GRBaV aumentan el estrés e intensificar los síntomas de hongos o viceversa? Defectos en Plants constricciones STA Laboratories cinta injerto fijado Defectos de Raices Raíces torcidas STA Laboratories Raíces en forma de J o L Leafroll vs. Red Blotch (Courtesia de Marc Fuchs) Grapevine Leafroll Grapevine Red Blotch STA Laboratories Temario Segunda Parte: Enfermedades Detectadas en la Madera de la Vid • Razones para testear en el viñedo • Métodos de Diagnóstico • Pruebas y Estrategias de supervisión para asegurar el material de plantacion libre de patógenos • Estrategias de testeo y monitoreo para asegurar viñedos sanos • Ejemplos de muestreo dependiendo de la razon para testar • ¿Cómo se interpretan los resultados? STA Laboratories Razones para Testar en el Viñedo • Determinar la salud de vid antes de plantar o injertar (material limpio de plantación) • Determinar la causa del problema de viñedo • Determinar la presencia de patógenos antes de la compra o la replantación • Monitoriar para detectar la presencia de patógenos y aplicar medidas de control para evitar la propagación de enfermedades STA Laboratories Datos importantes • La mayoría de los patógenos están presentes antes de plantar (material infectado) • La mayoría de los patógenos están distribuidos desigualmente y se detectan en partes específicas de plantas o estaciones • Vides infectadas reducen la calidad de la uva, el rendimiento, y la calidad del vino • Plantando material libre de enfermedades aumenta la vida de los viñedos STA Laboratories Métodos de ensayo TEST DETECTA ESPECIFICIDAD/SENSITIVIDAD Indexado Biológico Susceptibilidad a la enfermedad bajo/bajo Molecular: PCR/Taqman Ácido nucleico del Patógeno alto/alto Molecular: ELISA Proteina del Patógeno moderado/bajo Nota: para resultados fiables , recomendamos usar más de un método de ensayo STA Laboratories Indexado Biológico Twig from suspected diseased plant STA Laboratories Healthy indicator plant with T-shaped cut Diseased bud or bark put in cut of indicator plant New growth of indicator plant develops typical symptoms Indexado Biologico : 2-3 años STA Laboratories Ensayo de inmunoabsorbencia con enzima ligada (ELISA) Rootstock and scion grown in the greenhouse or the field 1. 2. 3. Wash Wash E E Extract plant sap (leaf, petioles, and stems) 4. Wash E E E E E E ELISA 1. Specific antibody is adsorbed to plate 2. Test sample containing virus is allowed to bind to specific antibodies 3. Enzyme-labeled specific antibody binds to virusantibody complex 4. Enzyme substrate produces color reaction STA Laboratories Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) POLYMERASE CHAIN REACTION PCR product of round Target DNA 1 2 3 Melt DNA Repeat PCR cycles Anneal Primers Gel Electrophoresis (Verify fragment length) Extend DNA STA Laboratories 4 5… TaqMan® vs. RT-PCR GLRaV-3 Dilutions 1:1 1:10 1:100 Undetected 1:10000 STA Laboratories 1:1000 Dilutions: 1:1 1:10 1:100 1:1000 1:10000 Cultivo de Hongos Cylindrocarpon spp. STA Laboratories Cultivo de Bacteria Medio Selectivo STA Laboratories Cultivo de Agrobacterium Medio Selectivo STA Laboratories Razones para hacer Pruebas de Analisis de Vid • Determinar la salud de vid antes de plantar o injertar (material limpio de plantación) • Determinar la causa del problema de viñedo • Determinar la presencia de patógenos antes de la compra o la replantación • Monitoriar para detectar la presencia de patógenos y aplicar medidas de control para evitar la propagación de enfermedades STA Laboratories Cada projecto de testado genera muchas preguntas • Reazon(es) para hacer las pruebas de diagnóstico? • ¿Cuántas plantas hay en el cuartel? • ¿Cuál es la edad de las plantas? • ¿Cuál es la salud del viñedo (cochinillas, nematodes, y la presencia de otro estrés)? • ¿Cuál es el presupuesto disponible para efectuar las pruebas? STA Laboratories Factores a tener en cuenta El número de muestras a testar dependera: • Conocimiento de la historia del viñedo (traceamiento de plantas madres, sanidad general, portainjertos, estrés, etc.) • La diversidad de la plantacion y número de plantas en el cuartel (número de variedades de clon y portainjerto) • Presupuesto disponible STA Laboratories Detección de Enfermedades Transmitidas por Injerto Metodologia de Muestreo – tres casos Material limpio para plantación Muestreo para asegurar que las plantas sean libres de patógenos transmitidos por injerto antes de plantar Decaimiento de la vid causada por bacteria, hongos, o virus Proceso de muestreo para asegurar la detección del agente causal de enfermedad (patógeno) Problema en el viñedo- sospecha infección viral Proceso de muestreo para asegurar la detección de virus associado