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Co
ng Detección, Identificación e
re
Interpretación
de Imágenes por IFI
so
deNaPatrones de Anticuerpos
cioOnconeuronales
na
ld
el
La
bo
ra
tor
io
Cl
íni
Ángela Carrasco Sayalero
co
F.E.A. en Inmunología
20
Sección de Autoinmunidad ( Servicio de Inmunología)
X Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 1
6
ZARAGOZA 2016
Co
ng
re
SÍNDROMES
s NEUROLÓGICOS PARANEOPLASICOS
oN
ac
ion
“Los
síndromes
neurológicos
a
ld
el
paraneoplasicos
son complicaciones
La
importantes delbcáncer
generalmente
or
ato
mediadadas por un rmecanismo
io
Cl
inmunopatogenitico “
íni
co
20
16
Co
ng
CONCEPTOS GENERALES
re
Asociados
a una neoplasia,
so remoto.
por efecto
Na
c
ion remoto a la
de tejido neurológico
al
localización de una neoplasia
de
lL
En ausencia de
ab
or
• Invasión directa
ato
• Metástasis
rio
Signos y síntomas que resultan del daño
• Complicación vascular/metabólica/
infecciosa/isquémica
• Terapia antineoplásica
Cl
ín
ico
20
16
Senties-Madrid H et al. Paraneoplastic Syndromes Associated with Anti-Hu Antibodies. IMAJ. 2001
Co
ng
PATOGENIA
re
so
Desarrollo de tejido
Na neuronal maduro o
cio
inmaduro en el tumor.
n
al
Se considera un “efecto secundario”
del
de
sistema inmunológico que pretende
l L reducir
ab
el crecimiento del tumor.
or
Debido a una disfunción de las células T a
Expresión ectópica de proteínas neuronales.
reguladoras.
tor
Células T oligoclonales citotóxicas cruzan la
barrera hemato-encefálica y atacan a las
neuronas que expresa el Ag que comparte
con el tumor
io
Cl
ín
ico
20
16
Co
ng
FISIOPATOLOGÍA
re
so
Na
cio
n
 ¿Origen autoinmune?
Inmunidad
celular
al
de
lL
Inmunidad
humoral
Ac contra
Ag intracelulares
Ac contra
Ag superficie
ab
or
ato
rio
Tumor
Cl
ín
Tumor / Idiopático
ico
Paraneoplásico o
autoinmune
Viaccoz A, Honnorat J. Paraneoplastic Neurological Syndromes: General Treatment Overview. Curr Opin Neurol. 2013.
Senties-Madrid H et al. Paraneoplastic Syndromes Associated with Anti-Hu Antibodies. IMAJ. 2001.
Wilson JF. The irony of paraneoplastic disorders. The Scientist. 2002.
20
16
Co
ng
CARACTERÍSTICAS
CLÍNICO-INMUNOLÓGICAS SNP
re
so
Na
• “Mediados por
de inmunidad humoral “
cimecanismos
onsuperficie: Síndrome de unión neuromuscular,
Ac frente antígenos de
al
Encefalitis Límbica. Los tumores
subyacentes suelen ser teratomas y
d
el
cáncer de timo Pronóstico favorable
y una buena respuesta
La
(antitumoral , inmunoterapia: corticoides
+Ig iv/ Plasmaferesis,
b
or
Ciclofoxfamida y Rituximab)
ato
r
io
• “Mediados por mecansimos de inmunidad
celular”
C
Ac frente antígenos intracelulares: Los SNP clásicos lasociados
íni
anticuerpos de tipo Hu, Ri. Anfifisina … que afectan acSNC.
o 2 Tumores
asociados cancer de pulmon, seminoma, cancer de mama.
01
Pronostico malo y respuesta pobre ((inmunoterapia, corticoides)
6
Co
ng
METODOLOGIA DE TRABAJO
re
so:
 DESCARTAR
Na
• Enfermedad autoinmune
cio sistémica con afectación neurológica;
• Neuropatía infecciosa
post-vacunales o toxica
n
• IFI Triple tejido /+ Hep-2 a
1/80
ld
e
lL
 DOBLE SCREENING: IFI e Inmunoblot
ab
or
• IFI : sustrato de cerebelo de primate (1/10,1/40,1/100)
ato
• Tipo de muestra : Suero o LCR
rio
 Inmunoblot : antígenos purificados o recombinantes
Cl
íni
co
IFI +/ Blot + : Patrón identificable / especificidad encontrada
IFI + / Blot - : Patrón identificable / Blot negativo
20
NO significa SP
16
Co
ESTUDIO DE ANTICUERPOS ANTI-NEURONALES
ng
re
so
Na
cio
Screening
n
Confirmación
• Inmunofluorescencia indirecta (IFI)
al• Inmunohistoquímica (IHQ)
de
lL
ab
or
ato
rio
• Inmunoblot (Ac intracelulares
Cl )
ínisuperficie)
• Células transfectadas (Ac
co
20
16
Carrasco A, Alarcón I, González C, Graus F. Identificación y utilidad clínica de los anticuerpos antineuronales. Inmunología. 2014.
Dalmau J, Graus F, Saiz A. Protocolo de detección de anticuerpos anti-neuronales y proteína 14-3-3. http://www.sen.es/profesional/p-diagnosticas/inmunologia2.
Co
INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA (IFI)
ng
re
sode rata (síndromes centrales) y
Cerebelo
nervio de primate
Na (síndromes periféricos).
Hipocampo de rata
superficie).
ci(Ac
on
Muestra
al
Suero
Ac intracelulares
