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Por Donde Empezar!!
Situaciones
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Caza ilegal: caza, pesca
Adulteración de especies o fraude de alimentos
Especies en peligro: el tráfico ilegal
Casos forenses: el abuso, el robo, la evidencia
encontrada en la escena "humano " del delito
• Brotes de enfermedades, las zoonosis
(tuberculosis, la EEB, etc)
• No hay datos morfológicos disponibles
Los métodos disponibles
• Electroforesis de proteínas
– El calor desnaturaliza en los alimentos procesados
• ADN, basados en la PCR
– ¿ Específicos o universales especies?
• ¿Qué métodos utilizar?
– ¿ En tiempo real PCR, RFLP, secuenciación, otros?
• Hueso, marfil, plumas, materia fecal, sangre
– ¿ Muestras difíciles necesitan técnicas diferentes?
¿Qué marcadores se utilizan?
• ¿ Microsatélites? ¿Las diferentes especies?
– ¿ Los pros y los contras?
• ADNmt
– D-loop, 12S, 16S
– Citocromo B, gen COI (citocromo c oxidasa)
– ¿ Los pros y los contras?
• ¿ Marcadores universal? ¿ Bases de datos?
– ¿ Los pros y los contras?
Cit B vs CO1
• Tobe et al, Genética FSI
• Las pruebas fueron primero una adaptación de
los estudios filogenéticos (citb)
– Universal de los cebos, la secuencia; pero no hay
directrices en cuanto a lo que la variación porcentual
fue; exclusión o inclusión
• Código de barras del ADN (CO1) en 2003, para la
identificación y taxonomía
– Secuenciación, los cebadores universales, base de
datos disponible en línea, a continuación, comparar
con secuencia de referencia
Estudio echo por Tobe
• En comparación con 236 diferentes mamíferos, pedidos 29 con
ambos marcadores
• Found size of each gene to be variable between species but
invariable w/in same species
• Tamaño encontrados de cada gen es variable entre las especies,
pero invariable en una misma especie
– Citocromo B (1149 bases) 22,4% (257 pb) se conserva en todas las
muestras
– CO1 (1557bp) 43.7% (680 bases) se conservaron
• Entre especie usando humanos, vaca, y perro
– 82%,97& , 98% homólogo (cit b)
– 88%, 97% and 98% en CO1
• Fue concluido que citocromo b trabajó mejor en los fragmentos
pequeños (degradados) y en variación dentro de las especies
Uso presunto de ID de ADN
mitocondrial
• Citocromo B universal; cebador adelante y
atrás que son específicos de especie
• Animales domésticos
• Multiplexado
Un método rápido y simple para la identificación de
las especies de carne y productos cárnicos mediante
PCR
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Linea 1 – KB Ladder
Linea 2 – Cabra
Linea 3 – Cabra
Linea 4 – Pollo
Linea 5 – Pollo
Linea 6 – Equino
Linea 7 – Equino
Linea 8 – Bovino
Linea 9 – Bovino
Linea 10 – PCR - control
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Ciencia carne, Volumen 51, Número 2, febrero de 1999, páginas 143-148T.
Matsunaga, K. Chikuni, R. Tanabe, S. Muroya, K. Shibata, J. y Y. Yamada Shinmura
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