con Leafroll o la enfermedad de rugosidad de la madera STA Laboratories Nueva Plantación STA Laboratories Detección de Patógenos (antes de plantar) Virus y Bacteria (HealthCheck Panel A, B, CG): • Muestras de bloques de madre (tanto portainjerto y clón en el vivero) • Se recomienda repetir la prueba después de la terminación a campo Hongos patógenos y agalla de corona: (HealthCheck Fungal y Panel CG) • Recoja las muestras después de la plantacion en el vivero de campo (hacer las pruebas después del almacenamiento en frío) STA Laboratories Health CheckTM Panel A (ELISA and RT-PCR) • Grapevine virus A, B, D • Grapevine fleck virus • Grapevine Syrah virus-1 • Grapevine leafroll (GLRaV-1-7, and -9) (includes Leafroll-2 Red Globe strain) • Rupestris stem pitting (includes Syrah strain) STA Laboratories Health CheckTM Panel B (ELISA and RT-PCR) • • • • Arabis mosaic virus (ArMV) Grapevine fanleaf virus (GFLV) Tobacco ringspot virus (TRSV) Tomato ringspot virus (ToRSV) STA Laboratories HealthCheckTM Fungal Panel Phaeoacremonium spp., Phaeomoniella spp Botryosphaeria spp., Eutypa spp., Cylindrocarpon spp., and other pathogenic fungi. New! Molecular identification STA Laboratories Health CheckTM Panel CG and PD (culture, ELISA and PCR) Detects pathogenic strains of Agrobacterium vitis. Detects: Xylella fastidiosa (Pierce’s disease causal agent) STA Laboratories Estrategia de Muestreo • Muestree un mínimo de 5-10 plantas (3-4 sarmientos por planta) por variedad (menos es aceptable para HealthCheck Panel B y Fungal) Si todas las muestras no muestran evidencia de infección • Testar otra vez un tercio de las plantas (nuevas muestras de las mismas plantas) Si todas las muestras no muestran evidencia de infección, prosiga con el proyecto de injerto STA Laboratories Muestreo de Estacas (clón y portainjerto) STA Laboratories Muestras de plantas injertadas (bacteria, hongos, y virus) despues del almacenamiento en frío STA Laboratories Vid Injertada con Estrias Necróticas y Gomosis. STA Laboratories Decaimiento de la vid causada por bacteria, hongos, o virus (sospecha hongos y/o Virus) STA Laboratories Síntomas Foliares (pueden confundirse con síntomas virales o PD) STA Laboratories Decaimiento en el Campo Tomar muestras representativas de las plantas sintomáticas y envíe al lab para el testado: • HealthCheck Panel A • HealthCheck Panel B • HealthCheck Fungal Panel • HealthCheck Panel PD (otros tests dependiendo en los síntomas) STA Laboratories La raiz y tronco en bolsas separadas STA Laboratories Muestra adecuada STA Laboratories Secciones del Tronco y Síntomas Externos Delatan Grietas, Estrias y Puntos Necróticos STA Laboratories Problema en el viñedo- sospecha infección viral STA Laboratories STA Laboratories Leafroll: vista de cerca Muestra de cordon STA Laboratories Muestra de Sarmiento STA Laboratories Muestra Típica HealthCheck Panel A STA Laboratories Suggested Tests Subject representative symptomatic vines to: • HealthCheck Panel A • HealthCheck Panel B • HealthCheck Fungal Panel • HealthCheck Panel PD • HealthCheck Panel RB Test additional samples if results cannot explain symptoms STA Laboratories Tests en los Laboratorios de Eurofins STA • Paneles HealthCheckTM utilizan métodos sensitivos, un muestreo especifico, y en las épocas mas indicadas • Paneles HealthCheckTM y las pruebas individuales incluyen como mínimo, dos procedimientos de prueba diferentes (por ejemplo, ELISA, RT-PCR, PCR, cultivo microbiologico) para asegurar la confianza en los resultados • Personal capacitado en el diagnóstico (actualización y cooperación científica con laboratorios nacionales e internacionales) STA Laboratories Asesoramiento de Enfermedad • Recomendación de Muestreo Panel A • Estacas durmientes, tallos y pecíolos de vid (tarde en otoño- invierno) Panel B • Hojas y brotes jóvenes (temprano en la primavera/verano) Panel CG (Agallas de cuello)/Hongos • Muestras del cuello, tallo, unión de porta-injerto/clon y raíces en cualquier época del año Panel PD (Pierce’s Disease • Hojas y tallos tarde en el verano/otoño STA Laboratories Calendario de Servicios de Diagnóstico Integral en Vid y Visitas de Campo Ene Feb Mar Abr May Jun Jul Ago Sep Oct Nov Panel A Panel B Agrobacterium vitis y Hongos de Tronco Xylella fastidiosa Visita de Verano Visita de Otoño Visita de Invierno Visita de Primavera STA Laboratories Dic Cada Prueba de Analysis Requiere un tipo de Muestra Diferente Courtesy of Jim Lamar STA Laboratories Concentración de GLRaV -1 y -3 en diferente partes de la planta Average OD (A 405 nm) 2 Young leaf Old leaf (bottom) Stem (bottom) Stem (top) 1.5 Petiole Symptomatic leaf 1 0.5 0 GLRaV-1 STA Laboratories GLRaV-3 Distribución