d
el
Suero y LCR
Ac superficie
La
S (28.9-100%) y E (95%)
bo
r
Sustrato:
•
•
•
•
ato
rio
Cl
ín
ico
Carrasco A, Alarcón I, González C, Graus F. Identificación y utilidad clínica de los anticuerpos antineuronales. Inmunología. 2014.
Carrasco A, Graus F. Atlas de anticuerpos anti-neuronales. 2012.
https://www.euroimmun.de/fileadmin/template/images/pdf/qr/info_autoimmune_encephalitis_en.pdf
Tampoia et al. Diagnostic accuracy of different immunological methods for the detection of antineuronal antibodies. Immunol Invest 2010
20
16
Co
ng
INMUNOHISTOQUÍMICA
r
e
Sustrato: s
o
Cerebelo deN
rata (síndromes centrales) y
ac(síndromes periféricos).
nervio de primate
onsuperficie).
Hipocampo de rata i(Ac
al
Muestra
de
Suero
Ac intracelulares
l
Suero y LCR
Ac superficieL
ab
or
•
•
•
•
ato
rio
Cl
ín
ico
Carrasco A, Alarcón I, González C, Graus F. Identificación y utilidad clínica de los anticuerpos antineuronales. Inmunología. 2014.
Carrasco A, Graus F. Atlas de anticuerpos anti-neuronales. 2012.
20
16
Co
ng
INMUNOBLOT
re
so antígenos purificados o recombinantes.
Sustrato: Blog con
Na
Muestra: Suero (o LCR). c
ion
Dilución: 1/10, 1/40, 1/100.
al
d
el
S (83-100%), E (96-100%).
La
bo
ra
tor
io
Cl
ín
Indicación: Ac intracelulares.
ico
Carrasco A, Alarcón I, González C, Graus F. Identificación y utilidad clínica de los anticuerpos antineuronales. Inmunología. 2014.
Carrasco A, Graus F. Atlas de anticuerpos anti-neuronales. 2012.
Tampoia et al. Diagnostic accuracy of different immunological methods for the detection of antineuronal antibodies. Immunol Invest 2010
20
16
Co
ng
CÉLULAS TRANSFECTADAS
re
so
Na
cio
Muestra: suero y LCR.
n
Sustrato:
• Células HEK293 (human embrionic cells of kidney).
• Transfección con un vector de expresión eucariótica (plásmido) con ADN que
codifique el Ag específico (NMDAR, AMPAR, etc.).
• Cultivo para crecimiento.
al
d
Sensibilidad: suero (85%), LCR (82-100%).e
Inmunofluorescencia indirecta.
Especificidad: ~100%.
lL
ab
or
ato
rio
Cl
ín
ico
Carrasco A, Alarcón I, González C, Graus F. Identificación y utilidad clínica de los anticuerpos antineuronales. Inmunología. 2014.
Carrasco A, Graus F. Atlas de anticuerpos anti-neuronales. 2012.
https://www.euroimmun.de/fileadmin/template/images/pdf/qr/info_autoimmune_encephalitis_en.pdf
Tampoia et al. Diagnostic accuracy of different immunological methods for the detection of antineuronal antibodies. Immunol Invest 2010
20
16
Co
ng
CLASIFICACIÓN DE LOS ANTICUERPOS
re
so
Na
cio
n
Grupos
Grupo Ia
Grupo I
(Ag intracelulares)
Anticuerpos
-Hu (ANNA-1)
-PCA-2
-Ri (ANNA-2)
-Anfifisina*
-ANNA-3
-Recoverina
-Yo (PCA-1)
-CV2 / CRMP-5
-Ma1 (PNMA1)
-Ma2 (Ta, PNMA2)
al
de
lL
ab
or
Grupo Ib
-Familia ZIC
-Familia SOX
Grupo Ic
-GAD*
-AK5
Grupo IIa
-NMDA
-LGI1
-Caspr2
-AMPA
-GABA-B
-GABA-A
-GlyR
-DPPX
-Homer-3
Grupo IIb
-mGLuR1
-mGLuR5
-VGCC
-DNER (Tr)
Grupo II
(Ag superficie)
Características
• Paraneoplásicos (asociación bien
caracterizada)
• Posible presencia con tumor sin clínica
(0-16%)
• ¿Rol patogénico?
• Marcadores
• Mala respuesta a inmunoterapia (10-30%
leve)
• Paraneoplásicos (CPCP)
• NO rol patogénico (marcadores)
ato
rio
• No paraneoplásicos (raro tumor)
• Autoinmune
Cl
ín
• Tendencia en más jóvenes
• No implican paraneoplasia (tumor <70%)
• Rol patogénico
• Buena respuesta inmunoterapia (75-80%)
ico
20
• Paraneoplásicos
• Rol patogénico
• Buena respuesta inmunoterapia (75-80%)
16
Graus, Dalmau, Saiz. Antibodies and neuronal autoinmune disorders of the CNS. J Neurol. 2010.
*Ag sinápticos intracelulares (mejor respuesta a inmunoterapia)
Lancaster E. Paraneoplastic disorders. Continuum. 2015.
Co
ng
SÍNDROMES PARANEOPLÁSICOS
ANTICUERPO
ESPECIFICO
CARACTERIZACIÓN
re
so
Na
cio
n
ASOCIACIÓN CLÍNCA
1. Anti-Hu (ANNA-1)
Antígeno:
Proteína Hu ligada al
RNA
Fluorescencia en núcleos neuronales en
sistema nervioso central y periférico
Detección por IFI e Inmunoblot
2. Anti-Yo
Antígeno: CDR62/CDR34
Fluorescencia en Citoplasma células de
Purkinje. Patrón granular
Detección por IFI e Inmunoblot
3. Anti-CV2 (CRMP5)
Antígeno: CRMP- 5
Fluorescencia en Citoplasma oligodendrocitos
capa granular y sustancia blanca del
cerebelo
Detección por IFI e Inmunoblot


