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MASTASTREP™
RST 201. Un examen de aglutinación en porta rápido para la
identificación de estreptococos de los grupos Lancefield A, B,
C, D, F y G.
SOLAMENTE PARA USO DIAGNOSTICO IN VITRO
Contenido
™
MASTASTREP contiene los siguientes componentes:
1. Reagentes Latex. Listos para usar. 6 x 2.5ml cada uno para
los grupos Lancefield A, B, C, D, F y G. Contiene partículas
que contienen anticuerpos específicos de conejo y menos
de un 0.1% de sodio ácido como preservativo.
2. Enzima de extracción. 2 x reagente liofilizado. Contiene
menos de un 0.01% de Thimerosal como preservativo.
3. Control polivalente. Listo para usar. 1 x 2.5ml. Contiene
menos de un 0.1% de sodio azida como preservativo.
4. 50 tarjetas de examen desechables de 6-posiciones.
5. 300 palillos para mezclar desechables y de un solo uso.
6. Folleto de instrucciones.
Estabilidad y almacenamiento
Almacenar sin abrir a 2-8°C hasta la fecha de caducidad
mostrada en la etiqueta del envase. Una vez abierto,
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MASTASTREP debe ser almacenado a 2-8°C y puede ser
usado hasta la fecha de caducidad dada en la etiqueta.
No congelar en Reagente de Látex.
Una vez reconstituido la Enzima de Extracción permanecerá
activa hasta un máximo de 3 meses cuando esta almacenada a
2-8°C. Alternativamente, la Enzima de Extracción puede ser
almacenada en alícuotas de 0.4ml a -20°C donde es activa
hasta un máximo de 6 meses o hasta la fecha de caducidad
dada en la botella, que es la mas pronta. No volver a
congelar la Enzima de Extracción en partes alícuotas.
Advertencias y precauciones
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noche en 0.4ml de Enzima de Extracción en un tubo de
examen limpio.
Incubar la mezcla en una cubeta a 37°C durante 10
minutos, agitando el tubo vigorosamente después de 5
minutos. Períodos más largos de incubación pueden
producir reacciones positivas falsas.
Agitar cada uno de los reagentes de látex para suspender
las partículas. Después, añadir una gota a cada uno de los
círculos correspondiente de la tarjeta de examen.
Usando una pipeta Pasteur, añadir 1 gota de la suspensión
a cada uno de los círculos de la tarjeta de examen.
Mezclar y repartir el fluido sobre todo el área del circulo,
usando un aplicador de mezcla limpio. Es importante usar
un aplicador limpio cada vez.
Rotar y balancear la tarjeta delicadamente hasta un máximo
de un minuto. Anotar el resultado y desechar la tarjeta de
examen de modo seguro.
Interpretación de resultados
Un resultado positivo se indicado por una agregación visible de
partículas de látex. Esto ocurrirá en unos pocos segundos de
mezcla dependiendo de la fuerza del extracto de antígeno.
Una reacción negativa es indicada por una apariencia lechosa
sin una agregación visible de las partículas de látex. El primer
látex a mostrar aglutinación fuerte indica una positiva
identificación de ese grupo específico.
Solamente la aglutinación fuerte es significante.
Ocasionalmente cepas de estreptococos pueden dar
reacciones débiles con más de un grupo. Las reacciones
débiles y granulares sin aclaramiento de fondo deben ser
ignoradas. Si la aglutinación ocurre en todos los grupos, o
también mucha enzima ha sido usada en el procedimiento de
extracción, en cuyo caso repetir el examen, o un cultivo mixto
ha sido usado, en cuyo caso comprobar para ver la pureza del
cultivo y volver a examinar.
Limitaciones de uso
Exclusivamente para uso diagnóstico in vitro. Respetar las
precauciones de seguridad y utilizar técnicas asépticas. Debe
ser utilizado solo por personal de laboratorio cualificado y con
experiencia. Antes del desecho, esterilizar todo el material
biológico. El sodio azida usado como preservativo puede ser
tóxico si se ingiere y reaccionar con cañerías de cobre y plomo
formando sales altamente explosivas. Siempre desechar
mediante la cisterna con gran cantidad de agua para reducir los
efectos. Referirse a la hoja de seguridad del producto.
Las reacciones positivas falsas(no aglutinación específica en
los reagentes de látex) pueden ocurrir con microorganismos de
géneros sin conexión por ej. Escherichia, Klebsiella o
Pseudomonas.
El grupo antígeno D es común a microorganismos de grupos Q,
R y S. Solamente el Grupo R se considera médicamente
importante.
Los resultados falsos positivos pueden ocurrir si una cantidad
inadecuada de microorganismo es usada en el proceso de
extracción.
Materiales requeridos pero no proporcionados
Control de calidad
Accesorios y productos para análisis microbiológico como
lazos, cubeta, tubos pequeños y pipetas.
Procedimiento
1. Dejar que los reagentes MASTASTREP alcancen la
temperatura ambiente antes de su uso.
2. Reconstituir la Enzima de extracción con 10.0ml de agua
destilada o desionizada antes del uso.
3. Solamente los cultivos de microorganismos de Mast Blood
Agar Base (DM100) o medios similares crecidos
frescamente durante la noche debe ser usados para
examen. Anotar las características de la colonia, hemólisis y
morfología de la célula antes de comenzar los exámenes y
asegurarse de que el microorganismo es Gram positivo y
catalasa negativo.
4. Usando un lazo estéril, coger de 2-6 colonias bien
separadas de Estreptococos sospechosos (evitando otros
tipos de colonias en la placa) y emulsionarlos en 0.4ml de
Enzima de Extracción reconstituida. Si se va a usar un caldo
de cultivo pipetar 0.1ml de un caldo de cultivo de toda la
Se recomienda que los controles de calidad se lleven a cabo
con los Polyvalent Control proporcionados para verificar que los
reagentes de latex estan funcionando correctamente. Los
Polyvalent Control no requieren extraccion o dilucion antes de
usar y deben ser usados como en los pasos 6-9 del
procedimiento anterior con 40µi del Control Positivo y 1 gota de
suspensión de látex. Todos los reagentes de latex deben
mostrar aglutinacion fuerte en 1 minuto. Tambien comprobar
periodicamente que los reagentes de latex aglutinan con
estreptococos de referencia conocidos y que ninguna
aglutinacion se ve con una solucion salina normal. Comprobar
si hay signos de deterioro. No usar los reagentes si estan
contaminados o nebulosos.
Referencias
Bibliografía disponible si se requiere.
IFU152 MM 07/07 V9
MAST es una marca registrada