de Grapevine Associated Virus -1 en tallo y hojas This image cannot currently be display ed. Average OD 2.5 (A 405 nm) 2 leaves stems 1.5 1 0.5 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Node Number STA Laboratories Distribución de GLRaV-1 en Estacas Durmientes Concentracion alta de virus Concentracion baja de virus No se detecta virus STA Laboratories HealthCheck Panel A Informe de Test Sample ID LR1 LR2 LR2 LR3 LR4 LR5 LR6 LR7 LR9 GVA GVB GVD GSy FK RG RSP RSP SY Blk 1 V1 NE NE NE NE NE NE NE NE NE NE NE NE NE NE POS N E Blk 2 V2 NE NE POS N E NE NE NE NE NE NE POS N E NE NE POS POS Legend: N E: No evidence of infection POS: Positive STA Laboratories ¿Cómo se interpretan los resultados? GLRaV-2 (LR2) Puede causar la enfermedad de enrollamiento de la hoja (leafroll), la incompatibilidad del injerto y la mortalidad de vid. Efectos pueden ser graves cuando injertadas en Kober 5BB, Teleki 5C, y 1103 Paulsen GVB Puede causar “corky bark” (la unión del injerto puede inflamarse). Los síntomas pueden intensificarse cuando se presentan otras enfermedades RSPaV (RSP-SY). Puede causar “stem pitting”, enrojecimiento de hojas, inflamación de la unión del injerto, decaimiento de vid. STA Laboratories HealthCheck Panel RB Sample ID RB Blk 1 V1 POS Blk 2 V2 POS Legend: N E: No evidence of infection POS: Positive RB (Grapevine red blotch associated virus) STA Laboratories RB POS GRBaV es un nuevo virus de ADN con relación distante con Geminiviridae (50% de identidad). Se necesita más investigación para vincular la presencia de este virus con síntomas observados en el viñedo (hojas con manchas rojas y un contenido reducido de azúcar). El trabajo en el laboratorio sugiere que los hongos patógenos también pueden desempeñar un rol en desarrollo de síntomas de “mancha foliar roja". Para el diagnóstico completo sugerimos las pruebas HealthCheck Panel A, RB, y hongos patógenos STA Laboratories ¿Cómo se interpretan los resultados? • Positivo: – Hay certeza de la infección • Negativo: – El patógeno no se detecto (no hay evidencia de infección) No hay garantía de la libertad de la infección STA Laboratories los resultados de laboratorio ayudan a hacer decisiones de injerto y plantación • Se Evitará la propagación de la vid infectada si un análisis de la muestra da positiva para ciertas bacterias, hongos y virus • Se Evitará el injerto de plantas infectadas con bacterias, hongos y virus (puede afectar la toma de injerto) • Ayudará a desarrollar material de material de propagación libre de patógenos STA Laboratories Confiabilidad de las Pruebas Positivos Falsos (nunca debería ocurrir) • Contaminación del Laboratorio • La falta de métodos optimizados / uso de controles adecuados Negativos Falsos • la distribución y concentración de patógenos en la planta • La falta de caracterización del agente patógeno (agente de enfermedad nuevo?) STA Laboratories Temario Tercera Parte: Estrategias para el Control de Enfermedades de la Vid • Programas de Certificación en California • Desarrollo de barbechos sanos • Ejemplos de éxito en el desarrollo de material sano (Efecto sobre la Producción de Uva y Calidad de Vino) • Extensión de la enfermedad del enrollado de la hoja de vid (Grapevine Leafroll Disease) en California y Sudafrica • Gerenciamiento y practicas para evitar la extensión de la enfermedad • Control y Prevención de Infección en el viñedo • Conclusiones/Recomendaciones STA Laboratories Programas de Cuarentena y Certificación • Origen de Vitis vinifera: desde Europa Occidental a las costas de Persia del Mar Caspio • Las vides se han adaptado a muchos ambientes: Enfermedades y plagas se han movido con el material de plantación y se han adaptado a climas diferentes • Nuevas infecciones comienzan a partir de nuevas ubicaciones • Programas de Cuarentena y certificaciones pueden ayudar a producir material de plantación sano STA Laboratories Programas de Cuarentena • Tratan de proteger las zonas donde la enfermedad no existe (evitar la introducción de plagas y enfermedades) El sistema a veces falla • Muchos patógenos no se conocían o no podían ser detectados cuando el material vegetal se introdujo inicialmente • Nuevos métodos de detección se han desarrollado (y estan en desarrollo) para detectar la presencia de patógenos : STA Laboratories Plagas de Cuarentena Polilla Europea de vid (EGVM) Lobesia botana (EGVM) • Introduccion accidental (escapó la detección de cuarentena) • Se alimenta en flores y frutos • La alimentación desencadena la infección por Botrytis cinerea y otros microrganismos de pudrición de fruta Resultado Final: la pérdida (calidad y cantidad) de frutas STA Laboratories Material de Plantacion y Dinámica de