Download Diagnostico Bacteriológico de la Tuberculosis

DIAGNOSTICO
BACTERIOLÓGICO DE
LA TUBERCULOSIS:
CULTIVO
Salta, Noviembre 2015
CULTIVO
 Método
de
referencia por
su precisión y
especificidad
para confirmar
el diagnostico.
 Complementa
a
la baciloscopía
 15 – 20% todos los casos de TB
APORTE  20 – 30% casos de TB pulmonar
 variable para TB extrapulmonar
VENTAJAS

Permite dar seguridad al resultados de BK +: hisopados, BAL.

Permite identificar especie por métodos bioquímicos.
Importante en pacientes inmunodeprimidos :
DESCARTAR MICOBACTERIOSIS

Alta sensibilidad: 100% en muestras pulmonares
(10 – 100 BAAR/muestra).

Detecta BAAR viables  mejor método para demostrar
curación del paciente al finalizar tratamiento.

Permite realizar Prueba de Sensibilidad a drogas

Es el Método de Referencia para evaluar todo nuevo método
diagnostico
DESVENTAJAS
 Sensibilidad
 Tiempo:
variable en TB EP.
20 – 60 días (en medios sólidos).
BAAR se multiplican cada 24 – 48 hs
Gérmenes comunes cada 15 – 60 min
PERSISTENCIA DEL BACILO EN LAS
MUESTRAS:



El tiempo es crítico en muestras con escasos
BAAR y con PH acido (orinas, LG).
Esputos: hay reproducción de flora contaminante
que puede desnaturalizar la muestra.
Sin embargo , en muestras con alto contenido de
BAAR se han obtenido Cultivos (+ ) en muestras
de 15 días de recogida (HELADERA)
•LUZ SOLAR
•CALOR (> 40ªC)
•DESECACION
RESISTE A BAJAS
TEMPERATURAS
USO SELECTIVO DEL CULTIVO
???
PARA
DIAGNOSTICO
 BK
negativa de 3 muestras respiratorias
 Extrapulmonares
(orina, líquidos de punción,
sangre,biopsias, pus de cavidades abiertas)
 Muestras
de niños
 Inmunosuprimidos,
particularmente HIV y
diabéticos.
 BK
+ en lavado gástrico, BAL, hisopados
 Pacientes
con antecedentes de tratamiento
antituberculosos previo, especialmente si se
registro abandono o fracaso.
 Contactos

de casos con tuberculosis resistente
Internados o trabajadores de instituciones de
salud o comunidades cerradas donde se
registran casos con TB – MR.
PARA CONTROL DE
TRATAMIENTO
 Pacientes
con BK + en el control del
2º mes de tratamiento o en un
control posterior (4º y 6º).
 Casos
diagnosticados con BK + y que
convierten a BK + durante el
tratamiento
METODOS….
Nuestro
objetivo…
Contamos
con…

Método de Petroff.

•

Método de Kudoh.
•
•
MGIT 960
Se pueden sembrar todas
las muestras, excepto
sangre.
Resultados tardan entre
4 y 13 días.
Prueba sensibilidad a SIRE
MÉTODO KUDOH OGAWA
1. Adherir a un hisopo estéril las partículas
útiles del esputo.
MÉTODO KUDOH OGAWA
2. Sumergir en un tubo con 3 ml de NaOH 4%
durante 2 minutos
2 min

NaOH 4 %  DECONTAMINACIÓN
MÉTODO KUDOH OGAWA
3. Frotar el hisopo sobre la superficie de 2
tubos por muestra
Máximo:
5 muestras
MUESTRAS BAAR POSITIVO
PROCESAR ULTIMO
(CONTAMINACION CRUZADA)
MÉTODO KUDOH OGAWA
4.
Tapar con algodón.
Quemar tapón.
Colocar tapa de goma.
INCUBAR 37º C
• PROCESAR LAS MUESTRAS SIN DEMORA, EN EL
MISMO DIA.
• CASO CONTRARIO REFRIGERAR
MÉTODO KUDOH OGAWA
5.
LECTURA:
20, 30 y 60 dias
REGISTRO DE RESULTADOS
REGISTRO
CONTAMINADO
NEGATIVO
Nº EXACTO DE
COLONIAS
SI SE OBSERVA
Todos los tubos contaminados
Sin desarrollo luego de la lectura a las 8
semanas de incubación
Entre 1 y 19 colonias en el total de medios
sembrados
POSITIVO +
20 a 100 colonias
POSITIVO ++
Mas de 100 colonias (separadas)
POSITIVO +++
Mas de 100 colonias (confluentes)
MÉTODO KUDOH OGAWA
VENTAJAS

Económico: no requiere Asparagina (Glutamato)

Procedimiento de decontaminación y sembrado
simple: NO REQUIERE CENTRIFUGACION


No requiere equipamiento ni personal especializado
Adecuado para laboratorios con poca
infraestructura

La muestra sembrada puede ser enviada a grandes
distancias (refrigerada)

Mayor cobertura al diagnostico
MÉTODO KUDOH OGAWA
DESVENTAJAS
Sensibilidad:
96 %
Porcentaje de contaminación:
10%

