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Bacteriología Laboratorio 2 Instructora: Keila Y. Flores Objetivos Comprender la diferencia entre procariotas y eucariotas Observar los cambios entre el sistema de clasificación anterior y el utilizado actualmente Aprender técnicas basicas de microbiología y control de bacterias Procariotas Carecen de núcleo y organelos limitados por membranas Son organismos simples Se encuentran en mayor cantidad Eucariotas Poseen un núcleo organizado Organelos con membranas Son organismos grandes Sistema de Cinco Reinos Robert Whittaker (1969) Procariotas Reino Monera Eucariotas Protista Fungi Plantae Animalia Sistema de tres dominios Características utilizadas rRNA Biología molecular Secuencias conservadas Cambios por mutaciones Separación de procariotas en dos dominios Sistema de tres dominios Procariota Bacterias Archaea Eucariota Eukarya Bacterias Procariotas Unicelulares Carecen de organelos rodeados por membranas Pared celular de peptidoglicano DNA en forma de anillos – plasmidos No tienen cromosomas Reproducción por fisión binaria Duplicación de componentes para dar origen a dos células Presencia de estructuras especializadas Cápsula Flagelo Pili Autótrofas (prod. su propio alimento) Heterótrofas Fotosintéticas o quimiosinteticas Absorben nutrientes del ambiente Hábitat Suelo, aire, cuerpos de agua Condiciones normales o extremas Beneficios de bacterias Descomposición y biorremediación Síntesis de vitaminas y antibióticos Industria de alimentos Equilibrio ecológico yogurt Fijación de nitrógeno Flora natural del cuerpo Desventajas Causantes de enfermedades Oportunistas Morfología Cocos Bacilos Espirilos Espiroquetas Microscopio Ejercicio 1 Frotis de la boca Obtener células bacterianas presentes en la boca Procedimiento: Preparar laminilla con UNA gota de agua Frotar el interior de la boca con un palillo de madera Esparcir por la laminilla Sujetar la laminilla y secar en mechero Procedimiento cont. Teñir con 3-4 gotas de cristal violeta Esperar 1 minuto Lavar con agua Secar suavemente Observar bajo el microscopio (utilizar aceite de inmersión si es necesario) Dibuja las células Ejercicio 2 Bacterias Ambientales Tomar placa con agar (1 por mesa) a. b. c. Exposición al ambiente Muestreo de superficies Muestreo de agua Hacer estriado en placa Sellar la placa con parafina Rotular Incubar 48 hrs. Anotar observaciones y dibujar Control de Crecimiento Bacteriano Importancia: Bacterias crecen en una variedad de ambientes Crecimiento descontrolado o en exceso puede causar danos ambientales o enfermedades Agentes de control bacteriano Antibióticos Antisépticos Desinfectantes Antibióticos Antiséptico Químico producido por una bacteria u hongo que puede controlar el crecimiento de otra bacteria u hongo Controlan crecimiento bacteriano en tejidos vivos Desinfectantes Controlan el crecimiento bacteriano en objetos inanimados ** los antisépticos y desinfectantes no matan todas la bacterias como ocurre en esterilización ** reducen el número de bacterias en la superficie Ejercicio 3 Dividir el plato petri en cuatro cuadrantes Identificar Sumergir el isopo estéril en el caldo de bacterias Estriar en plato En cada cuadrante rotulado colocar: 1. 2. 3. 4. Disco estéril (grupo control) Disco con antibiótico Disco con producto desinfectante Desinfectante Sellar con parafina Incubar 48 hrs. / Observar resultados Datos Importantes Observar inhibición de crecimiento Medir halo de inhibición en mm Halo de inhibición – área alrededor del disco donde el crecimiento bacteriano ha sido inhibido Anotar resultados y traerlos al próximo laboratorio INDIVIDUAL