Enfermedad • Origen de Vitis vinifera: desde Europa Occidental a las costas de Persia del Mar Caspio • Las vides se han adaptado a muchos ambientes • Enfermedades y plagas se han movido con el material de plantación y se han adaptado a climas diferentes • Nuevas infecciones comienzan en nuevas zonas de plantación • Programas de Cuarentena y certificación ayudan pero escapes pueden ocurrir STA Laboratories Material de Plantación (Chile) STA Laboratories Material de Plantación Francia - Borgoña STA Laboratories Material de Plantación Francia - Burdeos STA Laboratories Material de Plantación California - Napa STA Laboratories Material de Plantación California - Sonoma STA Laboratories Material de Plantación Mismo Origen • Origen de Vitis vinifera: desde Europa Occidental hasta las costas Persas del mar Caspio • Las vides se han adaptado al medio ambiente (viñedos se encuentran en todos los continentes excepto la Antártida) • Enfermedades y plagas se han movido con el material de plantación (también nuevas infecciones se producen en lugares nuevos) • Algunos síntomas de la enfermedad pueden confundirse con desequilibrios nutricionales. • El manejo de los viñedos pueden influir el desarrollo de los síntomas y propagación de la enfermedad STA Laboratories Programas de Certificación • ENTAV -Francia • FPS – CDFA UC Davis, EEUU (tambien otros estados) • KWV- Vititec Sud Africa • Nueva Zealandia • VINA-Australia En la mayoría de los países en los esquemas de certificación están a cargo de organismos oficiales, mientras que en Nueva Zelandia es un sistema totalmente privado STA Laboratories Programas de Certificacion de Vid Test para la ausencia de virus: ELISA/PCR: Genotipos: Ampelograficos y geneticos (True to type) En el momento, ningun programa tiene control de bacteria y hongos patogenos STA Laboratories CALIFORNIA REGISTRATION & CERTIFICATION PROGRAMS GRAPES FRUIT & NUT TREES STA Laboratories STRAWBERRIES STA Laboratories FOUNDATION PLANT SERVICES: GRAPE CLEAN STOCK PROGRAM STA Laboratories Programa de Certificación de Vid en California (CDFA) El reglamento actual: 1984 (en revisión) Bloque Fundación índixado biológico se realiza durante la introducción y dos inspecciones visuales (pruebas realizadas por FPS) Bloque Incremento y Vivero inspección visual anual (pruebas de laboratorio si se observan síntomas) STA Laboratories Nuevo reglamento (Julio 2010) Bloque Fundación Pruebas avanzadas, además de las pruebas índixado tradicional en todas las plantaciones de la fundación Bloque Incremento (Primario) Las plantaciones originan en el bloque Fundación Bloque Incremento (Secundario) Las plantaciones originan en el bloque Fundación o Bloque Incremento (Primario) STA Laboratories Erradicación de Virus • Termoterapia: Nepovirus: Foveavirus: ArMV,GFLV,GRSPaV, ToRSV,TRSV RSPaV • Cultivo de Meristema: Clostero/Ampelovirus: GLRaV-1 a -9 Tymovirus: GFkV, GSyV-1/GVQ Vitiviruses: GVA, GVB, GVD STA Laboratories Erradicación de enfermedades Cultivo de Meristemas Meristemas apicales se extraen de una planta infectada y cultiva in vitro. Los plantines regenerados se aclimatan en el invernadero para ser luego propagadas e injertadas STA Laboratories Plantines en cultivo STA Laboratories HealthCheckTM Asesoramiento y Erradicación Selección de vid se elije por calidad de vino Programa HealthCheck Asesoramiento de enfermedad Eliminación de enfermedad Micro propagación y Aclimatación Viñedo con nueva selección Selección libre de enfermedad se injerta en el vivero STA Laboratories Virus Effects on Fruit Quality of Cabernet Sauvignon on Six Different Rootstocks Deborah A. Golino, CE Specialist Plant Pathology Dept./Foundation Plant Services, UC Davis Jim Wolpert, Viticulture and Enology Dept., UC Davis Susan T. Sim, Staff Research Associate, UC Davis Jason Benz, Staff Research Associate, UC Davis Mike Anderson, Staff Research Associate, UC Davis STA Laboratories Objectivos: La evaluacion del efecto de virus (grapevine leafroll, corky bark, y rupestris stem pitting) en el crecimiento, rendimiento, y composicion quimica del jugo en Cabernet Sauvignon injertada a seis variedades de pie differentes. STA Laboratories Deborah A. Golino, CE Specialist Virus / Rootstock effects Trial • Oakville Experiment Station, Napa Valley • Seis portainjertos plantados en Aug/2001 • Cabernet Sauvignon sano y enfermos se injerto en Mayo 2002 • 1.5 x 2 m espaldera bilateral, irrigacion a goteo • RCBD 5 reps, 30 plantas/virus/portainjerto, 630 plantas • Fruta cosechada en 2005, 2006 • El viñedo se elimino en 2007 (dispersion de virus fue evidente) STA Laboratories Deborah A. Golino, CE Specialist Seis Portainjertos: 1. 2. 3. 4. 5. 6. 