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DIVERSIDAD MICROBIANA
EN UN MICROAMBIENTE
COLUMNA DE WINOGRADSKY
INTEGRANTES
Escobedo Carmona Oscar
 Espino Baca Jessica
 Flores Corona Luis Ernesto
 Geyer de la Merced Sara Ytalivy
 Olivares Espinosa Liliana
 Ruíz Rosario Mónica
 Silvestre Varela Diego
 Torres González Laura

Se obeservó:
clorofíceas y
algunos
paramecium
Inicia
decaimiento de
protozoarios y
aumenta número
de bacterias
PRIMERA
SEMANA
TERCERA
SEMANA
(14/09/10)
(14/10/10)
SEGUNDA
SEMANA
CUARTA
SEMANA
(30/09/10)
(18/11/10)
Mayor
desarrollo de
protozoarios y
algas. Aparecen
las primeras
bacterias.
Bacterias
predominan en
número, escasa
cantidad de
protozoarios.
Presencia
constante de
algas
PRIMERA SEMANA
CARACTERÍSTICAS
MACROSCÓPICAS
Se observó
sedimentación uniforme
sin bandas de color café
oscuro. Además de la
presencia de una
pequeña banda verde en
la superficie. La fase
líquida se observó de
color verde claro, con
olor característico y sin
presencia de burbujas.
CARACTERÍSTICAS
ZONA
MICROSCÓPICAS
MICROORGANISMOS OBSERVADOS
Superficie
Algas clorofíceas.
Media
superior
Algas clorofíceas y microalga.
Media Inferior Diatomeas y poca cantidad de algas clorofíceas y
protozoarios paramecium.
Fondo
Abundante cantidad de algas cloroficeas y poca
cantidad de protozoarios paramecium.
En la columna de Winogradsky las algas y cianobacterias
aparecen rapidamente en las capas superiores de la columna
(Mádigan, 2008)
Fecha: 14/09/2010
Muestra: Zona superficial de la columna
de Winogradsky.
Preparación: En fresco
Tinción: Sin tinción
Descripción: En la imagen se observan
algas clorofíceas
Fecha: 14/09/2010
Muestra: Zona media superficial de la
columna de Winogradsky.
Preparación: En fresco
Tinción: Sin tinción
Descripción: En la imagen se observa un
protozoario paramecium.
INICIO
SEGUNDA SEMANA
CARACTERÍSTICAS
MACROSCÓPICAS
Se observó
sedimentación de color
negro. Una banda
superficial de color café.
Y la fase líquida de
color verde claro con
presencia de burbujas,
materia orgánica
flotando y aroma
característico muy
fuerte.
CARACTERÍSTICAS MICROSCÓPICAS
ZONA
MICROORGANISMOS OBSERVADOS
Superficie
Diatomeas, clorofíceas, microalgas y un protozoario
flagelado.
Media
superior
Diatomeas y clorofíceas en poca cantidad.
Media Inferior Diatomeas y protozoarios paramecium en mayor
cantidad que en la primera semana.
Fondo
Se observaron algas clorofíceas y protozoarios
ciliados en gran cantidad, además de cocos y
espirilos gram negativos sin agrupación.
Fecha: 30/09/2010
Muestra: Zona media inferior de la
columna de Winogradsky.
Preparación: En fresco
Tinción: Sin tinción
Descripción: En la imagen se un alga
diatomea en un círculo verde.
Fecha: 30/09/2010
Muestra: Fondo de la columna de
Winogradsky.
Preparación: En fresco
Tinción: Sin tinción
Descripción: En la imagen se observan
protozoarios ciliados.
Fecha: 30/09/2010
Muestra: Fondo de la columna de Winogradsky
Preparación: Fija
Tinción: De Gram
Descripción: En la imagen se observan Espirilos
Gram negativos sin agrupación en círculos
azules y cocos gram negativos sin agrupación
en círculos verdes.
INICIO
TERCERA SEMANA
CARACTERÍSTICAS
MACROSCÓPICAS
Se observó
sedimentación de color
negro con surcos
grandes. Una banda
gruesa de color café en
la superficie. Y la fase
líquida de color verde
oscuro con presencia de
burbujas y aroma
característico no tan
fuerte.