al
de
lL
Neuropatías sensitivas, encefalitis límbica,
degeneración cerebelosa, encefalomielitis
subaguda
Tumor asociado: carcinoma de célula pequeña
de pulmón


Degeneración cerebelosa
Tumor asociado: ovárico; mama

Encefalomielitis, neuropatía motora y sensitiva,
ataxia cerebelosa
Tumor asociado: carcinoma de célula pequeña
de pulmón, timoma

ab
or
4. Anti-Anfifisina
Endocitosis de las
vesículas
sinápticas
Fluorescencia en la zona granular un botón
sináptico y la zona molecular positiva
Detección por IFI e Inmunoblot


5. Anti-Tr (PCA-Tr)
Antígeno: DIVER
altamente
específico en C.
Purkinje
Fluorescencia punteado en la zona molecular y
citoplasma de las células de Purkinje
Detección por IFI


Degeneración cerebelosa
Tumor asociado linfoma de Hodgkin.
6. Anti-Ri (ANNA-2)
Antígeno: NOVA
Proteína ligada al
RNA
Idéntico a Hu en SNC, Negativo núcleos
neuronales plexo mientérico intestino
Detección por IFI e Inmunoblot


Encefalitis de tronco y opsoclono
Tumor asociado :carcinoma de pulmón célula
pequeña, cáncer mama
7. Anti -Ma2
(PMNA2)
Antígeno:
Fosfoproteína
citoplasmática
implicada en la
síntesis de RNA
Fluorescencia núcleo dentado, puntos en el
nucleolo o citoplasma
Detección por IFI e Inmunoblot

