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Prueba TSI
El Agar-hierro-triple azúcar es un medio de
cultivo. Gracias a su composición es uno de
los medios de cultivo más empleados para la
diferenciación de enterobacterias según:
• Fermenten o no glucosa.
• Fermenten o no lactosa o sacarosa.
• Produzcan o no ácido sulfhídrico.
• Produzcan o no gas.
Correspondientemente las reacciones sobre
agar TSI son:
-Si la bacteria problema fermenta la glucosa,
acidificará el medio haciendo virar a amarillo
el indicador en el fondo del tubo, mientras
que si no es fermentadora de glucosa, el
medio permanecerá de color rojo.
-Si la bacteria problema fermenta lactosa o
sacarosa, acidifica el medio en su superficie
volviéndolo de color amarillo, mientras que si
no lo es, la superficie del medio continuará de
color rojo.
-Si aparece rotura o
desplazamiento del medio,
significa que la bacteria es
productora de gas.
- Si produce ácido sulfhídrico (debido a la
reducción de las sales de hierro), se
presentará un ennegrecimiento del tubo.
Agar Citrato
Esta prueba nos permite diferenciar un grupo de bacterias
que son capaces de crecer con citrato como única fuente
de carbono y sales amónicas inorgánicas como única
fuente de nitrógeno, provocando la alcalinización del
medio.
El medio a utilizar es agar Citrato de Simons, que
contiene citrato de sodio, fosfato de amonio y azul de
bromotimol como indicador de pH.
Sólo las bacterias capaces de metabolizar el citrato podrán
multiplicarse en este medio y liberarán iones amonio lo
que, junto con el metabolismo del citrato, generará una
fuerte basificación del medio que será aparente por un
cambio de color del mismo de verde a azul
Indol
SIM: sulfuro indol movilidad
MIO: movilidad indol ornitina
Principio
El indol es uno de los productos de degradación
metábolica del triptófano.
La prueba del indol se basa en la formación de un
complejo de color rojo cuando el indol reacciona
con el grupo aldehído del pdimetilaminobenzaldehído.
SIM: Sulfuro Indol Movilidad
Determina si un organismo es móvil o inmóvil, si
es capaz de liberar ácido sulfhídrico por
acción enzimática de los aminoácidos que
contienen azufre produciendo una reacción
visible de color negro y por último la
capacidad de desdoblar el indol de la
molécula de triptófano que se evidencia por la
producción de un anillo rojo.
Medio MIO (Movilidad Indol Ornitina)
Este medio como su nombre lo indica sirve para
observar la movilidad, la produccíon de indol y
descarboxilación de la ornitina.
-La movilidad se detectará por la presencia de
turbidez alrededor del punto de inoculación.
- El indol se formará si la bacteria tiene la
capacidad de producir la enzima triptofanasa
que desdoblará el aminoácido triptófano en
indol, ácido pirúvico y amonio. El indol es
incoloro pero al reaccionar con el reactivo de
Kovacs (p-dimetil-aminobenzaldehido) que se
adiciona después de que creció la bacteria,
dará un color rojo violeta.
-Por lo que respecta a la descarboxilación
de la ornitina como el medio tiene
púrpura de bromocresol y una
pequeña cantidad de glucosa cuando
esta se fermenta se produce un color
amarillo en el fondo (ornitina
descarboxilasa negativa), sin embargo
al descarboxilarse la ornitina se
produce putresina la cual es alcalina y
sobrepasa la acidez dada por la
fermentación de las glucosa resultando
en un color morado en el fondo.
Prueba LIA
Prueba de la ureasa:
Fundamento
La prueba determina la capacidad de un
Microorganismo de producir la enzima ureasa, que
hidroliza la urea. En la hidrólisis se produce
amoniaco y CO2 .La formación de amoniaco
alcaliniza el medio y provoca el cambio de pH que
se detecta por el cambio de color.
Resultados
Positivo: cambio de color del agar del naranja
pálido a fucsia.
Negativo: sin cambio de color queda naranja pálido
Gracias…