CARACTERÍSTICAS
ZONA
MICROSCÓPICAS
MICROORGANISMOS OBSERVADOS
Superficie
Algas, microalgas y diatomeas.
Media
superior
Protozoarios ciliados y flagelados en poca cantidad.
Algas clorofíceas en mayor cantidad. Bacilos cortos y
largos Gram negativos
Media Inferior Diatomeas y microalgas. Se observaron bacilos y
cocos Gram negativos.
Fondo
Se observaron algas clorofíceas, además de cocos
Gram positivos y cocos y diplococos Gram negativos.
Fecha: 14/11/2010
Muestra: Zona media superficial de la
columna de Winogradsky.
Preparación: En fresco
Tinción: Sin tinción
Descripción: En la imagen se observa un
protozoario flagelado
Fecha: 14/10/2010
Muestra: Zona media superficial de la
columna de Winogradsky.
Preparación: En fresco
Tinción: Sin tinción
Descripción: En la imagen se observa un
protozoario ciliado.
Fecha: 14/10/2010
Muestra: Fondo de la columna de
Winogradsky.
Preparación: Fija
Tinción: De Gram
Descripción: En la imagen se observan cocos
Gram positivos, cocos Gram negativos y
diplococos Gram negativos.
INICIO
CUARTA SEMANA
CARACTERÍSTICAS
MACROSCÓPICAS
Se observó sedimentación
de color negro (zona
anaerobia). Una banda de
color café violáceo con una
zona líquida de color café
rojizo (zona microaerófila).
Además de una banda
gruesa de color verde en la
superficie (zona aerobia).
En la fase líquida hubo
presencia de burbujas y
débil aroma característico.
ZONA ANAERÓBICA: Está situada en el fondo
de la columna. En esta zona se desarrollan dos
tipos de microorganismos: fermentadores de
materia
orgánica
y
anaerobios.
Ambos
descomponen la materiaorgánica y dan lugar a la
formación de ácidos orgánicos, alcoholes y H2.
 ZONA MICROAERÓFILA: Hay cierta cantidad
de H2S. En una primera franja se localizan las
bacterias verdes del azufre que procesan los
sulfatos a azufre y aparecen en una franja
verdosa. En zonas cercanas se forma una capa
negra de bacterias que procesan el hierro pero
esta está por debajo de la anterior. Un poco más
arriba se desarrollan las bacterias púrpuras del
azufre. Se caracteriza por su color rojo púrpura.
Todas las bacterias de la zona microaerófila
obtienen energia de reacciones luminosas

CARACTERÍSTICAS
ZONA
MICROSCÓPICAS
MICROORGANISMOS OBSERVADOS
Superficie
Protozoario paramecium y un cúmulo de microalgas.
Media
superior
Se observó un cúmulo de algas clorofíceas además
de bacilos y espiroquetas Gram negativos.
Media Inferior Se observaron diatomeas, microalgas, un alga
Scenedesmus y un protozoario ciliado. Además de
tetradas de cocos Gram negativos, bacilos Gram
negativos agrupados en cadena, cocos Gram
negativos sin agrupación, bacilos Gram negativos
sin agrupación y diplococos Gram negativos sin
agrupación.
Fondo
Se observaron algas clorofíceas, diatomeas,
protozoarios paramecium además de cocos,
espiroquetas y espirilos Gram negativos y positivos
sin agrupación.
Fecha: 18/11/2010
Muestra: Zona media inferior de la
columna de Winogradsky.
Preparación: En fresco
Tinción: Sin tinción
Descripción: En la imagen se observa un
alga scenedesmus dentro de un círculo
verde.
Fecha: 18/10/2010
Muestra: Zona media superficial de la
columna de Winogradsky.
Preparación: En fresco
Tinción: Sin tinción
Descripción: En la imagen se observa un
protozoario ciliado.
INICIO
NUTRICIÓN
Clasificación nutricional.
