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Ambientes forestales: la colonización de las puntas de raíz de coníferas por ectomicorrizas (hongos ectomicorrizales) Manual estudiantil Introducción: La supervivencia de las plántulas, a menudo, depende de la presencia de hongos micorrizales. Si la colonización resulta baja (menos del 25% de puntas de raíces examinadas), las micorrizas pueden adquirirse mediante compra en catálogos de jardinería y viveros, y aplicarse al suelo alrededor de las raíces de los árboles. Una punta de raíz que ha sido colonizada por hongos ectomicorrizales (las ectomicorrizas se alimentan de las raíces, y viven en las raíces. Los hongos crecen entre las células de las raíces. Existe otro tipo, las endomicorrizas, que crece dentro de las células de las raíces) aparecerá más gruesa que una punta sin colonizar, y, a menudo, tendrá un color blancuzco en la punta misma de la raíz. Esta área blancuzca es la punta de la fina raíz, y la región más oscura detrás de ésta es la cubierta del tejido fúngico, o mantilla. Las puntas de las raíces colonizadas por ectomicorrizas, con frecuencia, se ramificarán de manera distinta que el resto de la raíz, así que busquen múltiples ramitas, como diminutos árboles de Navidad. Materiales: Barreno de suelo o palita de mano Envase para poner las raíces Ilustraciones de hongos recomendadas (Vean las figuras 1-3 a continuación) Microscopio de disección Pinzas Procedimientos: Formen tres equipos que trabajen experimentos paralelos. Todos juntarán sus resultados. Día # 1 (15 minutos + el tiempo del desplazamiento): Cada equipo seguirá este procedimiento: 1. Recolecten una muestra de suelo utilizando el barreno en la base de la planta, desde la superficie hasta una profundidad de 6 pulgadas, o muestreen el terreno con una palita de mano. Asegúrense de que incluyen una muestra representativa de las raíces de la planta que están estudiando. Conviene recolectar todas las raíces contenidas en la muestra de tierra. 2. Pongan la muestra en un envase debidamente rotulado con la procedencia y el tipo de planta de donde provino. 3. Lleven la muestra al laboratorio. Día # 2 (clase de 50 minutos): 1. Extiendan la tierra sobre una superficie limpia, y extraigan las puntas de raíces con fórceps. Las mejores raíces para este ensayo tendrán, aproximadamente, el diámetro de una hebra o un cordel. 2. Traten de detectar visualmente la presencia de hongos ectomicorrizales. 3. Laven las raíces (con agua destilada), y vuelvan a examinar: esta vez, bajo un microscopio de disección. 4. Traten de determinar cuántos tipos diferentes de hongos encuentran por su apariencia (color, patrón de las ramas). Pueden cotejar fotos de hongos publicadas para identificar diferentes especies (por ej.: vean las figuras 1-3). Registren sus resultados. 5. Registren el número total de puntas de raíz observadas. 6. Registren el número de puntas de raíz que observaron para ser colonizadas. 7. Hallen el porcentaje de puntas de raíz colonizadas dividiendo el número de raíces colonizadas por el número total de raíces observadas, y regístrenlo. 8. Cada grupo deberá compartir sus hallazgos/datos con la clase. 9. Interpreten los resultados, y discútanlos. Las preguntas siguientes están diseñadas para ayudarlos a sacar conclusiones significativas: a. Determinen el alcance de la colonización de hongos ectomicorrizales como un porcentaje de todas las raíces examinadas. b. Discutan lo que encontraron al examinar las raíces, y hagan las recomendaciones pertinentes. Muestra de foto de hongos ectomicorrizales: Figura 1: “Muchas plantas dependen de los hongos para poder extraer los nutrientes del suelo. Las raíces de los árboles (color marrón) se conectan a la estructura micorrizal simbiótica (color blanco brillante) y con las hifas fungales (hebras finas color blanco) 2 radiando hacia al interior del suelo” (Manual de Biología de los Suelos, en línea). Imagen cortesía de: Randy Molina, Oregon State University, Corvallis, Oregon. Figura 2: “Las ectomicorrizas son importantes para la absorción de nutrientes por las raíces de los árboles y las plantas de uva. El hongo no llega a invadir las células de las raíces, pero forma una vaina que penetra entre las células de las plantas. La vaina en esta foto es blanca, pero pueden ser negras, anaranjadas, color de rosa o amarillas” (Manual de Biología de los Suelos, en línea). Imagen cortesía de: USDA, Forest Service, PNW Research Station, Corvallis, Oregon. 3 Ambientes forestales: Colonización de puntas de raíz de coníferas por hongos ectomicorrizales Muestra de Hoja de Datos Equipo #: _____________ Nombres: ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ Nombre del hongo Porcentaje de colonización de hongos EM (muestra total) Observación de muestras de puntas de raíz Dibujo de puntas de raíz y hongos asociados Referencias: Manual de Biología de los Suelos [en línea]. Disponible: soils.usda.gov/sqi/concepts/soil_biology/biology.html. Visto en mayo, 2007. 4