Download Diagnóstico Molecular del Cáncer.

BIOMARCADOR
Característica medible objetivamente que es
evaluada como indicador:
• proceso biológico normal
• proceso patológico
• respuesta farmacológica
• respuesta a una intervención terapéutica
BIOMARCADOR
• Validación analítica
• Validación clínica (pronóstico, predictivo)
• Utilidad clínica (decisión clínica)
BIOMARCADOR Y CÁNCER
Diagnóstico
A quién tratar Qué tratamiento Cuanta dosis
Guías de Consenso elaboradas con el aval científico de la Sociedad Española
de Anatomía Patológica y la Sociedad Española de Oncología Médica.
Propuesta
s de
expertos
Biomarcador recomendado
HER2
Cáncer de Mama
HER2
Cáncer Gástrico
Biomarcadores en Cáncer
de Pulmón
Biomarcadores en Cáncer
de Colon
Biomarcadores en
Melanoma
HER2 (amplificación/expresión)
HER2
(amplificación /expresión
EGFR (mutación)
ALK (traslocación)
KRAS/NRAS (mutación)
MSI (expresión/microsatélites)
BRAF (mutación)
Plataforma de Biomarcadores en Cáncer SEAP-SEOM
4
HER2 EN CÁNCER DE MAMA
HER2 EN CÁNCER GÁSTRICO
HER2 EN CÁNCER GÁSTRICO
Algoritmo para la selección de pacientes para trastuzumab
en cáncer gástrico
Método IHQ
0 / 1+
negativo
2+
equívoco
3+
positivo
FISH / CISH / SISH
negativo
positivo
HER2 EN CÁNCER GÁSTRICO
Diferencias en la interpretación de los tests IHQ/ISH
entre cáncer de mama y cáncer gástrico
• En el cáncer gástrico la inmunoreactividad
lateral o basolateral de membrana (en forma
de U) se equipara a la inmunoreactividad
completa de membrana.
• La heterogeneidad tumoral es mayor en el
cáncer gástrico (4,8%) que en el cáncer de
mama (1,4%), aspecto que afecta a los
criterios de consenso para las biopsias
endoscópicas.
Hofmann et al. Assessment of a HER2 scoring system
for gastric cancer: results from a validation study.
Histopathology 52: 797-805, 2008.
HER2 EN CÁNCER GÁSTRICO
HER2 EN CÁNCER GÁSTRICO
De Roock et al; Lancet Oncol 2010
KRAS exon 2 at codons 12 and 13
KRAS exon 3 at codon 61
KRAS exon 4 at codon 117 or 146
NRAS exon 2 at codons 12 and 13
NRAS exon 3 at codon 61
KRAS exon 4 at codon 117 or 146
Tumors WT for KRAS mutations in exon 2
17% KRAS/NRAS mutations in other codons
Douillard et al; N Engl J Med 2013
Douillard et al; N Engl J Med 2013
El gen ALK
•La translocación mas frecuente de este gen es la t(2;15)
con el gen NPM (nucleophosmin), anomalía característica
de los Linfomas Anaplásicos (92-95%).
•t(2;11)(p23;p15) con el gen CARS y t(2;4)(p23;q21) con el
gen SEC31A, características de los tumores
miofibroblásticos inflamatorios.
•Translocación del gen ALK con el gen EML4
(echinoderm microtubule-associated protein-like
4) t(2;2)(p24;p21) en un 2-5% de pacientes con cáncer
de pulmón no microcítico.
TTF1
ALK
ALK
CRITERIOS DE CALIDAD EN LA DETERMINACIÓN DE
BIOMARCADORES
Tipos de melanomas
-
Melanoma de extensión superficial (60-70%)
Léntigo maligno melanoma (5-10%)
Melanoma lentiginoso acral (5-10%)
Melanoma nodular (15-30%)
Biología Molecular en el Melanoma :
Múltiple Entidades Tumorales
cKIT
BRAF
GNAQ
??
