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XLIX Reunión Nacional de Investigación Pecuaria
Veracruz 2013
EL EMBRIÓN DE POLLO COMO AMPLIFICADOR DE LA CONCENTRACIÓN BACTERIANA A
PARTIR DE SU INOCULACIÓN CON LECHE DE CABRAS INFECTADAS CON BRUCELOSIS.
THE CHIKEN EMBRYO AS BACTERIAL AMPLIFIER FROM MILK OF SERUM POSITIVE
BRUCELLOSIS GOATS.
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Morales FY *, Martínez HDI , Pardío SVT , Bober RLN , López MA , Rosas ST , Morales AJF , Flores
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CR
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Universidad Veracruzana, Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, Escuela Nacional de
3
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Ciencias Biológicas, IPN, Universidad Veracruzana, Facultad de Nutrición, CENID-Microbiología,
INIFAP
dmartinez@uv.mx
El humano y los animales adquieren la brucelosis casi siempre por la ingestión de leche y sus
derivados sin pasteurizar; sin embargo, si la concentración bacteriana es menor a 1,000 unidades
formadoras de colonias (UFC), Brucella melitensis no puede ser aislada por métodos bacteriológicos
convencionales. Por ello, se planteó utilizar los embriones de pollo (EP), que se usan como modelo de
infección para muchos patógenos, para el aislamiento de Brucella mellitensis a partir de leche de
cabras infectadas. Así, se obtuvieron muestras de leche de 11 cabras identificadas como seropositivas
que se transportaron y dejaron reposar a 4 °C por 24 horas para separar la leche de la crema y luego
se centrifugaron a 1,000 g; la crema, se empleó para ser sembrada en forma directa en medio
selectivo de Farrell por duplicado y para preparar un inóculo con leche ultra pasteurizada que se usó
en la inoculación de EP de entre tres y cinco días de edad. La mitad de los medios sembrados con
crema en forma directa, se incubó en aerobiosis y la otra, en una atmósfera con 5 a 10% de CO 2
(velobiosis) a 37 °C por 20 días. Para la inoculación de la crema, se utilizaron 110 EP que se
inocularon en el saco vitelino y se incubaron por 72 horas. Después, se sacrificaron por refrigeración a
4 °C durante 3 horas y se les removió la membrana corioalantoidea (MCA), que se sembró por
duplicado en medio selectivo de Farrell, bajo el mismo esquema usado para la crema sembrada en
forma directa, y se mantuvieron en incubación por ocho días previos a su lectura. El análisis de los
resultados obtenidos por inoculación directa y con el uso de EP se analizó por ANOVA de Kruskal
Wallis. Así, se identificaron cuatro muestras positivas en el medio selectivo de Farrel que se inoculó de
forma directa con la crema y de las mismas cuatro que se inocularon en EP también se aisló Brucella
melitensis, lo que implica una concentración bacteriana de al menos 1,000 unidades formadoras de
colonias (UFC) en cada muestra de leche y aunque entre ambos métodos no hubo diferencias
(p>0.05) para recuperar a la bacteria, en el EP el número de UFC encontradas fue incontable. Se
concluye que para este caso ambos métodos son eficaces para el aislamiento de Brucella melitensis y
que el EP favorece la multiplicación de la bacteria y acorta el tiempo de espera para la obtención de
resultados a partir de su inoculación con leche de cabras infectadas.
Apoyado por Tornel Laboratorios
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