Encefalitis límbica. encefalitis meso-di
encefálica
Tumor asociado: testículo
A Carrasco F Graus; Atlas de Ac Anti-neuronales 2012
Síndrome de Stiff-person
Tumor Asociado: carcinoma de pulmón célula
pequeña; cáncer de mama
ato
rio

Cl
ín
ico
20
16
Co
ng
ENCEFALITIS AUTOINMUNE
re
so
Na
cio
n
ANTICUERPO
ESPECÍFICO
CARACTERIZACIÓN
ASOCIACIÓN CLÍNCA


Encefalitis
Tumor asociado: teratoma ovárico (58%)


Encefalitis límbica
Tumor asociado: ninguno
1. Anti-receptor de
NMDA
Receptor NMDA de
Glutamato
Fluorescencia en zona molecular de
hipocampo y estrato granuloso del
cerebelo
IFI y Células transfectadas
2. Anti–LGI1
Proteína asociada a
VGKC
Fluorescencia en zona molecular
hipocampo y cerebelo
IFI y Células transfectadas
3. Anti-receptor de
GABAB
Receptor de GABAB
Fluorescencia en zona molecular
hipocampo y cerebelo
Células transfectadas
4. Anti–CASPR2
Proteína asociada a
VGKC
Fluorescencia en zona molecular
hipocampo y cerebelo
IFI y Células transfectadas

5. Anti-receptor de
AMPA
Receptor AMPA de
Glutamato
Fluorescencia en zona molecular
hipocampo y cerebelo
IFI y Células transfectadas


Encefalitis límbica
Tumor asociado: SCLC, mama, timoma
(60%)
6. Anti-receptor
mGluR5
Fluorescencia en zona molecular
hipocampo


Encefalitis límbica
Hodgkin
al
de
lL
ab
or
A. Carrasco; F. Grau; Atlas de Ac Anti-Neuronales 2012


Encefalitis límbica
Tumor asociado: SCLC (70%)
ato
rio

Síndrome de Morvan, neuromiotonia,
encefalitis límbica
Tumor asociado: Timoma (73%)
Cl
ín
ico
20
16
Co
ng
re
so
Na
cio
n
OTROS SÍNDROMES
ANTICUERPO ESPECÍFICO
NMO-IgG
Antígeno: AQP4
CARACTERIZACIÓN
al
ASOCIACIÓN CLÍNCA
Fluorescencia en córtex y cerebelo: zona
Pia y subPia
ELISA; IFI sobre células transfectadas
de

Neuromielitis Optica (Síndrome de
Devic’s)


LEMS paraneoplásico, en menor medida
mismos síndromes asociados a anti-Hu
Tumor asociado: SCLC


