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Balthasar van der Ast, 1620 Flowers & Fruit VIRUS y VIROIDES FITOPATOGENOS Ing. Agr. Elena Pérez MSc Unidad de Fitopatología Desarrollo del tema: • • • • • • • Características generales de los virus Importancia Taxonomía y clasificación Diagnóstico Desarrollo de la enfermedad Influencia del ambiente Criterios de manejo Características generales de los virus 1. CARACTERÍSTICAS ESTRUCTURALES 2. CARACTERÍSTICAS FISICAS 3. ASPECTOS GENERALES 1. CARACTERÍSTICAS ESTRUCTURALES 1. GENOMA. ssDNA, dsDNA, ssRNA, sdRNA 85% de los virus fitopatógenos ssRNA Función: Información genética para codificar las proteínas de la cápsula. 1. CARACTERÍSTICAS ESTRUCTURALES 2. CAPSULA. SUBUNIDADES PROTEICAS (capsómeros). GENERALMENTE UN SOLO TIPO DE PROTEINA, PERO ALGUNOS VIRUS GRANDES PUEDEN PRESENTAR MAS DE UNA. Función: proteger AN 1. CARACTERÍSTICAS ESTRUCTURALES MONOPARTITAS O MULTIPARTITAS Vírus del mosaico de la alfalfa: 5 subunidades de diferente tamaño. Fuente: Agrios, G. Fitopatologia, 1986 ¿por qué? 2. CARACTERÍSTICAS FÍSICAS. 1. Tamaño de los virus. UNIDADES SUBMICROSCOPICAS Microscopio óptico: 0,2 µm (0,0002 mm) Microscopio electrónico: (nm o Å). 2000 nm = 0,02mm 2. Forma de los virus Forma de los virus • varilla: flexible rígida 10-13 nm x 480-2000nm 15-20 x 130-300 nm Adaptado de Forma de los virus Esféricos/poliédricos: Adaptado de 17-60 nm Forma de los virus Baciliformes: Adaptado de 75 nm x 380 nm 3. ASPECTOS GENERALES • Parásitos obligados de células · Pueden: producir infecciones multiplicarse ·Más de un 30% patógenos en plantas ·Dificil identificación y control 3. ASPECTOS GENERALES No pueden: dividirse aumentar en tamaño reproducirse sexual o asexualmente ¿qué son los vírus? “Los virus…….son los virus” André Lwoff, Premio Nobel Medicina, 1965. Jan Davidsz de Heem, 1645. Vaso de flores Viroides Características: • 1. Bajo peso molecular • 2. No tienen cápsula proteica • 3. Se multiplican en forma autónoma • 4. Parásitos obligados • 5. Infecciosos Viroides • Composición: • ssRNA - circular • genome monopartita Viroides • Tamaño: • 75,000 - 125,000 d = 246-399 nucleotides Viroides • Descubiertos en 1967 Potato spindle-tuber • Unicamente en plantas Viroides • Multiplicación: no se conoce bien durante la transcripción del DNA del hospedero occurre en el nucleo Importancia de los virus Aspectos patogénicos Difícil detección, caracterización, diagnóstico y control de las enfermedades que producen. Aspectos biológicos Modelo para estudios de genoma (regulación de genes, mRNA) Taxonomía de virus NO SE UTILIZAN TERMINOS BINOMIALES EN LATIN Orden (virales) Familia (viridae) Género (virus) Especie (Tomato spotted wilt virus) Taxonomía de virus • Tobacco mosaic virus - TMV • Potato Y potyvirus (PYV) • Lettuce mosaic potyvirus (LMV) • Potato leafroll virus (PLRV) Taxonomía de virus PRIMER HUESPED + SÍNTOMA + VIRUS Familia: Bromoviridae Género Bromovirus Especie: brome mosaic virus. Familia: Bunyaviridae Género: Tospovirus Especie: Tomato spotted wilt virus Algunas caracteristicas taxonómica •Acido nucleico •Tamaño •Forma Taxonomía de virus Potato Y potyvirus (PVY) Lettuce mosaic potyvirus (LMV) Moteado Taxonomía de virus Barley yellow dwarf luteovirus (BYDV) Potato leafroll luteovirus (PLRV) DIAGNOSTICO •1. Observación de síntomas •2. Plantas indicadoras •3. Observación directa (microscopio electrònico) •4. Serología •5. Técnicas moleculares 2. Plantas indicadoras • Tabaco, pepino, Chenopodium quinoa, etc. – Sin síntomas – Lesiones locales – Síntomas sistémicos Transmisión Transmisión mecánica o por jugos • • • Macerado de planta enferma Abrasivo (carborundum) Planta sana 3. Observación directa Virus partícula Adaptado de Pequeña sección de un planta infectada 3. Observación indirecta TMV Adaptado de CMV PVY Cuerpos de inclusion 3. Observación directa Microscopía electrónica Adaptado de 4. Serologia reacción antígeno-anticuerpo •Inmunodifusión en gel •ELISA •Kit comerciales 4. Serologia Test de doble difusión: Ag3 Ag2 Ag1 Adaptado de Ab Ag4 4. Serología • ELISA = • Enzyme-Linked Immunosorbent Assay enzyme Ab An substrate Adaptado de 5. Técnicas moleculares PCR = Polimerase chain reaction (reacción en cadena de la polimerasa) CONSISTE EN AMPLIFICAR FRAGMENTOS DE DNA HASTA NIVELES DETECTABLES. Processes in Cell Biology transcription translation mRNA DNA replication DNA RNA reverse transcription protein Virus RNA Primer 3´ Enzima transcriptasa inversa Nucleotidos Tampón DNA Primer 5´ Enzima taq polimerasa Nucleotidos Tampón