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CUANTIFICAR LA RESPUSTA
IMUNE DE LOS LINFOCITOS
(T MEDIANTE IMAGEN DE
PET (TOMOGRAFIA POR
EMISION DE POSITRONES)
Maissa Melehi.
Hospital General de Elche.
MATERIAL Y METODOS
ANIMALES Y CELULAS: Ratones
imunocompetentes BALB/C y
inmuodeficintes CB.17SCID/SCID.Celulas
del mastocitoma de P815 in vitro.
 FORMACION DEL PLASMIDO: Se
introduce el fragmento 1-0kbsr39TK en de
MSCV-IRES-GPF.
 VIRUS:M-MSV/ M-MuLV aislados de
ratones con los tumores respectivos
producidos por estos virus

MATERIAL Y METODOS
Virus: El retrovirus MSCV-sr39TK-IRESGFP fue procesado por HEK 293 linfocito
T.Se utiliza para la primoinfeccion de los
linfocitos T virus vivos.
 Produccion del tumor y la reaccion imune
en el raton: Se injecta intramuscularmente a
BALB/c Y CB,17SCID/SCID 100microL de
los virus M-MSV/M-MuLVse controla con
p815.Se sacrifica el raton cuando el
volumen del tumor es de 1.5cc.

MATERIAL Y METODOS:

Infeccion retoviral y purificacion de LT:La
purificacion se determina mediante
anticuerpos B220,CD8,CD4 teñidos de LT
de bazo infectado. Se estumula la
proliferacion de estos LT con CD3 y CD28
y se infectan con el retrovirus MSCVsr39TK-IRES-GPF y 24 horas despues se
anliza la poblacion de CD8 yCD4 producida
mediante PET.
Material y metodos
Imagen del tumor en el animal portador
medianteMicroPET: Se injecta al animal
200 microg Ci de F (FHBG) y se seda.Se
coloca al raton en el Scaner emisor de
positrones y se escanea en 56min, las
imagenes son reconstituidas mediante filtros
y mapas algoritmicos.
 Se transfiere L T previamente marcados e
imnuzados: En un medio de cultivo se pone
en contacto a las 24-36 H estos linfocitos
con el tumor de animales.Como forma de
preimunizacion don se recoje L T CD8.

RESULTADOS
M-MSV/M-MuLVson virus poructores de
tumores altamente imunogenicos capaces de
ser rechados por ratones imunocompetentes.
 La intoduccion de gen del PET en celulas
diana mediante retovirus es crucial para la
determinacion de la poblacion de LT
imunizados.
 Se demostro que para determinar la
localizacion del tumor los LT tenian que
estar imunizados con antigenos positivos.

RESULTADOS
La tranferencia de la reaccion imune
adaptativa o secundaria de los LT
previamente imunizados solo se demostro
en tumores que expresan antigenos
positivos.
 Los linfocitos T imunizados se determinan
posteriormente con CD3 teñidos para
confirmar el hecho.

DISCUSION
Se estudio mediante metodos invasivos la
tansferencia de material imunogenico
teniendo que utilizar muchos animales y la
recojida de datos durante un tiempo largo y
sin vision tridimensional.
 El metodo no invasivo mediante imagen te
permite hacer un seguimiento mediante
localizacion del tumor con LT previanmente
marcados.

DISCUSION

La autoradiografia y el estudio
imunohistoquimico corroboran los
resultados del PRT.
CONCLUSIONES

EL PET ES UN METODO NO INVASIVO
QUE PERMITE DETERMINAR LA
LOCALIZACION Y EL SEGUIMIENTO
DEL TUMOR CON CELULAS
PREVIAMNETE MARCADAS Y
IMUNIZADAS ASICOMO
CUANTIFICAR E IDENTIFICAR LOS
IMUNOMODULADORES DE LA
REACCION IMUNE FRENTE AL
TUMOR.