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Química Biológica
Seminario Enzimas
Definición
Son catalizadores biológicos
Principalmente de naturaleza proteíca
Difieren de la actividad de otros catalizadores
Mecanismo de acción
Modelos de acción
Modelo llave-cerradura
Modelo de ajuste inducido
Características de la AE
•
•
•
•
Son termolábiles
Alta eficiencia
Gran especificidad
Están sujetas a una gran variedad de
controles celulares, genéticos y alostéricos.
Clasificación
Según la reacción en la que participan:
• Hidrolasas
• Oxidoreductasas
• Transferasas
• Liasas
• Isomerasas
• Ligasas
Holoenzimas
Cofactor
Proteína +
Coenzima
Efecto de la temperatura
Efecto del pH
Inhibidores
Sustancia que hace disminuir la actividad enzimática,
Esta definición excluye todos aquellos agentes desnaturalizantes
Dos tipos de inhibidores:
I. Isostéricos: ejercen su acción sobre el centro activo
II. Alostéricos: ejercen su acción sobre otra parte de la
molécula.
Los inhibidores isostéricos pueden ser de dos tipos:
1. Inhibidor reversible:
E+I
EI
ES + I
ESI
2. Inhibidor irreversible:
E+I
E’
Inhibición competitiva
Inhibición no competitiva
Parte experimental
Objetivo:
Identificar enzimas a partir de su actividad
especifica.
Lipasa
Cataliza la hidrólisis de los TAG
Es secretada por el páncreas
Lipasa
Sacarasa
Cataliza la hidrólisis de sacarosa
La extraemos de levaduras
20 ml de Acetona
Filtrar y
secar
1 g Levadura
Resuspender
en buffer
Agregar 5 ml de
agua
Centrifugar
Sacarasa
Ensayo de Fehling
Catalasa
Enzima oxidoreductasa hepática
1 g de
higado
+
5 ml de
Peroxido de
hidrogeno
O2
Inhibición enzimática
Inhibición de la GOD por azida de sodio
1 gr. de levadura
50 ml de buffer fosfato de sodio 0.01 M NaCl 0.1.
5 ml de glucosa 10 mM
Inhibición
Rvo de trabajo: GOD, POD, Fenol y 4 aminofenazona
Reacción de identificacion