110R 101-14 Mgt 1103 Paulsen 3309 Couderc Kober 5BB St. George STA Laboratories extra 16 Row 1 Rep 1 2 3 4 Rep 2 5 6 7 Rep 3 8 9 10 Rep 4 11 12 13 Rep 5 14 15 v37-42 110R Hlthy 5BB RSP115 3309C LR109 St Geo RSP115 1103P LR109 5BB Hlthy St Geo Hlthy 5BB LR109 1103P Hlthy 3309C LR101 St Geo LR109 110R LR109 1103P LR109 110R RSP115 3309C RSP115 v32-36 101-14 LR101 1103P RSP115 1103P LR109 1103P LR101 110R RSP115 1103P Hlthy 3309C LR109 3309C Hlthy 101-14 Hlthy 5BB LR101 1103P RSP115 St Geo LR101 1103P Hlthy 110R Hlthy 3309C Hlthy v27-31 3309C LR101 110R LR101 110R LR109 St Geo LR101 5BB LR101 1103P RSP115 110R LR109 1103P LR101 101-14 LR109 101-14 RSP115 110R RSP115 110R LR101 101-14 LR101 5BB Hlthy St Geo Hlthy St Geo LR102 v22-26 3309C RSP115 St Geo Hlthy 101-14 RSP115 3309C Hlthy 3309C LR101 110R LR101 1103P LR109 110R Hlthy St Geo LR109 3309C LR109 3309C RSP115 St Geo RSP115 101-14 RSP115 5BB LR109 1103P LR101 3309C LR102 v17-21 5BB Hlthy St Geo LR109 St Geo RSP115 5BB LR109 110R LR109 101-14 RSP115 3309C LR101 3309C RSP115 St Geo LR101 101-14 Hlthy 5BB Hlthy 1103P LR109 110R LR101 5BB RSP115 101-14 LR109 110R LR102 v12-16 5BB LR101 101-14 Hlthy 101-14 LR109 101-14 LR101 3309C RSP115 5BB RSP115 101-14 RSP115 5BB LR101 1103P RSP115 101-14 LR101 St Geo Hlthy 1103P LR101 3309C LR109 St Geo RSP115 110R LR109 5BB LR102 v7-11 St Geo LR101 5BB LR109 3309C Hlthy 101-14 Hlthy 101-14 LR109 3309C LR109 110R RSP115 5BB Hlthy St Geo RSP115 110R Hlthy 5BB LR109 5BB RSP115 St Geo LR101 5BB LR101 St Geo LR109 101-14 LR102 v1-6 1103P LR101 110R RSP115 1103P Hlthy St Geo LR109 St Geo Hlthy 110R Hlthy 5BB RSP115 110R LR101 101-14 LR101 3309C Hlthy 101-14 LR109 1103P Hlthy 101-14 Hlthy 3309C LR101 1103P RSP115 1103P LR102 Row 1 2 Rep 1 3 4 5 Rep 2 6 7 8 Rep 3 9 10 11 Rep 4 12 13 14 Rep 5 15 Deborah A. Golino, CE Specialist 16 extra Plan Experimental 1 2 3 4 5 Tratamiento Healthy LR101 LR109 RSP115 LR102 (demo only) STA Laboratories Virus Ningun LR3, RSP LR2, 3, GFkV, RSP RSP LR1, 2, 5, GVB, RSP Rep 1 2 3 4 Rep 2 5 110R H 5BB RSP115 3309C LR109 St Geo RSP115 1103P LR109 v32-36 101-14 LR101 1103P RSP115 1103P LR109 1103P LR101 v27-31 3309C LR101 110R LR101 110R LR109 St. Geo LR101 Row 1 v37-42 v22-26 St Geo St. Geo. LR109 RSP115 5BB H v12-16 101-14 5BB 101-14 H LR101 LR109 v7-11 St. Geo LR101 v1-6 1103P LR101 Row 1 5BB LR109 101-14 LR101 5BB LR101 110R LR109 2 Rep 1 3 4 Rep 3 8 5BB H St Geo H 5BB LR109 St Geo H 5 Rep 2 9 10 Rep 4 11 12 13 1103P H 3309C LR101 St Geo LR109 110R LR109 1103P LR109 3309C 5BB 3309C H 101-14 H LR109 LR101 110R LR109 1103P LR101 101-14 LR109 101-14 110R RSP115 RSP115 110R LR101 1103P LR109 110R H St Geo LR109 101-14 RSP115 3309C LR101 3309C St. Geo 101-14 H 5BB H RSP115 LR101 3309C LR109 6 7 8 Rep 3 5BB H St Geo R/W St. Geo LR102 5BB LR109 1103P LR101 3309C LR102 110R LR102 1103P LR101 3309C LR109 St Geo RSP115 110R LR109 5BB LR102 5BB LR101 St Geo LR109 101-14 LR102 101-14 101-14 3309C 3309C H 1103P H 101-14 H LR101 LR109 LR101 1103P RSP115 1103P LR102 5BB LR109 110R LR101 3309C R/W 101-14 LR109 St Geo 110R H RSP115 5BB RSP115 110R 3309C RSP115 RSP115 5BB RSP115 St Geo H 110R H extra 16 110R LR101 101-14 LR101 5BB H 101-14 LR101 15 1103P LR109 1103P RSP115 110R RSP115 110R LR101 3309C St Geo 101-14 RSP115 RSP115 RSP115 5BB LR101 3309C LR109 Rep 5 14 1103P St. Geo 1103P H 110R H RSP115 LR101 1103P RSP115 3309C 5BB 101-14 RSP115 RSP115 RSP115 101-14 5BB 3309C H 101-14 H LR109 LR109 110R St Geo 1103P H RSP115 LR109 7 110R 1103P H RSP115 3309C St. Geo. 101-14 3309C 3309C H RSP115 H RSP115 LR101 v17-21 6 9 10 11 Rep 4 5BB St. Geo RSP115 LR101 12 13 14 Rep 5 15 16 extra Deborah A. Golino, CE Specialist Leafroll redujo Brix 1-2 grados; RSP ningun effecto significativo Brix levels at harvest for virus-infected and healthy Cabernet Sauvignon clone 5 on 6 rootstocks mean data 2005-06 27 degrees Brix 26 LR109 LR101 RSP115 Healthy 25 24 23 22 21 110R 101-14 Mgt 3309C 1103P St George Kober 5BB Rootstock STA Laboratories Deborah A. Golino, CE Specialist El rendimiento fue dependiente en virus y portainjerto Yield for virus-infected and healthy Cabernet Sauvignon clone 5 on 6 rootstocks mean data 2005-06 LR109 LR101 RSP115 Healthy 3.5 3 kg/vine 2.5 2 1.5 1 0.5 0 St George 101-14 Mgt 3309C 110R 1103P Kober 5BB Rootstock STA Laboratories Deborah A. Golino, CE Specialist Cabernet Sauvignon injertado 110R 110R 101-14 Mgt 101-14 Mgt STA Laboratories 1103P 11 03P 5BB 3309C Kober Kober 5BB 3309C St. George Deborah A. Golino, CE Specialist Contenido de Azucar en planta sana (verde) y plant infectada (naranja) Cabernet Sauvignon clones n = 30, mean of 2 years, harvest dates 9-25-05 & 10-12-06 Figure 3. Sugar content, mean of 2 years