Cuadro de desarrollo microbiano. (resiembra)
MEDIO
FORMULACIÓN (g/L)
ZONA DE LA COLUMNA
Superior
Media
superior
Media
inferior
Fondo
Luz
Oscuridad
Luz
Oscuridad
Luz
Oscuridad
Luz
Oscuridad
A
15.0 de agar
++
+
++
+
+
+
++
+
B
0.5 de MgSO47H 20, 0.5 de
K2HPO 4, 15.0 de agar.
+
++
+
++
+
++
+
++
C
0.5 de MgSO47H 2 0 , 0.5 de
K2HPO 4, 1.0 de NH4Cl, 10.0 de
glucosa, 15.0 de agar
+
+
+
+
+
+
+
+
D
0.5 de MgSO47H 2 0 , 0.5 de
K2HPO 4, 10.0 de glucosa,
15.0 de agar
+
+
+
+
+
+
+
+
E
0.5 de MgSO47H 2 0 , 0.5 de
K2HPO 4, 10.0 de peptona, 15.0
de agar
+++
+++
+++
+++
+++
+++
+++
+++
F
0.5 de MgSO47H 2 0 , 0.5
deK2HPO 4, 10.0 de glucosa, 0.2
extracto de levadura, 15.0 de
agar.
+
-
++
-
++
-
+
-
CLASIFICACIÓN NUTRICIONAL DE LAS BACTERIAS PRESENTES EN LA COLUMNA DE
WINODRADSKY
Medio de Cultivo
Zona de la columna
Superficial
A
Morfología y Gram
Cocos, bacilos largos y cortos gramnegativos.
Sin agrupación.
Media superior
Bacilos largos y bacilos cortos, gramnegativos.
Sin agrupación.
Media inferior
Diplococos, bacilos cortos y espiroquetas
gramnegativos.
Fondo
Bacilos largos y cortos gramnegativos. Sin
agrupación.
Superficial
B
Cocos, bacilos largos y cortos gramnegativos.
Sin agrupación
Media superior
Diplococos, Bacilos largos y cortos
gramnegativos sin agrupación.
Media inferior
Diplococos, bacilos cortos y espiroquetas
gramnegativos.
Fondo
Gram negativos y Gram positivos. Cocos,
bacilos largos y cortos , sin agrupación
Clasificación Nutricional
*hubo crecimiento debido a que se
arrastraron nutrientes de la columna, pero no
se debió haber observado crecimiento
Fotolitoautotrofos
y
Quimiolitoautotrofos
*No hubo crecimiento en los que se incubaron
sin luz
Superficial
C
D
Bacilos cortos y cocobacilos gramnegativos
sin agrupación.
Media superior
Bacilos cortos, cocobacilos y cocos
grampositivos, además de bacilos cortos,
cocobacilos y cocos gramnegativos.
Media inferior
Cocos y bacilos cortos gramnegativos.
Además se observaron algunos bacilos y
cocos grampositivos sin agrupación.
Fondo
Cocos agrupados en diplococo
gramnegativos, además presencia de
bacilos cortos y cocobacilos gramnegativos.
Superficial
Cocos gram negativos y positivos, algunos
con agrupación en tétradas.
Media superior
Bacilos cortos gramnegativos, algunos
bacilos largos y cocobacilos gramnegativos.
Media inferior
Solo se observaron cocos gram positivos.
Fondo
Bacilos cortos gram negativos y escasos
cocos y cocobacilos gram negativos.
Fotoheterotrofos
y
Quimioheterotrofos
Fotoheterotrofos
Y
Quimioheterotrofos
E
F
Superficial
Bacilos cortos gram negativos y
algunos cocos gram positivos.
Media superior
Cocos gram negativos
Media inferior
Cocos gram positivos algunos
como diplococos.
Fondo
Bacilos cortos gram negativos.
Superficial
Bacilos cortos gramnegativos,
cocos gramnegativos agrupados
en diplococo y en menor
proporción bacilos largos
gramnegativos.
Media superior
Bacilos cortos, cocobacilos y
cocos en menor proporción,
todas gramnegativas.
Media inferior
Bacilos cortos, cocobacilos y
cocos, todas estas bacterias eran
gramnegativos.
Fondo
Bacilos cortos, cocobacilos y
espirilos, todos ellos
gramnegativos. Se alcanzaron a
observar algunos cocos
gramnegativos sin agrupación.