SPS, ataxia cerebelo, encefalitis límbica
Cáncer No
lL
ab
or
SOX1 (AGNA)
Antígeno: Proteína
SOX1
Relacionado con células
madre neuronales
Fluorescencia en núcleos de las células de
la glia de Bergmann alrededor de las
células de Purkinje
SOX1: Mediante Inmunoblot
Anti-GAD
Proteína Sináptica
* Solo detecta títulos
elevados de GAD
(>2000 por RIA)
Fluorescencia; Patrón granular en capa
molecular *
RIA, ELISA, Inmunoblot
ato
rio
Cl
ín
ico
20
16
A Carrasco; F Graus; Atlas de Ac Anti-Neuronales 2012
Co
ng
ESTRUCTURA DEL CEREBELO
re
so
Na
cio
n
al
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
ín
ico
20
16
Co
ng
ANA: FALSO POSITIVO
re
so Molecular
Estrato
Na
cio
na
Núcleo neuronas E.M.
Estrato Molecular
(E.M.)
Fibras
Estrato Granuloso
Vasos
ld
Células de Purkinje
Estrato Granular
(E.G.)
el
La
bo
r
ato
rio
ANA 1/40. Falso Positivo.
Células Glía de Bergmann
Cl
ín
Núcleo neuronas E.G.
ico
Sustancia Blanca
C. Purkinje
20
16
Co
ng
re
so
Na
cio
n
ANA INESPECÍFICO
al
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
ín
ico
20
16
Co
ng
NEGATIVO
re
so
Na
cio
n
Núcleo neuronas E.M.
Estrato Granuloso
Estrato Molecular
(E.M.)
al
Fibras
Estrato Granular
(E.G.)
Vasos
de
NEGATIVO
Sustancia Blanca
Estrato Molecular
Células de Purkinje
lL
ab
or
ato
rio
Células Glía de Bergmann
CC.l Purkinje
íni
co
2
Núcleo neuronas E.G.
01
6
Co
ANTI HU/RI
ng
re
soMolecular
Estrato
Na
cio
Núcleo neuronas E.M.
Estrato Molecular
(E.M.)
Fibras
Estrato Granular
(E.G.)
Vasos
C.
Purkinje
na
ld
Células de Purkinje
el
La
bo
r
ato
rio
Células Glía de Bergmann
Cl
ín
neuronas E.G.
Estrato Núcleo
Granuloso
Sustancia Blanca
Sustancia Blanca
ico
20
Anti Hu/Ri. Núcleos Neuronales
del SNC y Periférico
16
Co
ng
re
so
Na
cio
n
ANTI HU (ANNA-1)
AG: PROTEÍNA HU LIGADA AL RNA
al
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
ín
ico
20
16
Co
ng
ANTI-YO
re
so
Na
cio
Estrato Molecularn
Núcleo neuronas E.M.
Estrato Molecular
(E.M.)
Fibras
Estrato Granular
(E.G.)
Estrato Granuloso
Vasos
al
Células de Purkinje
de
lL
ab
or
ato
r
io
C. Purkinje
Sustancia Blanca
Anti-Yo, citoplasma de las C.P. “patrón
granular”
Células Glía de Bergmann
Cl
ín
Núcleo neuronas E.G.
iSustancia
co
Blanca2
01
6
Co
ng
re
so
Na
cio
n
ANTI YO (PCA-1)
AG: CDR62/CDR34
al
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
ín
ico
20
16
Co
ng
re
so Molecular
Estrato
Na
cio
na
ANT-YO
Núcleo neuronas E.M.
Estrato Molecular
(E.M.)
Fibras
Estrato Granular
(E.G.)
Estrato Granuloso
Sustancia Blanca
Sustancia Blanca
Vasos
ld
Células de Purkinje
C. Purkinje
el
La
bo
r
ato
rio
Células Glía de Bergmann
Cl
ín
Núcleo neuronas E.G.
ico
20
Anti-Yo. Puede haber un segundo
anticuerpo hay IFI en E.G. y S.B.
16
Co
ng
•
ANTI CV2
re
so
Na
cio
n
AG: CRMP-5
al
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
ín
EG
ico
20
Fluorescencia en citoplasma de
oligodendrocitos, capa granular y
sustancia blanca del cerebelo
16
Co
ng
FALSO CV2
re
so
Na
cio
n
Núcleo neuronas E.M.
Estrato Granuloso
