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División de Ciencias Biológicas y de la Salud Ingeniería Bioquímica Industrial Ingeniería Enzimática Trimestre 2016-O 11 de octubre de 2016 1. Se ha determinado la velocidad inicial de una reacción catalizada por una enzima (E0=5.0 nM) para diversas concentraciones de sustrato. Los datos obtenidos son: [S] (mM) V (µM min-1) 0.030 0.050 0.100 0.300 0.600 1.000 0.44 0.68 1.14 2.52 3.52 3.7 a. Calcula Vmax y KM utilizando un método de regresión lineal b. Calcula kcat k c. Determina el coeficiente de especificidad, cat KM 2. En un experimento se midió la tasa inicial de una reacción enzimática, v, a varias concentraciones de substrato [S]. La concentración de la enzima es 5 μM. Se graficó [S]/v versus [S] y se observó una línea recta con la ordenada al origen b=60 min y la pendiente m=0.2 mM-1 min. ¿Cuál es el valor de KM y el de Vmax para esta reacción enzimática? ¿Cuál es el valor de kcat para esta enzima? 3. En un experimento se midió la tasa inicial de una reacción enzimática, v, a varias concentraciones de substrato [S]. La concentración de la enzima es 25 nM. Se graficó 1/v versus 1/[S] y se observó una línea recta con una ordenada al origen de 0.02 μM-1 min y la pendiente es 70 min. ¿Cuál es el valor de KM y el de Vmax para esta reacción enzimática? ¿Cuál es el valor de kcat para esta enzima? ¿Determine el coeficiente de especificidad? 4. En un experimento se midió la tasa inicial de una reacción enzimática, v, a varias concentraciones de substrato [S]. La concentración de la enzima es 15 μM. Se graficó [S]/v versus [S] y se observó una línea recta con la ordenada al origen b=15.75 min y la pendiente m=0.035 mM-1 min. ¿Cuál es el valor de KM y el de Vmax para esta reacción enzimática? ¿Cuál es el valor de kcat para esta enzima?