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Curso análisis de semen según los criterios de la OMS2010 Mariam Cortés Tormo R2 Análisis clínicos Presentación Los criterios del nuevo manual de la OMS son los más aceptados mundialmente y además son necesarios para establecer un mismo lenguaje a la hora de interpretar un análisis de semen en cualquier lugar del mundo. ¿Para qué sirve un análisis de semen? Sirve para realizar estudios de infertilidad y esterilidad. Infertilidad: Pareja que presenta incapacidad de llevar a término las gestaciones. Se embarazan pero abortan. Esterilidad: Pareja que tras doce meses de relaciones sexuales sin métodos anticonceptivos no queda gestante. Anatomía y Fisiología Anatomía del aparato reproductor masculino. Anatomía y Fisiología Testículos Producción de espermatozoides Testículos Producción de espermatozoides Testículos Producción de espermatozoides Anatomía y Fisiología Testículos Función endocrina Testículos Espermatogénesis y esteroidogénesis Testículos Espermatogénesis y esteroidogénesis Duración: 72 días. Partes del espermatozoide Cabeza : núcleo y material genético Pieza intermedia: mitocondrias y fuente de energía Flagelo: movilidad y orientación necesarias para la fecundación del ovocito Partes del espermatozoide Cabeza Forma oval en visión frontal Forma piriforme en visión latera Partes del espermatozoide Cuello y flagelo Anatomía y Fisiología Vías excretoras o seminales Transporte de espermatozoides Anatomía y Fisiología Glándulas accesorias Vehículo para transporte de espermatozoides Glándulas accesorias Fases del eyaculado Glándulas de Cowper Preeyaculado 1ª Fracción del eyaculado 2ª Fracción del eyaculado Glándulas deLittre Lubricar la uretra como preparación de la eyaculación. Próstata (15-30%) Testículo-epidídimo (5-10%) Vesículas seminales (50-70%) Fase preanalítica Es de gran importancia debido a que precede a la realización de los análisis en el laboratorio. Comienza con la indicación del estudio, continúa con la preparación del paciente y los cuidados para la obtención de las muestras; en ella se han de tener en cuenta factores modificables o no modificables en la interpretación de los resultados Fase preanalítica Autorización administrativa El análisis de semen se debe realizar bajo la autorización Administrativa del Laboratorio clínico. Fase preanalítica Material Aparataje/ material fungible: Microscopio de contraste de fases con objetivos de 10X, 20X, 40X (CF) y 100X (inmersión) Estufa 37ºC Centrífuga Balanza (medir volumen) Pipetas automáticas Contador de células Cámara Neubauer improved Recipientes para la recogida de muestras Cubres, portas y tubos Pipetas Pasteur Tiras de pH Fase preanalítica Material Reactivos: Fase preanalítica Sistema de calidad Prácticamente todas las actividades laborales y entre ellas el laboratoro clínico deben enmarcarse en sistemas de calidad integrales. Organización Internacional para la Estandarización Dentro del sistema de calidad podemos acogernos a dos normas: La ISO 9001:2008 Es la norma general, la más actualizada y a la que se acogen prácticamente todos los centros La ISO 15189:2003 Es una norma específica del laboratorio clínico. Fase preanalítica Factores que afectan a la calidad del semen Recogida completa de la muestra Si se derrama la segunda parte de la muestra aumentará la concentración y Una muestra disminuirá el volumen incompleta será desechada Si se derrama la 1ª parte de la muestra obtendremos una concentración más baja Fase preanalítica Factores que afectan a la calidad del semen Abstinencia sexual (2-7 días) No influye en la movilidad ni en la morfología No influye en la vitalidad ni en el pH Sí influye en el volumen y concentración (los cuales aumentan a lo largo de los 7 días de abstinencia) Fase preanalítica Factores que afectan a la calidad del semen Variabilidad biológica Existe una gran variabilidad biológica intra- e interindividual, sobretodo en los niveles de concentración Es imposible caracterizar a un individuo con un único análisis de semen Realizar 2-3 análisis para conocer el estado basal de un individuo Fase preanalítica Factores que afectan a la calidad del semen Fármacos y tóxicos Espironolactona (diurético antagonista de aldosterona) Nitrofurantoína (bactericida) Quimioterapia Marihuana (inhibe espermatogénesis; es reversible) Tabaco (afecta a la movilidad espermática) Alcohol crónico ( depresor SNC e