Estrato Molecular
(E.M.)
Fibras
Vasos
al
Falso CV2, Astrocitos
Estrato Granular
(E.G.)
Sustancia Blanca
Estrato Molecular
C. Purkinje
de
Células de Purkinje
lL
ab
or
ato
rio
Células Glía de Bergmann
Cl
ín
Núcleo neuronas E.G.
ico
20
16
Co
ng
ANFIFISINA
re
so Molecular
Estrato
Na
cio
na
Estrato Molecular
(E.M.)
Núcleo neuronas E.M.
C. Purkinje
Sustancia
Vasos
Blanca
Fibras
Células de Purkinje
ld
Estrato Granular
(E.G.)
el
La
Patrón Sináptico E.M.+,
E.G. Botón Sináptico: Anfifisina
Sustancia Blanca
bo
r
ato
rio
Células Glía de Bergmann
Cl
ín
Núcleo neuronas E.G.
ico
Estrato Granuloso
20
16
Co
ng
ANFIFISINA
re
so
Na
cio
n
ENDOCITOSIS DE LAS VESIUCLAS SINAPTICAS
al
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
ín
ico
20
16
Co
MITOCONDRIA+
FALSO PATRÓN DE ANFIFISINA
ng
re
so +,
Mitocondria
Nade Anfifisina
falso positivo
(botón sináptico
cioE.G.)
na
ld
Núcleo neuronas E.M.
Sustancia
Blanca
Vasos
Estrato Molecular
(E.M.)
Fibras
Células de Purkinje
el
Estrato Granular
(E.G.)
C. Purkinje
Sustancia Blanca
Estrato Molecular
La
bo
r
ato
rio
Células Glía de Bergmann
Cl
íni
Estrato Granuloso
co
2
Núcleo neuronas E.G.
01
6
Co
ng
re
so
Na
cio
n
ANTI-TR
Núcleo neuronas E.M.
Estrato Granuloso
Estrato Molecular
(E.M.)
Fibras
Estrato Granular
(E.G.)
Vasos
al
Células de Purkinje
de
C. Purkinje
lL
ab
or
Sustancia Blanca
Anti-PCA2-Tr, dendritas en E.M.,
punteado en C.P. y E.M.
ato
rio
Células Glía de Bergmann
Cl
ín
Núcleo neuronas E.G.
ico
20
Estrato Molecular
16
Co
ng
ANTI –TR
re
so
Na
cio
n
AG: DIVER, ESPECIFICO DE LAS C. PURKINJE
al
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
ín
ico
20
16
Co
ng
ANTI-HU/RI (ANNA-2)
AG: NOVA PROTEINA LIGADA AL RNA
re
so
Na
cio
n
Núcleo neuronas E.M.
Estrato Molecular
(E.M.)
Fibras
Vasos
al
Estrato Granular
Sustancia
(E.G.)
Blanca
Células de Purkinje
de
lL
ab
or
ato
C. Purkinje
rio
Cl
ín
Células Glía de Bergmann
Núcleo neuronas E.G.
Sustancia Blanca
ico
20
Anti Hu/Ri, discretamente positivo C.P.
Estrato Granuloso
Estrato Molecular
16
Co
ANTI-MA2 (PMNA2)
ngAG: FOSFOPROTEINA CITOPLASMATICA IMPLICADA EN LA SINTEISS DE RNA
re
soGranuloso
Estrato
Na
C. Purkinje
cio
na
ld
el
La
bo
ra
tor
io
Cl
í i C. P.
Núcleos y fibras alrededor denlas
co
Ma2, núcleo dentado, puntos en el
20
nucleolo o citoplasma
16
Estrato Molecular
Núcleo neuronas E.M.
Estrato Molecular
(E.M.)
Fibras
Vasos
Células de Purkinje
Estrato Granular
(E.G.)
Células Glía de Bergmann
Núcleo neuronas E.G.
Sustancia Blanca
Co
ng
ANTI-GAD
re
so Estrato Granuloso
Na
cio
na
l
de
C. Purkinje
lL
Núcleo neuronas E.M.
Estrato Molecular
(E.M.)
Vasos
Fibras
Estrato Granular
(E.G.)
Células de Purkinje
ab
or
ato
rio
Patrón granular E.M.
sináptico”
Sustancia ”punteado
Blanca
anti-GAD
Células Glía de Bergmann
Cl
ín
Núcleo neuronas E.G.
ico
Sustancia
Blanca
20
Estrato Molecular
16
Co
ng
re
so
Na
cio
n
IMUNOHISTOQUIMICA
ANTI-GAD
PROTEINA SINAPTICA
al
de
lL
IFI : Patrón granular en
capa molecular
ab
or
ato
rio
Cl
ín
ico
20
16
Co
ng
