Download Diapositiva 1

Vectores no virales
Ventajas
• Componentes simples
• Varias opciones comerciales
• Funcionan bien in vitro, in vivo están mejorando
• Pocos problemas de bioseguridad
Desventajas
• Menos eficientes que los virus tanto in vivo como in vitro
• DNA es un plásmido que causa inestabilidad en células en
división
o Alternativa simple y más segura
o Fácil de producir
o Baja inmunogenicidad
o Baja toxicidad
o Capacidad de clonado ilimitada
o Aplicaciones repetidas permitido
Bombardeo de partículas
Inyección directa del
ADN
No Virales
Liposomas
catiónicos
Transferencia de
genes mediante
receptores
Bajos niveles de transfección
Bajos niveles de expresión
Inyección
directa del ADN
Técnica más simple
Tipo de ADN: plásmido, producto de PCR u oligonucleótido
Inyección intramuscular  Vacunas de ADN
Buena transferencia pero mala eficiencia de transfección
Corta expresión
Opción: electroporación (pulso eléctrico); electrodos in situ
Transfección a músculos, cerebro, piel, hígado y tumores
Inyección
directa del ADN
Comienza la
respuesta inmune
Bombardeo de
partículas
Material a transferir está unido a partículas de oro
Disparadas bajo gran presión a la célula
Aplicación a células tumorales
Liposomas catiónicos
Uso en células cancerígenas y
epiteliales del tracto
respiratorio  pueden ser
usadas para fibrosis quística u
otras enfermedades
respiratorias.
Se puede adicionar ligando
para volverlas específicas a un
tejido.
Poliplex
Polímeros catiónicos asociados
al ADN
Inhalación por aerosoles con
polímeros que se degradan en
citosol (disrupción del endosoma)
Específico al tracto respiratorio
(tumores de pulmón)
No se expresa en otros tejidos
Relativamente eficiente
No puede ser muy grande
Vectores Híbridos
Combinación de vectores virales
con vectores no virales
Combinación de vectores novirales entre sí.
Ruta de administración
Ex vivo
Transferencia de genes a células
viables temporalmente
removidas del paciente y
devueltas (cel. médula ósea)
In vivo
Introducción de genes en el sitio
donde se encuentra (cel. de piel
en brazos o cel. epiteliales de
pulmones después de inhalación)
TRES TIPOS DE CÉLULAS
CONFORMAN EL ORGANISMO HUMANO
• Germinales
Gametas
• Somáticas
Diferenciadas
• Precursoras (Stem Cells):
1. Células Indiferenciadas
2. Potencialidad de proliferación indefinida
3. División Asimétrica
4. Generan progenies de células progenitoras
5. Regeneración tisular
DIVISIÓN ASIMÉTRICA
CLASIFICACIÓN DE LAS STEM CELLS:
Según su origen
• Stem Cells Embrionarias
• Stem Cells Embrionarias Germinales
• Stem Cells Adultas
• Stem Cells Cancerígenas
Algunos conceptos
• Determinación: Es la “elección” bioquímicamolecular del destino celular.
• Diferenciación: Serie de cambios morfológicos que
experimenta la célula de acuerdo al destino ya
determinado previamente.
• Maduración: Es la adquisición por parte de la célula
o tejido de su capacidad funcional total.
Totipotencialidad, Pluripotencialidad,
Multipotencialidad y Monopotencialidad
Células diferenciadas
(tejido específico)
• Las células madre pluripotenciales dan origen
a un organismo sólo si se combinan con
células embrionarias normales
• Las células madre pluripotenciales no son
embriones
JUNIO 2007
Generación de iPS (induced pluripotent stem) cells
a partir de fibroblastos murinos
(Takahashi y col., 2006)
Oct3/4
Nanog
Klf4
c-Myc
¿De dónde se obtienen las
stem cells para terapia?
Opción 1
Stem cells adultas
Opción 2
Stem cells embrionarias
La Revolución de las Stem Cells
Problemas básicos a sobrellevar
• Cómo dirigir la diferenciación celular con las cascadas
específicas?
Ej: todo a músculo o todo a nervios; diferentes
“cocktails” de factores dee crecimiento
• Cómo sobfrellevar l el rechazo inmune?
Ej: alterar los genes de histocompatibilidad; clonación
terapéutica para líneas “a medida”
• Cómo realizar un órgano?
Ej: combinar diferentes tipos celulares en
organizaciones tridimensionales
Inmunodeficiencia combinada severa (SCID)
introducción del gen ada adenosin desaminasa