Download Genética Forense, Polimorfismos y Variedad del Genoma Humano.

PRUEBAS GENETICAS EN LA
JUSTICIA
Dr. Gustavo A. Penacino
Fundacion INGEN
www.ingen.org.ar
Unidad de Análisis de ADN
Colegio Oficial de Farm. y Bioquímicos
www.adn.ac
Sociedad Latinoamericana de Genética Forense
www.slagf.org
Qué parte del ADN estudia la
Genética Forense?
• Sólo NO CODIFICANTE (junk dna)
porque:
• 1) Hay mas regiones variables.
• 2) Cuestiones éticas.
• Existen alrededor de 3.000.000 de
sitios variables en nuestro genoma.
Ejemplo de sitio variable «NN»
Sitio de adhesión (constante
en todos los humanos)
Sitio de adhesión (constante
en todos los humanos)
Alelo 1
Alelo 2
Unidad de Repetición (ej.: ACTG)
ESCENA DEL CRIMEN
MUESTRAS
OTRAS MUESTRAS
PCR: Reaccion en cadena
de la polimerasa
SE copia muchas veces un fragmento de ADN
ADN
Se desnaturalizan las cadenas
Reasociación de Primers
Síntesis de la nueva cadena
Se repite 30
veces el
Ciclado
Secuenciador de adn
Ejemplo de sitio variable «NN»
Sitio de adhesión (constante
en todos los humanos)
Sitio de adhesión (constante
en todos los humanos)
Alelo 1
Alelo 2
Unidad de Repetición (ej.: ACTG)
Kits con 21 o mas marcadores
Marcadores de cromosoma masculino
Kits con 23 o mas marcadores
Analizando un caso criminal.
Material Indubitado
de la Víctima.
Material Subungueal
Tomado de la Víctima
Tejido Dactilar de
la Víctima.
Sangre del
Sospechoso1.
Sangre del
Sospechoso 2
Coincidencia total
CALCULOS ESTADISTICOS
* indice y probabilidad de
paternidad.
* indice y probabilidad de
coincidencia
Marcadores de cromosoma X
Investigator Argus X-12 Kit dyes and corresponding markers
Investigator Argus X-12 Kit dyes and corresponding markers
Dye
Markers
6-FAM
Amelogenin
DXS10103
DXS8378
BTG
DXS10074
DXS10101
DXS10135
BTY
DXS7423
DXS10146
DXS10079
BTR
HPRTB
DXS10148
DXS7132
DXS10134
Marcadores de cromosoma X
•
Rastreo de Línea de Herencia
Materna:
El ADN Mitocondrial (ADNmt)
Mitocondria
•*Central de energía celular.
•*100 a 1000 mitocondrias por
célula.
•*Información Genética Propia.
Genoma Mitocondrial
•*Circular, covalentemente cerrado.
•*16.569 pares de bases.
•*D-Loop o Región de Control no
codificante (variable).
Secuenciación del ADNmt
 Herencia Materna
 Alto Número de Copias
 Regiones Variables ubicadas en el D-loop
COMO LLEGAMOS HASTA AQUÍ?
Los primeros intentos:
metodo de southern blot
(1985-1991)
GRAN AVANCE: PCR (1991)
LOS METODOS MANUALES
Los secuenciadores menos o mas
«automaticos» (1996- Actualidad)
ABI 377
ABI 310
1992
Atentado a la
Embajada de
Israel
Toma de muestras del atentado
•
Métodos en uso en 1992
Métodos innovadores
(basados en PCR)
1994
Atentado a la
mutual israelita
AMIA
Atentado a la AMIA
Vista general
Atentado a la AMIA.
Muestras
Atentado a la AMIA.
Resultados
Atentado a la AMIA.
Resultados
Atentado a la AMIA.
Resultados
www.ingen.org.ar
1) La realización de estudios de paternidad gratuitos
o a bajo costo para personas de escasos recursos,
y los análisis de evidencias forenses a bajo costo
(50% del arancel normal) a través de convenios
con los Poderes Judiciales provinciales.
- Particulares: laboratorios propios en Monte
Grande.
- Poderes Judiciales: laboratorio del Colegio de
Farm. y Bioquímicos, gestionado por la Fundación.
www.ingen.org.ar
2) La capacitación de profesionales que se dedican a
los análisis de ADN mediante cursos y jornadas,
con especial referencia a la solución de errores y
dificultades que se presentan en el laboratorio.
Organización y/o patrocinio de Congresos –como COLTIC y
TIAFT-, Jornadas y cursos de perfeccionamiento para
profesionales.
www.ingen.org.ar
3) Puesta en marcha de laboratorios oficiales
mediante la modalidad “llave en mano”, los cuales
prestan servicios al Poder Judicial local.
- Estrategia: alta calidad de resultados al menor
costo posible.
- En San Luis (finalizado), Misiones (en ejecución) y
Santiago del Estero (en ejecución).
- Una decena de provincias en etapa de consulta.
www.ingen.org.ar
4) Estudio de metodologías de análisis de ADN
orientadas al reemplazo de los costosos reactivos
importados; y desarrollo de nuevas tecnologías.
-Asesoramiento sobre la optimización de recursos y uso de
reactivos accesibles en el mercado local.
-Investigación de nuevas tecnologías: fenotipado forense
(proyecto).
2015?
2017?
2020?
Nuevos desarrollos: otros conceptos
-INDELS-
Otra tecnología: Microarreglos de
ADN
Microarreglos de ADN
Microarreglos de ADN
Fully Integrated Portable DNA Analyzer
Fully Integrated Portable DNA Analyzer
•
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(1) Recolección de la muestra
(2) Extracción del ADN
(3) PCR
(4) Electroforesis
(5) Análisis de STRs.
TODO EL PROCESO EN 25 MINUTOS!.
HACIA EL IDENTI-KIT GENETICO
-Forensic Phenotyping-
HACIA EL IDENTI-KIT GENETICO
Analysed tooth
of General
Władysław
Sikorski
(World War II).
Władysław Sikorski indeed had blue eyes and blond hair
FENOTIPADO FORENSE: últimos hallazgos
publicados
• OJOS AZULES , PIEL y CABELLOS CLAROS - mutación de
los Genes OCA1 y OCA2- (oculocutaneous albinism)
↓ melanina : Hum Genetics
• CABELLOS ROJOS y PIEL CLARA - mutación del
Gen MC1R ↑feomelanina : Science
Polimorfismo Gen MC1R (Melanocortin 1- receptor) 30 variantes alélicas de la eumelanina a través de las
enzimas TYRP1, TYRP2, SILV y la proteína P
• COLOR DE OJOS , PIEL y PELOS - variantes
alélicas de los genes SLC24A4 y IRF4
• COLOR DE PELO - variante cercana al gen KITLG
• COLOR DE OJOS y PECAS - dos variantes del gen TYR
• PECAS - una variante asociada a 6p25.3
• PELO OSCURO, PIEL COLOR OLIVA y COLOR
DE OJOS - polimorfismos en el gen MATP
(Membrane associated transporter protein)
FIN
Más información sobre análisis de ADN:
• Sociedad Latinoamericana de
Genética Forense:
www.slagf.org
• Laboratorio: www.adn.ac
• Fundación INGEN:
www.ingen.org.ar