Virus-infected parent Healthy tissue cultured progeny 26 24.8 degrees Brix 25 24.8 24.2 24 23 22 22 21 19.9 19.9 20 19 VIS 29 & FPS 29 VIS 30 & FPS 30 VIS 31 & FPS 31 Cabernet Sauvignon clone STA Laboratories Deborah A. Golino, CE Specialist Erradicación de Virus es Beneficioso (2006, 2009 ICVG) Italia (Eliminó GLRaV-1, GVA) Aumento de la fotosíntesis y la nutrición, que se tradujo en mayor rendimiento de fruta Francia (Eliminó GLRaV-1, -2, -3, GFkV, GVB) Mejor Vigor, aumento de la producción de fruta y mayor contenido de azúcar (9% de incremento) Mejora de la acidez (3% de disminución) Italia-(Eliminó GLRaV-3) Mejora de canopia que se tradujo en mejor maduración de fruta Alto contenido de sólidos solubles y menor acidez titulable STA Laboratories ¿Cual patógeno es más importante? • Todos GLRaVs puede causar los mismos síntomas, pero en general no matan a la vid (afectan a la calidad de frutas y causan decaimiento lento) Cepas variantes de GLRaV-2 (RG, BD, Alfie) causan incompatibilidad de portainjerto • Todos los hongos y los virus que causan decaimiento pueden causar mortalidad rápida STA Laboratories Transmisión y Propagación • Muchos hongos patógenos y Agrobacterium estan presente en el suelo • Algunos GLRaVs y Vitiviruses (GVA, GVB) se transmiten por cochinillas y cochinillas blandas • Todos los virus de decaimiento (GFLV, ArMV, etc) son transmitidos por nematodos que permanecen en el suelo por muchos años • Todos los patógenos se propagan por estacas (transmisión humana) STA Laboratories Leafroll: transmisión natural (photos by R. J. Gill) Cochinilla de vid STA Laboratories Cochinilla de cola larga Parthenolecanium corni • Transmite GLRaV-1 Pulvinaria innumerabilis • Transmite GLRaV-1 y GLRaV-3 STA Laboratories Virus Transmitidos por Cochinillas • GVA: Shiraz Disease y Kober Stem Grooving • GVB: Corky Bark • GLRaV-3/ y otros Ampelovirus: Leafroll (enrollamiento) STA Laboratories Difusión de Leafroll STA Laboratories Leafroll disease is spreading rapidly in a Napa Valley vineyard by Deborah A. Golino, Ed Weber, Susan Sim and Adib Rowhani University of California- Davis STA Laboratories Difusión de Leafroll en el Valle de Napa, California • Mayor difusión de enrollamiento de los últimos años • Se comenzó a documentar difusión en 2002 Deborah A. Golino, CE Specialist STA Laboratories Mapped Area - 7.2 acres Block 1 CS planted 1989 Old CS vines planted 1970-72 Block 2 Heavy Leafroll Pulled 1994 - Replanted 1998 STA Laboratories Deborah A. Golino, CE Specialist STA Laboratories Deborah A. Golino, CE Specialist STA Laboratories Deborah A. Golino, CE Specialist 2002 Total Leafroll Rating: 23.3% Golino et, al, 2008 STA Laboratories Deborah A. Golino, CE Specialist 2003 Total Leafroll Rating: 41.2% Golino et, al, 2008 STA Laboratories Deborah A. Golino, CE Specialist 2004 Total Leafroll Rating: 45.8% Golino et, al, 2008 STA Laboratories Deborah A. Golino, CE Specialist Total Leafroll Rating 2002 23.3% 2003 41.2% 2004 45.8% 2005 49.8% Golino et, al, 2008 STA Laboratories Deborah A. Golino, CE Specialist Row no LR no vine Year in which leafroll symptoms were observed 2002 2003 2004 2005 2006 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 160 0 0 1 0 5 2 1 1 3 1 3 4 2 0 0 0 2 0 1 1 1 0 0 5 1 0 1 0 1 0 1 0 0 0 0 0 1 1 2 2 1 1 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 2 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 159 1 1 3 0 2 0 1 1 1 1 4 3 1 1 0 0 0 0 1 0 0 1 1 2 0 0 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 158 1 0 1 0 1 1 0 1 1 1 2 2 2 1 1 0 0 0 0 1 0 1 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 1 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 157 1 0 1 0 1 1 0 2 1 0 1 3 1 1 1 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 156 0 0 0 1 2 1 2 3 1 1 2 1 1 2 0 1 0 0 0 0 1 0 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Golino, CE Specialist STA Laboratories Deborah A. Golino, CE Specialist Difusion de Leafroll • Las cochinillas so dificiles de ver • Introduccion de cochinillas • Un incremento en el movimiento de vectores (cochinillas) por maquinaria y trabajadores de campo STA Laboratories Patrones de Difusión del virus Leafroll (G. Pietersen - Sud Africa ) • Primaria- Aparición temprana y al azar en los viñedos recién plantados (asociadas a material de plantación infectados) • Secundaria-Presencia significativa de vides infectadas al lado de otra en la misma fila o también se difunde a las filas adyacentes • Secundaria-Aparición de plantas infectadas en los viñedos recién plantados pero correlacionado con viñedos anteriormente infectados STA Laboratories Difusión Secundaria STA Laboratories Otros Patrones de Difusión: • Gradientes de