ANTI-SOX
re
so
Na
C. Purkinje
cio
na
Núcleo neuronas E.M.
Estrato Molecular
(E.M.)
Estrato
Granuloso
Vasos
Fibras
Células de Purkinje
ld
Estrato Granular
(E.G.)
el
La
bo
r
ato
rio
Sustancia Blanca
Estrato Molecular
Células Glía de Bergmann
Cl
ín
Núcleo neuronas E.G.
ico
20
16
anti-SOX. Núcleos de las celulas de la Glia
de Bergmann alrededor de las C.P.
C
ANTICUERPOS
CONTRA ANTÍGENOS DE SUPERFICIE
on
gr
es
oN
2004: Aquaporin-4
ac
•
ion
2008: NMDA-receptors
al
•
d
2009: AMPA-receptors el
L
ab
•
2010: GABAB-receptors
or
ato
•
2010:
LGI1; CASPR2
rio
C
lín
2012:
DNER (Tr)
•
ico
20
•
16
Co
ng
re
so
Na
cio
n
HIPOCAMPO
al
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
ín
ico
20
16
Co
ng
re
so
Na
cio
n
CORTE DE HIPOCAMPO
al
Hipocampo Positivo
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
ín
ico
20
16
Co
ng
Anti-NMDA
: receptor NMDA de Glutamato
r
es
oN
acmolecular
Hipocampo: Zona
ion
al
de
lL
Cerebelo: Estrato Granuloso
ab
or
ato
rio
Cl
ín
ico
Encefalitis Límbica
20
16
Co
ng
ANTI-NMDA
re
so
Sustancia Blanca
Na
cio
na
C. Purkinje
Estrato Granuloso
ld
el
La
bo
ra
tor
io
Estrato Molecular
Cl
íni
c
Núcleo neuronas E.M.
Estrato Molecular
(E.M.)
Fibras
Vasos
Células de Purkinje
Estrato Granular
(E.G.)
Células Glía de Bergmann
Núcleo neuronas E.G.
Sustancia Blanca
o2
01
anti-NMDAR, botones sinápticos en E.G.
6
Co
ANTI-NMDA
ng
r
es
CEREBELO+
oN
a
cio
n
+
al
de
lL
HIPOCAMPO
ab
or
-
ato
rio
Cl
ín
ico
CT +
NO CT
20
16
CT-
Co
ng
Anti-AMPA:
Receptor AMPA del Glutamato
re
so
Na
HIPOCAMPO Zona Molecular
cio
,
Fibras nerviosas
n
al
CEREBELO Baton Sinaptico EG
Difuso y granulado EM
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
ín
ico
20
16
Encefalitis Límbica Clásica //
Síntomas Psiquiátricos asociados
Co
ng
Anti-GABA: Receptor de GABA
re
so
Na
cio
n
al
de
lL
ab
or
ato
rio
Hipocampo
Cl
ín
ico
Cerebelo
20
Encefalitis Límbica Clásica ( coexistencia con GAD65 )
Estatus epilépticos refractarios
16
Co
ng
Anti-LGI1
(VGKC) : Proteína Presináptica
re
so
Na
cio
n
al
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
ín
ico
Hipocampo
Epilepsia Autoxomica
Cerebelo
20
16
Co
n
gr (VGKC) : Proteina Axonal Transmembrana
Anti-CASPR2
es
oN
ac
ion
al
de
lL
ab
or
ato
rio
Hipocampo
Síndrome de Morvan ( neuromiotomia +/- encefalitis ) //
Cl
ín
ico
Cerebelo
20
16
Epilepsias Resistentes
Co
ng
re
INMUNOHISTOQUIMICA VGKC
so
Na
cio
na
ld
el
La
bo
ra
tor
io
Cl
íni
co
20
16
Anti-DPPX
(VGKC): Proteína Transmemebrana (tipo II)
C
on amino peptidase like proteine)
(Dipeptidyl
g
rereguladora Kv4.2 de VGKC
Subunidad
so
Na
cio
n
al
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
ín
ico
Hipocampo
Estrato lúcido del Hipocampo.
Cerebelo
20
16
Fluorescencia granular del Estrato Molecular
Encefalomielitis + Síntomas Intestinales
Co
PATRONES
ESPECIFICOS DIFICILES DE DIFERENCIAR
ng
re
so
Na
cio
n
Hipocampo
al
Anti-NMDAR
de
lL
ab
or
Anti-AMPAR
ato
rio
Anti-GABABR
Cl
ín
ico
20
16
Anti-LGI1 (VGKC)
Anti-CASPR2 (VGKC)
Anti-DPPX (VGKC)
Co
