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Proyecto
Un medicamento para la enfermedad de
Parkinson a base de Mucuna pruriens como
alternativa terapéutica.
Autores:
Estudiante de Farmacia: Srta. Nadua Nacul (Tesis de Grado de
Farmacia)
Profesoras: Dra. Silvia L. Debenedetti y Bioq. Silvia C. Bosco
Lugar de Trabajo: Facultad de Ciencias Exactas y NaturalesUniversidad de Belgrano
1
Resumen
La enfermedad de Parkinson (EP) es la segunda enfermedad neurodegenerativa más común en el
mundo. En nuestro país alrededor de 70 mil individuos padecen esta enfermedad. La levodopa (Ldopa) es la principal terapia utilizada en la actualidad para pacientes con EP. Sin embargo muchos
de estos pacientes no pueden acceder al tratamiento diario con levodopa a largo plazo. La Mucuna
pruriens es una planta trepadora originaria de India, invasora en el norte argentino. Sus semillas
han sido utilizadas desde hace más de mil años en la medicina Ayurveda en el tratamiento de una
enfermedad denominada Kampavata (considerada hoy por sus síntomas un sinónimo de
Parkinson). Existen trabajos que indican que la EP podría tratarse con extractos o polvo de las
semillas de Mucuna pruriens, que contiene levodopa natural pudiendo reducir drásticamente el
costo del tratamiento y la progresión de la enfermedad Actualmente se comercializan en distintos
países suplementos dietarios conteniendo extracto o semillas en polvo de Mucuna pruriens. Por
tratarse de un suplemento alimenticio no tiene los controles de seguridad, eficacia y calidad
imprescindibles para ser utilizados en el tratamiento de la EP ni las cantidades apropiadas para el
tratamiento de la EP. Se analizaron por HPLC las semillas en polvo de Mucuna pruriens que
crecen en la prov. de Formosa (Argentina). El contenido en levodopa resulto ser 5.87% p/p. De los
estudios realizados en animales y en humanos surge que el endocarpio de Mucuna pruriens en
una dosis apropiada y/o en combinación con carbidopa justificaría su empleo como materia prima
para la elaboración de un medicamento económico y con menores efectos adversos.
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Agradecimientos
A las Asociaciones sin fines de lucro para los enfermos de Parkinson quienes fueron el motor de
este proyecto:
-al Dr. Daniel Merino presidente de la Fundación Vamos Juntos (Corrientes)
-al Sr. Miguel Salvador López de Parki-Form Asociación Civil Formosa.
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1-Introducción
La enfermedad de Parkinson (EP) es un trastorno neurodegenerativo crónico. Se produce por
la muerte de neuronas de la sustancia negra, que producen dopamina. La dopamina es un
neurotransmisor importante en el circuito de los ganglios basales, cuya función primordial es
el correcto control de los movimientos. Cuando hay una marcada reducción del nivel de
dopamina, se altera la información en el circuito de los ganglios basales y esto se traduce en
temblor, rigidez, lentitud de movimientos e inestabilidad postural, entre otros síntomas. Afecta
tanto a hombres como a mujeres, y más del 70 por ciento de las personas diagnosticadas de
párkinson supera los 65 años de edad. La prevalencia de la EP impacta en alrededor del 1%
de la población de más de 60 años en toda, Australia y América, en algunos países de Asia
es menor de 06%. Se calcula que, en la argentina más de 70 mil personas se encuentran
afectadas y que más de 4 millones de personas en todo el mundo se encuentra afectada por esta
enfermedad. La mayoría de los síntomas motores de la EP pueden ser controlados por drogas;
pero no hay un solo fármaco que sea totalmente eficaz para todos los síntomas. El tratamiento de
elección en la Enfermedad de Parkinson es la levodopa asociada a un inhibidor periférico de la
dopadescarboxilasa (carbidopa y benserazida los más frecuentes).
A pesar de no ser un tratamiento sumamente caro, la terapia con levodopa no es actualmente
sostenible para miles de pacientes con EP con bajos ingresos, debido a la disponibilidad y la
accesibilidad limitada. Desde hace cientos de años se utilizan las semillas de Mucuna pruriens en
medicina Ayurvédica para tratar los síntomas correspondientes a la EP debido a su alta
concentración de Levodopa (estimada en 4-6%). Estudios recientes en animales y humanos
muestran la factibilidad del reemplazo de la levodopa /carbidopa con el polvo de las semillas de
Mucuna pruriens en el tratamiento de la EP.