BRAF
cKIT
CyclinD1
KIT
FACTORES PRONOSTICOS
•TIPO DE MELANOMA
• NIVEL DE CLARK
•ESPESOR DE BRESLOW
•ULCERACIÓN
•REGRESIÓN
•FASE DE CRECIMIENTO
•METÁSTASIS
•MITOSIS
• Anti B-RAF Vemurafenib,
Dabrafenib
• Anti CTLA-4  Ipilimumab
• Anti-PD1/PDL1  Lambrolizumab,
Nivolumab, MPDL3280
Mutated BRAF
The role of “V600”
Growth factor
Receptor tyrosine kinase
Cell membrane
RAS
A single codon mutation (V600) in the
gene for the BRAF protein leaves it
“switched on”
BRAF
mutation
MEK
Mutated BRAF is present in
many cancers:
>50% melanomas
~10% colorectal
~8% all solid tumors
ERK
Excessive cell
proliferation and survival
Abnormal
cell growth
Nucleus
 Muestras:
Resultados acumulados:
1504 muestras BRAF enviadas a Biomarker Point
147 centros usuarios activos






576 positivas
875 negativas
14 pendientes
19 inválidos
6 no analizables
23 no evaluables
*datos % de mutados sobre número muestras enviadas sin tener en cuenta dobles pruebas
No analizable: la muestra no ha llegado en buen estado.
No evaluable: la muestra recibida no es adecuada para el análisis.
Confidential – for internal use only
Inválido: la técnica no ha ofrecido un resultado con el análisis,
mutados: 40,3%*
inválidos: 1,2%*
El kit THxIDTM-BRAF AMP (bioMérieux) es un reactivo de
diagnóstico in vitro diseñado para la detección cualitativa de
las mutaciones V600E y V600K del gen BRAF a partir de
ADN extraído de muestras de melanoma humano fijadas en
formol e incluidas en parafina. La metodología utilizada se
basa en la PCR a tiempo real y se lleva a cabo en el sistema
ABI 7500 Fast Dx.
Inicio de la plataforma GSK:1/6/2014
Nº de determinaciones 26
5 casos con mutación V600K
9 casos con mutación V600E
12 casos sin mutación
El análisis estadístico de los datos demuestra que la
sensibilidad de la inmunohistoquímica es del 100% y la
especificidad del 97%.
• IHQ anti-BRAFV600E: expresión homogénea
METÁSTASIS
POSITIVO INTENSO
MELANOMA PRIMÁRIO
IHQ anti-BRAFV600E
IHQ anti-BRAFV600E
IHQ anti-BRAFV600E
IHQ anti-BRAFV600E
IHQ anti-BRAFV600E
NEGATIVO
POSITIVO DÉBIL
IHQ anti-BRAFV600E
ALGORITMO DE DETERMINACIÓN DE MUTACIONES DE BRAF
• No hay heterogeneidad Intra- o Intertumoral de la mutación BRAFV600E
• La inmunohistoquimica es un método
IHQ
50%
Mutado
Nativo
sensible y especifico para la identificación
de BRAFV600E, sin embargo, los casos
Tratamiento
RT-PCR
negativos deberían ser analizados por
métodos moleculares (V600K)
• Los métodos de moleculares pueden
generar falsos negativos, principalmente en
muestras con baja celularidad tumoral.
Mutado
Nativo
Tratamiento
SEC
Implementación de los biomarcadores en la práctica clínica
• Para un centro oncológico imprescindible acceso a un Servicio
de anatomía patológica / laboratorio de biología molecular
• Resultados disponibles en un tiempo adecuado
• Cada Institución debe desarrollar su propia estrategia
multidisciplinaria de como obtener tejido tumoral y como
procesarlo
 El flujo dependerá de la organización y estructura de cada
Institución y de la localización de los recursos
 El comité de tumores, mejor estrategia para conseguir un
abordaje multidisciplinario
 El papel del patólogo, relevante
 Se deben discutir los casos antes de abordajes invasivos,
re-biopsias
 Es un foro para discutir nuevos avances
Implementación de los biomarcadores en la práctica clínica
• En España, se analizan los principales marcadores predictivos
(RAS, BRAF, EGFR, ALK)
– Para los centros sin laboratorio molecular, las muestras se
pueden enviar a laboratorios/plataformas centrales
(soporte de la industria farmacéutica)
• Necesidad de una organización que garantice la realización de
los biomarcadores
– Conocimiento resultados
– Participación en controles de calidad
– Facilitar colaboración / investigación clínica
– Implementación nuevos biomarcadores
Plataforma de Biomarcadores en Cáncer SEAP-SEOM
59
Nov 13 Ene 14
Feb 14
Plataforma de Biomarcadores en Cáncer SEAP-SEOM
May 14
Servicios de consultoría para la
constitución de la Plataforma
Reunión del «Comité Ejecutivo PCB»
Finalización del plazo de presentación
de expresiones de interés para
participar como centros
prestadores de servicios a terceros
Creación del «Comité Ejecutivo PCB»
Creación del grupo de trabajo sobre
aspectos legales.