PATRONES
ESPECIFICOS DIFICILES DE DIFERENCIAR
ng
re
so
Na
cio
n
Cerebelo
al
Anti-NMDAR
de
lL
ab
or
Anti-AMPAR
ato
rio
Anti-GABABR
Cl
ín
ico
20
16
Anti-LGI1 (VGKC)
Anti-CASPR2 (VGKC)
Anti-DPPX (VGKC)
Co
ng
OTROS SÍNDROMES
re
so
Na
cio
n
al
de Óptica
Neuromielitis
l
La Dévic)
(Sindrome de
bo
r
Anti-NMO IgGato
Antigeno AQP4
rio
Cl
ín
ico
20
16
Co
ng
Cerebro
NEUROMIELITIS ÓPTICA (NMO-IGG)
re
so
Na
cio
na
ld
el
La
bo
ra
tor
io
Cl
íniNervio óptico
co
20
16
Anti-AQP 4
Co
ng
NEUROMIELITIS ÓPTICA (NMO-IGG)
re
so
Na
cio
na
ld
el
La
bo
ra
tor
io
Cl
íni
cHEK293
o 2 Control
HEK293 Transfectadas con AQP-4
01
6
Anti-AQP 4
CRELEVANCIA
DE LOS AUTOANTICUERPOS
on
gr
es
oN
ac
El 31% de los
ion
resultados
al
positivos lo son
de
para algo
lL
diferente de lo
ab
solicitado!
or
ato
rio
Cl
íni
co
20
16
NMDAR + Hu 1,9%
NMDAR + GABAB 0,9%
Hu + CV2 2,8%
Anti-Hu 5.6%
NMDAR + CASPR2 0,9%
Anti-Yo 8,2%
Anti-CASPR2
11,1%
Anti-Ri 9,3%
Anti-Ma 1,9%
Anti-PCA20,9
%
Anti-LGI1 11,1%
Anti-CV2
3,7%
Anti-Amphiphysin 0,9%
Anti-GABAB 2,8%
Anti-AMPAR 0,0%
Anti-NMDAR 38%
Co
ng
GRACIAS
re
so
Na
cio
n
al
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
ín
ico
20
16
• angela.carrrasco@salud.madrid.org
CoTaller de Imágenes. Foto 1.
ng
re
soGranuloso
Estrato
Na
C. Purkinje
cio
na
ld
el
La
bo
ra
tor
io
Cl
í i C.
Núcleos y fibras alrededor denlas
co
P.
Ma2, núcleo dentado, puntos en el 20
16
Estrato Molecular
nucleolo o citoplasma
Núcleo neuronas E.M.
Estrato Molecular
(E.M.)
Fibras
Vasos
Células de Purkinje
Estrato Granular
(E.G.)
Células Glía de Bergmann
Núcleo neuronas E.G.
Sustancia Blanca
CoTaller de Imágenes. Foto 2.
ng
re
so Molecular
Estrato
Na
cio
na
C. Purkinje
ld
el
La
bo
Estrato Granuloso
ra
tor
io
C
lín
Sustancia Blanca
ico
20
Anti-Yo. Puede haber un segundo
anticuerpo hay IFI en E.G. y S.B. 1
6
Núcleo neuronas E.M.
Estrato Molecular
(E.M.)
Fibras
Vasos
Células de Purkinje
Estrato Granular
(E.G.)
Células Glía de Bergmann
Núcleo neuronas E.G.
Sustancia Blanca
CoTaller de Imágenes. Foto 3.
ng
re
soMolecular
Estrato
Na
C. Purkinje
cio
na
ld
el
La
bo
ra
tor
io
Estrato
Cl Granuloso
íni
co
2
Anti Hu/Ri. Núcleos Neuronales 0
16
Sustancia Blanca
del SNC y Periférico
Núcleo neuronas E.M.
Estrato Molecular
(E.M.)
Fibras
Vasos
Células de Purkinje
Estrato Granular
(E.G.)
Células Glía de Bergmann
Núcleo neuronas E.G.
Sustancia Blanca
CoTaller de Imágenes. Foto 4.
ng
re
so
Sustancia Blanca
Na
cio
na
C. Purkinje
Estrato Granuloso
ld
el
La
bo
ra
tor
io
Estrato Molecular
Cl
íni
co
20
16
Núcleo neuronas E.M.
Estrato Molecular
(E.M.)
Fibras
Vasos
Células de Purkinje
Estrato Granular
(E.G.)
Células Glía de Bergmann
Núcleo neuronas E.G.
Sustancia Blanca
CoTaller de Imágenes. Foto 5.
ng
re
so
Estrato Granuloso
Na
cio
na
ld
C. Purkinje
el
La
bo
ra
tor
io
Cl
íni
co
20
Estrato Molecular 1
6
Núcleo neuronas E.M.
Estrato Molecular
(E.M.)
Fibras
Vasos
Células de Purkinje
Estrato Granular
(E.G.)
Células Glía de Bergmann
Núcleo neuronas E.G.
Sustancia Blanca