interfiere en los mecanismos de excitación sexual). Fase preanalítica Factores que afectan a la calidad del semen Otros Ejercicio físico Fiebre Estrés Exposición a elevadas Tº Fase preanalítica Recogida de muestras Instrucciones a pacientes Lugar de recogida Forma de recoger la muestra Contenedores de recogida Medidas higiénicas Abstinencia Tiempo recogida-entrega en el laboratorio Normas de transporte en caso de que la recogida sea en casa Medicación Fase preanalítica Recogida de muestras Instrucciones a pacientes Lugar de recogida Forma de recoger la muestra Cerca del laboratorio para controlar las fluctuaciones de Tª y tiempo de comienzo del análisis Contenedores de recogida En casa cuando no se puede hacer en el laboratorio. En este caso: Medidas higiénicas Llevar al laboratorio antes de una hora desde la recogida Abstinencia Transporte entre 20-37ºC Tiempo recogida-entrega en el laboratorio Proteger de la luz Normas transporte en caso debe de que la recogida Contenedorde adecuado, qué preferiblemente ser proporcionado por el laboratorio sea en casa Medicación Fase preanalítica Recogida de muestras Instrucciones a pacientes Lugar de recogida Forma de recoger la muestra Contenedores de recogida Nunca por coito interruptus: Medidas higiénicas Se puede perder la primera fracción Abstinencia Contaminación de la Tiempo recogida-entrega en el laboratorio Masturbación muestra Normas de transporte en caso de que la recogida Afectación de la movilidad sea en casa por el pH ácido de la vagina Medicación Fase preanalítica Recogida de muestras Instrucciones a pacientes Lugar de recogida Forma de recoger la muestra Contenedores de recogida Medidas higiénicas Contenedores de cristal o plástico: Abstinencia Testados de no toxicidad Tiempo recogida-entrega en el laboratorio Mantener antes contenedores Normas de transporte en caso de que lalos recogida entre 20-37ºC sea en casa Medicación Fase preanalítica Recogidas especiales Análisis microbiológico Protocolo especial de recogida: Orinar Lavado de manos y genitales, enjuagado con agua y secar. Recoger la muestra Todo el material debe ser estéril No exceder más de tres horas el inicio del cultivo Fase preanalítica Recogidas especiales Análisis microbiológico ¿Cuándo es recomendado? Hipospermia o pH<7 Hemospermia Presencia leucocitospermia (>10^6 leucocitos/ml) Presencia de aglutinaciones expontáneas de los espermatozoides en el eyaculado Marcada asteno-, oligo o teratozoospermia Antecedente de infecciones urogenitales Inclusión en programas de reproducción asistida Fase preanalítica Recogidas especiales Eyaculación retrógada La eyaculación de la muestra en lugar de seguir la vía habitual a través de la uretra asciende hasta la vejiga atravesando el orificio urovesical. Se da en pacientes con < 1ml o aspermia Es frecuente en: Diabéticos Lesionados medulares Lesiones neurológicas Fase preanalítica Recogidas especiales Eyaculación retrógada Protocolo de recogida: Noche anterior Ingerir 2gr de bicarbonato sódico para alcalinizar la orina. Día de la recogida Orinar: medir osmolaridad y pH Ingerir: 4 g de bicarbonato y 500 ml de agua (750 ml en diabéticos Orinar cada 15 min hasta que osm= 350-400 mosm/kg y pH 6.5-8 Tener orgasmo Recoger orina en medio con 10 ml de cultivo estéril y centrifugar (600g, 8 min). Resuspender en 1ml de cultivo estéril Fase preanalítica Recogidas especiales Análisis postvasectómicos Después de 24 eyaculaciones (Lo ideal 4 meses) Realizar el segundo análisis a las 2-4 semanas del inicial No dejar de utilizar anticonceptivos hasta dos análisis de semen sin espermatozoides Nunca se considera un semen azoospérmico hasta ser evaluado por el método adecuado No debe indicarse “ 0 espermatozoides”, ya que la imprecisión de las cámaras de contaje es alta. Fase preanalítica Recogidas especiales Análisis postvasectómicos A veces hay espermatozoides tras 3-4 meses (30% muestras)inmóviles Repetir a los 7 meses (10% de los spz inmóviles) AZOOSPERMIA SUI GENERIS Puede abandonar métodos anticonceptivos (riesgo de gestación 1/2000) Fase preanalítica Prevención de riesgos Debe considerarse el semen con material potencialmente infeccioso ( VIH, VHB y VHC) Todo el personal del laboratorio de andrología debe estar vacunado de VHB Se deben tomar una serie de medidas de seguridad biológica como llevar guantes, utilizar pipetas automáticas, lavarse las manos con soluciones antisépticas… Fin primera parte