En el norte argentino la especie Mucuna pruriens crece en forma espontánea. La utilización del
polvo del endocarpio de las semillas constituiría la materia prima para la elaboración de un
medicamento para el tratamiento de la EP como una alternativa más económica y aprovechando
un recurso natural renovable y promoviendo cultivos alternativos en zonas de escasos recursos.
2-Objetivos
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El objetivo de este proyecto es desarrollar un medicamento a partir de semillas de Mucuna
pruriens, como una alternativa más económica y con menores efectos adversos.
Valorar el contenido de levodopa en las semillas de Mucuna pruriens que crece en forma
silvestre en la Prov. de Formosa
Analizar los estudios farmacológicos y clínicos de la bibliografía de manera de establecer
una dosis apropiada para garantizar la seguridad y la eficacia del polvo de las semillas de
Mucuna pruriens.
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3- Antecedentes del proyecto
3.1-Enfermedad de Parkinson
La enfermedad de Parkinson (EP) es una enfermedad neurodegenerativa progresiva, que se
manifiesta clínicamente por temblor, rigidez, inestabilidad postural y bloqueo de la marcha. Se
caracteriza patológicamente por la pérdida de neuronas dopaminergicas de la sustancia nigra pars
compacta que proveen la innervación dopaminérgica del estriado, aunque la muerte neuronal
también ocurre en menor medida en núcleos catecolaminérgicos y serotoninérgicos en el tallo
cerebral, el hipotálamo, algunas regiones de la corteza (neuronas corticales pequeñas) y en el
núcleo basalis de Meynert. (Fahn, 2006). Fue descripta por James Parkinson en 1817 con el
nombre de ―paralisis gigante‖ (Micheli 2006)
Se conocen al menos 15 genes implicados en esta enfermedad y los estudios realizados en
modelos animales de la enfermedad de Parkinson, sugieren que el daño oxidativo y la acumulación
de productos de fosforilación anormal son fenómenos clave en la afectación de la función
dopaminergica (Flores, 2014).
La enfermedad de parkinson ocurre en la adultez media-mayor, generalmente entre los 50 y 80
años de edad, y su frecuencia muestra el nivel más alto entre los 65 y 75 años reduciéndose
significativamente después de los 80 años La incidencia de la enfermedad es de 4,5-19/ 100.000
personas por año y la prevalencia es de 100-200/100.00 personas (de todas las edades), el 1% de
la población mundial se encuentra afectada por la EP. Es decir existen más de 3,2 millones de
personas en el mundo afectadas con la EP y se espera un crecimiento de alrededor del 3% por
año hasta el 2019. Aunque el parkinson se presenta típicamente en edades avanzadas, existen
también formas juveniles. De acuerdo con la edad de inicio de los síntomas, es posible distinguir la
EP juvenil, cuyos primeros síntomas se presentan antes de los 20 años; la EP de inicio temprano
presenta síntomas antes de los 50 años y la EP de inicio tardío, en la mayoría de los casos
idiopática, se manifiesta después de los 50 años de edad. (Pankratz, 1993).
3.1.1- Síntomas (Chana, 2010)
Los pacientes con enfermedad de Parkinson muestran diversos grados de deterioro motor
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
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Temblor: aparece durante el reposo, es involuntario, no se puede controlar y generalmente
disminuye al realizar un movimiento de la parte que presenta el problema. El temblor
desaparece al dormir y aumenta con las emociones
Rigidez: Es una mayor contractura de los músculos.
Problemas de equilibrio: La persona se siente más inestable y puede caer con facilidad.
y una serie de síntomas no motores que incluyen la depresión, la apatía, el deterioro
cognitivo,trastornos del sueño y difunción autonómica. (Chana, 2010).
3.1.2- Tratamiento
La base del tratamiento de la EP es el manejo farmacológico dirigido a la sustitución de la
dopamina. La estrategia terapéutica se basa en la potenciación de la actividad dopaminergica
central, ya sea por via directa (levodopa, agonistas y activadores dopaminergicos) o indirecta
(inhibidores de la monoaminooxidasa [IMAO] y de la catecol-orto-metil-transferasa [COMT]; en
ciertos estadios de la enfermedad se recurre también al bloqueo de la función colinérgica con
anticolinérgicos antimuscarinicos centrales (Flores, 2014. Si bien esto es generalmente eficaz para
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los síntomas motores puede ser complicado en las fluctuaciones motoras y discinesias. Además el
reemplazo de la dopamina puede no ser efectivo o empeorar los síntomas no motores, los cuales
en algunos casos impactan en la calidad de vida más que los síntomas motores. Por este motivo,
no es sorprendente que casi el 40% de los pacientes en EE.UU en el año 2001 estaban usando la
medicina complementaria y alternativa coo opción al tratamiento convencional (Bega y Zadokoff,
2014).