Creación del grupo de trabajo para la
evaluación de «Centros de referencia
PCB»
Creación del grupo de trabajo sobre
aspectos técnicos
Apertura del plazo de expresiones de
interés para participar como centros
prestadores de servicios a terceros
Solicitud de propuestas plataforma
informática y gestión flujo de
muestras
Reunión MSSSI
Reunión MSSSI
Reunión ISCIII
La Plataforma de Biomarcadores SEAP-SEOM. Acciones realizadas
Hasta el momento se han realizado diversas acciones para la puesta en marcha y
desarrollo de la Plataforma PBC SEAP-SEOM
Incluyendo actividades de difusión externa, contacto con los principales agentes
involucrados en los aspectos regulatorios, sanitarios y productivos del desarrollo y
aplicación del análisis de biomarcadores en cáncer.
Jul 14 Sep14
60
1. Contexto y antecedentes
Las sociedades SEAP-SEOM constituyeron el Grupo de Trabajo en
Biomarcadores, con el fin de explorar iniciativas conjuntas para el desarrollo
del análisis de biomarcadores en cáncer.
SEOM
Dra. Pilar
Garrido
Dr. Luis PazAres
Dr. Ramón
Colomer
Dr. Fernando
Rivera
Dr. Alfonso
Berrocal
Dr. José Palacios
Calvo
Dr. Miguel Ángel
Piris
Dr. Eduardo
Salido
Dr. Xavier
Matías-Guiu
Dr. Javier Gómez
Román
Dr. Enrigue de
Álava
Dr. José Luis
Rodríguez Peralto
Dr. Santiago
Ramón y Cajal
Dr. Federico
Rojo Todo
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Plataforma de Biomarcadores en Cáncer SEAP-SEOM
Dr. Ramón
Salazar
Dr. M Martin
Dr. J Albanell
Dr. Javier
Puente
Dr. JM
Tabernero
Dra. E Felip
SEAP
La Plataforma de Biomarcadores SEAP-SEOM. Descripción
La Plataforma de Biomarcadores en Cáncer es una iniciativa conjunta de las
sociedades profesionales SEAP-IAP y SEOM que nace con la vocación de ser un
proyecto inclusivo.
Aspira a la participación de todos
aquellos centros asistenciales
interesados en colaborar en él, con
el fin último de promover y facilitar
la aplicación de las técnicas de
análisis de biomarcadores en
indicaciones
terapéuticas
en
cáncer.
Centros clientes
Base de datos
de
biomarcadores
Para ello es imprescindible
disponer de una herramienta que
permita la inclusión de la
información derivada de la
aplicación de estas técnicas.
Plataforma de Biomarcadores en Cáncer SEAP-SEOM
Centros prestadores
de servicios de
análisis de
biomarcadores
Centros que realizan
análisis de
marcadores in-house
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SERVICIOS DE CONSULTORÍA: ASCENDO CONSULTING
La Plataforma será gestionada por una entidad jurídica sin ánimo de lucro constituida
por las dos sociedades profesionales bajo la fórmula de fundación.
 Capacidad para captación de fondos y celebración de
acuerdos de colaboración con los distintos agentes
implicados en la determinación de biomarcadores de valor
terapéutico.
 Promover y participar en actividades de investigación.
 Desarrollar actividades formativas propias.
 Participación en la elaboración de informes, guías, y otras
actividades de difusión y transferencia del conocimiento.
Plataforma de Biomarcadores en Cáncer SEAP-SEOM
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Estructura organizativa tentativa de la Plataforma de Biomarcadores SEAP-SEOM
Fundación para el Desarrollo
de la Plataforma de
Biomarcadores SEAP-SEOM
Patronato
Comisión Ejecutiva
Destinatarios de
servicios
Internos
Comisión de
Investigación y Calidad
Centros
asistenciales
Unidad Técnica
Proveedores de
bienes y servicios
Plataforma web
Externos
Centros de
investigación
Farma
CRO/mensajería
Empresas de diagnóstico
(kits)
Plataforma de Biomarcadores en Cáncer SEAP-SEOM
Administración
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