plantas infectadas desde los bordes hacia el centro del viñedo o abarcando el viñedo entero Difusión de los vectores desde viñedos infectados adyacentes o distantes que comparten trabajadores y herramientas (trabajadores, pájaros, viento, herramientas de viñedo y/o la mobilidad propia de vectores) STA Laboratories Prevención y Control de Enfermedades en el Viñedo • Plantar material testado (libre de patógenos) • Si es posible plantar la viña donde no existía otros anteriores (usar rotacion de cultivos) • Controlar insectos, nematodos, y malezas • Usar material resistente a enfermedades y nematodos STA Laboratories Prevención y Control de Enfermedades en el Viñedo • Desinfectar las herramientas de campo • Usar trampas de insectos para determinar el número de insectos y hacer los tratamientos necesarios • Realizar visitas de campo para observar y muestrear (presencia de patógenos) • Si una prueba de laboratorio es positivo no propagan la fuente de infección STA Laboratories Prevención y Control de Enfermedades en el Viñedo • Desinfectar las herramientas de campo • Usar trampas de insectos para determinar el número de insectos y hacer los tratamientos necesarios • Realizar visitas de campo para observar y muestrear (presencia de patógenos) • Si una prueba de laboratorio es positivo no propagan la fuente de infección STA Laboratories Control de Enfermedades causadas por hongos en el Vivero • Tratamiento de agua caliente (50 º C-30 min) • Ozonización • Control de la higiene en la mesa de los injertos y de almacenamiento en frío • Uso de tratamientos profilácticos (fungicidas y control biológico) • Uso de cultivos de cobertura (bio-fumigación) en el vivero de campo STA Laboratories Control de Enfermedades causada por Hongos Plantar vides de alta calidad (testadas y libre de enfermedades) Manejo del cultivo: Plantaction, riego, y fertilización correcta Evitar situaciones de estrés Evitar la producción de fruta temprana Poda doble o poda tardia Protección de la herida (fungicidas, pinturas + ácido bórico) Usar cultivos de cobertura Tratamientos con Fungicidas (en desarrollo) Cirugía Correctiva STA Laboratories Cultivo de Cobertura (liberación de isothiocyanatos volátiles) STA Laboratories Pierce’s Disease Control • Plantar vid libre del patógeno • Control de malezas e insectos • Determinar el número de insectos y aplicar tratamientos químicos según sea necesario Evitar el uso de plantas ornamentales que son susceptibles de Xylella (rosas) STA Laboratories Colleccion de Chicharritas en Tarjetas Pegajosas STA Laboratories Las rosas son indicadores Oidio (pero portadores Xylella fasitidiosa) STA Laboratories • Manejo del viñedo Control de Virus Transmisión por Injerto • Realizar prueba de analisis en los portainjertos y variedades antes de injertar (portainjertos no muestran síntomas) • Utilizar herramientas de campo y equipo dedicado al viñedo • Controlar Nematodos, cochinillas • Seguimiento y visitas frecuentes de campo para detectar posibles problemas • Eliminación las vides infectadas STA Laboratories Control de Leafroll • Comenzar con material de plantación limpio (libres de enfermedad) • Monitorear (y tratar) cochinillay otros vectores • Introducir medidas sanitarias (ropa de campo, equipos, etc) • La eliminación de vides infectadas seguido por períodos libres de plantacion (hasta tres años) • Educación y comunicación entre los productores STA Laboratories Estrategia de Eliminación de Plantas • Someter a prueba de analisis las vides con síntomas (determinar la causa) • Tratar infectados vid con el insecticida y un herbicida sistémico • Elimine sistema de raíces • Elimine las vides adyacentes (períodos de descanso) • Control de cochinillas y hormigas STA Laboratories Recomendaciones • Comenzar con la mejor calidad disponible para evitar remover plantas infectadas • Planear con tiempo: la vid se injerta un año antes de plantar • Determine cual es la mejor combinación de clon y portainjerto • Requiera que ambos, el clone y porta-injerto, sean testados para detectar los patógenos mas importantes • Inspeccione las plantas antes de plantar y evite plantas con una unión pobre de clone y porta-injerto • Una vez establecidas no hay cura para enfermedades causadas por virus y bacteria (y algunos hongos) • Mas vale prevenir que curar! STA Laboratories Recomendaciones (cont.) • Un factor clave en la producción de vino de calidad es la uniformidad de plantación • El coste de reemplazar vides es enorme (se estima 10 veces el coste inicial de plantación) • Use cautela, cuidado, y buenas decisiones antes de plantar • Resista la tentación de hacer las cosas con apuro • Enfoque en calidad y sanidad de las plantas • Recuerde