No
se aplica a muestras EP
CULTIVO EN LA RED DE
LABORATORIOS
 Mayor
dedicación del personal por cada
muestra
 Entrenamiento
 Equipos
en prácticas de mayor riesgo
de mediano y alto costo
 Laboratorio
espacioso, con direccionamiento
y purificación de aire
RIESGO EN EL LABORATORIO DE
TUBERCULOSIS
BAJO
• Tareas administrativas
• Preparación y almacenamiento de materiales, reactivos
RIESGO
RIESGO
MEDIO
ALTO
RIESGO
• Ingreso de muestras
• Microscopia
• Procesamiento de muestras: BK, cultivo y PS
• Esterilización de material potencialmente infeccioso
NIVELES DE RIESGO ASOCIADOS
CON
LAS ACTIVIDADES REALIZADAS EN EL
LABORATORIO
Nivel de riesgo del laboratorio de
tuberculosis
Bajo riesgo
Actividades del laboratorio
Baciloscopía
Cultivo en Kudoh
Evaluación del riesgo
Bajo riesgo de generar
aerosoles;
Baja concentración de
particulas infectantes
Riesgo moderado
Procesamiento y
concentración de muestras
para inoculación en medios de
cultivo (Petroff)
Moderado riesgo de generar
aerosoles;
Baja concentración de
particulas infectantes
Alto riesgo (laboratorio de contención)
Alto riesgo de general
Manipulación de cultivos para
aerosoles;
identificación y Pruebas de
Alta concentración de
sensibilidad
particulas infectantes
BACILOSCOPIA
CULTIVO: KUDOH



Material viscoso, poca
producción de
aerosoles.
Carga bacilar: baja
103 – 106 BAAR/ml
Riesgo relativo de
contraer TBC:1.4
(Población general:1.0)
CULTIVO:
PETROFF

Alta generación de
aerosoles
Carga bacilar: alta
Mas de108 BAAR/ml

Riesgo relativo de
contraer TB:7.8
 Prueba de
sensibilidad: 22

LABORATORIOS DE ALTO RIESGO
NIVEL
III
Manipulación de cultivos
para:
 identificación
 pruebas de sensibilidad
Alta carga bacilar (mas de 5
cultivos + al mes)
NUESTRO
PROMEDIO: 20
1. BARRERA DE PROTECCIÓN PRIMARIA
Cabinas de seguridad biológica (CSB)
PROTECCION: operador, producto y medio
ambiente.
Buenas prácticas de laboratorio
•EL PROCESAMIENTO Y
DIGESTIÓN DEL ESPUTO Y
LAS MANIPULACION DE LAS
MUESTRAS
DEBEN SER REALIZADAS EN
LA CSB
CLASE II A2
2. BARRERA DE PROTECCIÓN SECUNDARIA:
PROTECCION DEL MEDIO AMBIENTE

UNIDIRECCIONALIDAD DEL FLUJO DE AIRE
6-12 CAMBIOS DEL VOLUMEN DE
AIRE/HORA
RECEPCION DE
MUESTRA

ANTESALA
SECTOR CSB
DUCTOS DE SALIDA DE CSB, PARA
LOGRAR PRESION NEGATIVA
MATERIAL
CONTAMINADO
AL SECTOR
AUTOCLAVES
DECONTAMINACIÓN Y
ELIMINACIÓN DE RESIDUOS
3. MINIMIZAR LA GENERACIÓN DE
AEROSOLES:
a. Centrífuga
 Centrífuga(s) de seguridad
biológica
(portatubos con tapa y
desmontables)
Preferentemente refrigerada
Los portatubos son cargados y
descargados dentro de la CBS
b. Incinerador de ansas
4. DECONTAMINACIÓN Y ELIMINACIÓN
DE RESIDUOS
Autoclave:  material limpio: 30 minutos a 121ºC,
1 atm
 material sucio: 1 hora a 121ºC, 1 atm
Estufa de esterilización: 2 horas 170 ºC (material de
vidrio limpio)
Olla
a presión :  1 hora
En caso de no contar con
autoclave u olla:
 Lavandina
al 1% :  al resto de las muestras, se
tapa y se deja hasta el día siguiente para
eliminarlo luego como desecho patógeno
5. USO DE DESINFECTANTES:
FENOL 5 %
LAVANDINA
1%
LAVANDINA
1%
(1 + 4 )
LAVANDINA
0.1%
TIEMPO MINIMO
DE CONTACTO
30 MIN
Para muestras y todo lo
que haya estado en
contacto con ellas
(aplicadores y derrames)
Para desinfección de
superficies: mesadas
Desinfección de pisos
EN RESUMEN
El riesgo de infectarse con M. tuberculosis en Laboratorios
de Alto Riesgo puede minimizarse mediante la adopción de
medidas de seguridad que afectan:
 Prácticas
Equipamiento
 Diseños de laboratorios (adecuados al
riesgo)
 Vigilancia de salud
 Entrenamiento

CARGAR
DERIVADOS
POR SIVILA

PRESTACIONES A OTROS SERVICIOS
(centros de salud, otros hospitales, interior,
clínicas privadas, UNILAB, etc):
AÑO 2013: 4.402 estudios realizados
 AÑO 2014: 4.326 estudios realizados


CARGAS EN SIVILA
Cargados por HSMLaboratorio de TB
AÑO
Cargados por otros
nodos como
“derivados”
2013
232
0
2014
202
5