Quimioorganoheterotrofos
Y
Fotoorganoheterotrofos
Quimioorganoheterotrofos
Y
Fotoorganoheterotrofos
(auxotrofos)
INICIO
CARACTERIZACIÓN
FISIOLÓGICA
Ciclos biogeoquímicos
Requerimientos de oxígeno
DIVERSIDAD METABÓLICA
Tipo de microorganismo
Superficie
Fondo
Observaciones
Bacterias G+
-
-
No se observó ninguna colonia.
Bacterias G-
++
+++
Se observaron bacterias Lac+ y
Lac -.
Anaerobios
+
+++
Las colonias eran de color blanco y redondas.
Aerobios
+++
++
Proteolíticos
-
++
Se observó un halo alrededor de las bacterias
proteolíticas.
Amilolíticos
++
-
Se observó en la superficie un color amarillo. En el
fondo se observó el medio de color azul.
Mineralizadores de P
+
+
Se observó poco crecimiento en ambos tubos
Solubilizadores de P
+++
-
En la superficie se observaron gran cantidad de
colonias blancas pequeñas.
Fijadores de N vida libre
+++
-
Pequeñas colonias blancas.
Amonificantes
++
+++
Se observó precipitación y un color café al agregar
el reactivo Nessler en ambos tubos.
Desnitrificantes
++
++
Formación de burbuja de N2en ambos tubos.
Oxidantes del S
+++
+++
En la superficie y en el fondo se observó un
crecimiento en todo el tubo.
Reductores de SO4
+++
+++
En superficie se observó y precipitado color negro
y en el fondo se observó un color anaranjado.
+++= Desarrollo abundante, ++ = desarrollo medio, + = desarrollo escaso, y - = sin desarrollo
REQUERIMIENTOS DE OXÍGENO


Se obtuvo que en el medio de cultivo (Agar Brewer),
incubado en una zona de anaerobiosis hubo mayor
crecimiento en la muestra tomada del fondo, debido a
que en esta zona hay muy poca cantidad de oxigeno
por lo tanto los microorganismos presentes en estas
zona usan el metabolismo energético llamado
desasimilador que consiste en la reducción de nitrato,
sulfato o CO2.
En el medio de cultivo incubado en un zona de
aerobiosis se obtuvo mayor crecimiento en la muestra
tomada de la superficie, debido a que los
microorganismos que crecen en esta zona usan el O2
como aceptor de electrones para su metabolismo
energético.
EMB
Se observa crecimiento en ambas partes de la columna,
teniendo un mayor desarrollo en la parte del fondo. Se
observa tanto en el fondo como en la superficie bacterias
Lac + y Lac-. Por lo tanto como hubo crecimiento en este
medio de cultivo podemos decir que existe bacterias G-.
Manitol
En las dos partes de la columna (fondo y superficie) no
observamos ningún crecimiento, por lo que podemos decir
que no existen bacterias G+.
Prueba de antagonismo, En medio BHI
Tanto en el fondo como en la superficie de la columna
observamos que en la zona en donde sembramos E.coli
existía un crecimiento de la estría recta, en la zona donde
sembramos M. luteus y S. aureus no existió ningún
crecimiento , en cambio en B. subtilis solo se observo una
parte con crecimiento en la estría. Podemos interpretar que
en las partes donde no existe ningún crecimiento existe
antagonismo.






Medio leche descremada
Microorganismos
proteolíticos,
(presencia
de
proteasas) que hidrolizan las proteínas (caseína) en
la leche.
Se observó presencia de degradadores de caseína en
fondo pero no en superficie.
En el medio se observa un halo alrededor de las
colonias que hidrolizan la caseína.
Medio Agar almidón
Microorganismos amilolíticos, (presencia de amilasas)
que hidrolizan el almidón.
Se observó la presencia de degradadores de almidón
en superficie pero no en fondo.
Al agregar yodo-yoduro (lugol) se produce un color
azul a reaccionar con el almidón, por lo tanto si se
encontrara microorganismos amilolíticos el medio se INICIO
observara con zonas blancas alrededor de las colonias.