que plantar un viñedo es una inversión de largo plazo • Un viñedo productivo deberá durar mas de 100 años STA Laboratories Prevención y Control de Enfermedades en el Viñedo • Plantar material testado (libre de patógenos) • Si es posible plantar el viñedo donde no existía otros anteriores (usar rotacion de cultivos en el vivero) • Controlar insectos, nematodos, y malezas • Usar material resistente a insectos y nematodos STA Laboratories Manejo del viñedo Control de Virus • Transmisión por Injerto • Realizar prueba de analisis en los portainjertos y variedades antes de injertar (portainjertos no muestran síntomas) • Utilizar herramientas de campo y equipo dedicado al viñedo • Seguimiento y visitas frecuentes de campo para detectar posibles problemas • Eliminación de las vides infectadas y control de nematodos y cochinillas STA Laboratories Control de Difusión de (Leafroll)Virus • Comience con material de plantación limpio (Pruebas de laboratorio determinara el estado de infección) • La eliminación de vides infectadas es importante (Reduce la fuente y la cantidad de inóculo viral) • control de vectores y evitar su difusión en la viña (Una cochinilla virulífera es suficiente para iniciar la infección) STA Laboratories Control Difusión Secundaria de (Leafroll) Virus • Las vides infectadas deben ser removidos por completo (Remover las raíces y / o no permitan que la vid produzca nuevos brotes -usar herbicidas sistémicos) • Tratar las vides adyacentes con insecticida sistémico • Los períodos de descanso puede ayudar a evitar la transmisión de virus (Nueva generaciones de cochinillas no tienen capacidad de transmitir virus) STA Laboratories Prevención de Difusión de Virus – Viñedos Adyacentes • Mantenga una distancia prudente entre viñedos infectados • Nueva plantación de vid de orientación perpendicular en vez de paralela al viñedo infectado • La eliminación de dos o más filas de plantas es beneficioso STA Laboratories Prevención de Propagación de Virus en Nuevos Viñedos • Remueva todas las plantas (viñedo esta completamente infectado) (Siga el mismo protocolo para la eliminación de las raíces / tratamiento con herbicidas) • Los períodos de descanso son necesarios para romper la generación de vectores virulíferos • Tratamiento con insecticida sistemico durante los tres primeros años de nueva plantación es efectivo (aplicación de insecticidas en el vivero) STA Laboratories Más Medidas de Prevención: • Empezar a trabajar en el viñedo sano -trabajadores y herramientas pueden desplazarse a los viñedos infectados al final del dia (horario de trabajo en días alternos) • Saneamiento de las herramientas y ropa de los trabajadores • Las barreras físicas (protección contra el viento) han demostrado ser eficaces en Nueva Zelandia STA Laboratories Control de Enfermedades causada por Hongos Plantar vides de alta calidad (testadas y libre de enfermedades) Manejo del cultivo: Plantaction, riego, y fertilización correcta Evitar situaciones de estrés Evitar la producción de fruta temprana Poda doble o poda tardia Protección de la herida (fungicidas, pinturas + ácido bórico) Usar cultivos de cobertura Tratamientos con Fungicidas (en desarrollo) Cirugía Correctiva STA Laboratories Cirugia de la Vid Nuevo sarmiento (primavera) STA Laboratories Brazo viejo (cortar durante la poda) Entrenamiento del Viñedo Poda en Guyot STA Laboratories Poda en Cordon Remover los restos de poda (son una fuente de inóculo) STA Laboratories Control de Enfermedades Causadas por Hongos en el Vivero • Tratamiento de agua caliente (50ºC-30 min) • Ozonización • Control de la higiene en la mesa de los injertos y de almacenamiento en frío • Uso de tratamientos profilácticos (fungicidas y control biológico) • Uso de cultivos de cobertura (bio-fumigación) en el vivero de campo STA Laboratories Mycorrhizas Sin tratamiento Rhizo-Gen Mycorrhizas Photos courtesia B. Coulthard Genesis Soils STA Laboratories Cultivo de Cobertura STA Laboratories Control Agallas de Corona • Plantar vides libres de Agrobacterium • Evitar plantar vides que se propagaron de plantas madres en areas infectadas con Agrobacterium • Uso de irrigación por goteo STA Laboratories Observaciones Finales • Comience con vides libres de patógeno (es decir, material testado en el laboratorio) • Proteja su viñedo de la infección externa • Conozca a sus vecinos (y el estado de salud de sus viñas) • Coordinar los tratamientos pesticidas con viñedos vecinos STA Laboratories Preguntas? STA Laboratories Gracias! For more information please contact: Judit Monis, Ph.D. Eurofins STA Plant Health Services + 1-408-889-3754 JuditMonis@eurofinsUS.com www.stalabs.com Results you can trust! STA Laboratories