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IDENTIFICACIÓN Y MEDICIÓN DE LA RESPUESTA INMUNE DESCRIPCIÓN DE UNA ENFERMEDAD INFECCIOSA 1. Nombre y sinonimia 2. Definición 3. Epidemiología 4. Etiología 5. Patogenia 6. Signos y síntomas 7. Lesiones 8. Diagnóstico 9. Tratamiento 10. Profilaxis Modelo de descripción de una enfermedad 1. Nombre: RABIA Sinonimia: lisa, hidrofobia 2. Definición: enfermedad infecciosa, contagiosa y mortal que afecta el sistema nervioso de los animales de sangre caliente incluido el hombre (zoonosis) 3. Epidemiología: se presenta en todos los continentes excepto parte de Oceanía existen países libres: Uruguay en América, España en Europa y los de carácter insular en los países infectados no hay distribución uniforme Se distinguen 2 ciclos: URBANA: mayoría de casos humanos por mordedura de perros y gatos SELVÁTICA: en animales silvestres los reservorios y vectores dependen de la región. En América son los murciélagos 4. Etiología Familia: Rhabdoviridae Género: Lyssavirus. Genoma ARN Tiene forma de bala VIRUS RÁBICO * VIRUS CALLE * VIRUS FIJO Virus aislado de animales y que Cepas adaptadas a animales no sufrió modificaciones en de laboratorio por pasajes laboratorio 4. Patogenia MORDEDURA CON VIRUS RÁBICO Axoplasma de nervios periféricos VÍA CENTRÍPETA Glándulas salivales Ovarios Testículos Riñones Adrenales Otros órganos y tejidos SNC 6. Signos y síntomas Período de incubación: 10 días a 2 meses Período de evolución: 7 a 10 días PRODROMO Períodos EXCITATORIO PARALÍTICO 7. Lesiones El animal presenta lesiones en todo el cuerpo debido principalmente a daños inflingidos por él mismo durante la etapa de furia 8. Tratamiento No hay. Ante la presunción de rabia debe sacrificarse al animal y enviar la cabeza al centro antirrábico para realizar el diagnóstico lo antes posible. 9. Profilaxis Vacunar a todos los perros y gatos a partir de los 3 meses de vida una vez al año Realizar observación veterinaria a animales mordedores por el término de 10 días Vacunar el ganado en áreas expuestas y reducir la población de vampiros Advertir e instruir a la población sobre el contagio producido a partir de animales silvestres y murciélagos RESPUESTA INMUNE HUMORAL SEROLOGÍA suero estudio “Ciencia de la detección de anticuerpos” Medición de las interacciones Ag - Ac, con fines diagnósticos, a partir del suero de un animal. Sensibilidad Capacidad de una prueba para detectar animales “enfermos” (VERDADEROS POSITIVOS) en una población “enferma”. Ejs. BPA-ELISA-WESTERN BLOTTING-INMUNOFLUORESCENCIA Especificidad Capacidad de una prueba para detectar animales “sanos” (VERDADEROS NEGATIVOS) en una población “sana”. Ejs. IDGA- WESTERN BLOTTING Prueba Animal ENFERMO SANO + Positivo verdadero Falso positivo - Falso negativo Negativo verdadero CLASIFICACIÓN DE PRUEBAS PARA MEDIR LA RESPUESTA INMUNE HUMORAL 1. PRIMARIAS Miden la cantidad de complejo Ag-Ac formado 2. SECUNDARIAS Miden las consecuencias de la unión Ag-Ac in vitro 3. TERCIARIAS Miden las consecuencias o el efecto protector de anticuerpos en el animal (in vivo) PRUEBAS PRIMARIAS Pruebas INMUNOENZIMÁTICAS: - ELISA - Western blotting Pruebas de INMUNOFLUORESCENCIA: - Directa - Indirecta - Citometría de flujo RADIOINMUNOENSAYO PRUEBAS INMUNOENZIMÁTICAS ELISA Fundamento: visualización de la cantidad de Ag-Ac formado a través de marcadores ligados a enzimas, que en presencia del sustrato específico, producen una reacción colorimétrica. ENZIMAS UTILIZADAS SUSTRATO • PEROXIDASA • ortofenildiamina • Fosfatasa alcalina • paranitrofenilfosfato ELISA Tipos de pruebas INDIRECTA SANDWICH detección de ANTICUERPO detección de ANTÍGENO COMPETICIÓN detección de ANTICUERPO ELISA INDIRECTO Lavado ANTÍGENO adsorbido (reactivo) Lavado Suero PROBLEMA Lavado ANTIGLOBULINA marcada con ENZIMA (reactivo) Detección de ANTICUERPOS SUSTRATO de la enzima (reactivo) CAMBIO DE COLOR ELISA COMPETICIÓN COLOR Lavado Lavado Ac monoclonal Conj. con enzima peroxidasa Y P O S I T I V O Suero Problema Lavado Y Antígeno Lavado Y Lavado Lavado Lavado Sustrato cromógeno Y N E G A T I V O Lavado AUSENCIA DE COLOR ELISA VENTAJAS DESVENTAJAS Alta sensibilidad y especificidad Rápido Reactivos estables Resultado visual Costo microplacas Costo equipo automatización APLICACIONES EN VETERINARIA Brucelosis Bia Babesia IBR Leucemia felina Trichinella BVD Salmonella Toxoplasma Peste porcina Aftosa Toxocara Aujesky Estreptococos Hormonas Newcastle TBC Micotoxinas Cuantificación de inmunoglobulinas INMUNOFLUORESCENCIA Fundamento: visualización de la cantidad de Ag-Ac formado a través de colorantes fluorescentes utilizados como marcadores COLORANTE UTILIZADO: ISOTIOCIANATO DE FLUORESCEÍNA (FITC) INMUNOFLUORESCENCIA Tipos de pruebas DIRECTA detección de ANTÍGENO INDIRECTA detección de ANTICUERPO CITOMETRÍA DE FLUJO detección de ANTÍGENO INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA 1. Corte o impronta (Ag desconocido) 3. Anticuerpo conjugado con FITC (reactivo) 5. OBSERVACIÓN Microscopio fondo oscuro-Luz UV Incubación 2. Fijado con acetona 4. Lavado INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA 4. Antiglobulina conjugada con FITC (reactivo) 2. Suero problema 1. Extendido de cultivo celular 3. Lavado 6. OBSERVACIÓN 5. Lavado Microscopio fondo oscuro-Luz UV INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA e INDIRECTA VENTAJAS DESVENTAJAS • alta sensibilidad • rápida, sencilla • evidencia de Ag intracelulares • reactivos estables • costo equipo • lectura subjetiva APLICACIONES EN VETERINARIA DIRECTA RABIA CAMPYLOBACTER LISTERIA CLOSTRIDIUM MICOBACTERIUM INDIRECTA ViLeF DISTEMPER IBR LEUCOSIS RABIA