3.2-.Levodopa
Desde su introducción en la medicina a inicios de la década de 1960, la L-3,4- dihidroxifenilalanina
o levodopa se ha convertido en uno de los fármacos más sorprendentes en neurología. La
levodopa (o L-Dopa) es el aminoácido precursor inmediato de la dopamina. La levodopa es la
forma levógira de la 3,4 dihidroxifenilalanina. Se
sintetiza a partir de la L-tirosina por acción de la
tirosinhidroxilasa. La levodopa es un pro fármaco,
que en el organismo se transforma en dopamina
(metabolito activo) cuya deficiencia causa la
enfermedad de Parkinson. Puesto que la dopamina
no atraviesa la barrera hematoencefalica, se
recurre a su aminoácido precursor que la atraviesa
por transporte facilitado (Flores, 2014).
Levodopa: 3,4 dihidroxifenilalanina
3.2.1-Mecanismo de acción: La levodopa difunde a las neuronas y se convierte en dopamina
dentro de las que poseen L-aminoácido aromático- descarboxilasa (LAAD). Esta enzima dentro del
sistema nervioso central se halla presente por lo menos en neuronas dopaminérgicas,
noradrenérgicas y serotoninérgicas. La levodopa se convierte en dopamina intraneural que es
liberada y activa los receptores dopaminérgicos, postsinápticos o presinápticos, situados a su
alrededor. En la EP, las neuronas dopaminérgicas que aun sobreviven, captan la levodopa y tratan
de compensar la actividad perdida. (Flores, 2014).
3.2.2-Acciones Farmacológicas
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Sistema Nervioso Central: La levodopa en la EP mejora la bradicinesia, la rigidez y las
alteraciones de la marcha, actuando menos sobre el temblor (Zappia, 2009).
Aparato Cardiovascular: El aumento de dopamina en en el tronco cerebral puede ser
responsable de la hipotensión postural (Prieto, 1990). A nivel periférico, la activación de
receptores dopaminérgicos inhiben la actividad simpática, pudiendo originar bradicardia
y vasodilatación. Además, en el corazón estimula los receptores beta adrenérgicos,
originando taquicardias y arritmias a dosis elevadas (Flores, 2014).
Aparato gastrointestinal: La administración de levodopa produce anorexia, nauseas y
vomitos, estos se deben a la estimulación de la zona quimiorreceptora gatillo del tronco
del encéfalo, también aparece tolerancia a este fármaco (Velazco, 1988)
Efectos endocrinometabolicos: La levodopa favorece la secreción de hormona del
crecimiento en sujetos normales, pero reduce la secreción en algunos sujetos
agromegalicos, la levodopa inhibe la secreción de prolactina (Fahn, 2004).
La administración conjunta de levodopa con carbidopa o benserazida(inhibidores de la
dopadescarboxilasa), se reduce un 75% la cantidad de levodopa que debe administrarse, aumenta
el tiempo de vida media de la levodopa y además contribuyen a mantener niveles cerebrales mas
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estables. Con esto se consigue una mayor eficacia clínica, que se manifiesta en una acción mas
rápida y mayor número de pacientes beneficiados.
3.2.3-Dosis
La adminstración de levodopa se realiza siempre combinando la levodopa con un inhibidor de la
dopadescarboxilasa (benserazida o carbidopa) en proporciones 10:1 y 4:1 (levodopa/ carbidopa) o
en la proporción 4:1 levodpa/beserazida (Flores, 2014). Las dosis en que se encuentran mg de
levodopa/mg de carbidopa en los medicamentos actualmente utilizados es 100/10, 100/25, 250/25
y los que contienen levodopa/benserazida100/25/mg, 200/50 mg
3.2.4-Características Farmacocinéticas
La levodopa se absorbe principalmente en la parte alta del intestino delgado. El tiempo máximo
varia entre 1 y 2 horas y la concentración máxima es muy variable. Cuando la levodopa no es
administrada junto con carbidopa o benserazida, la biodisponibilidad es del 30% pero cuando se
administran juntas aumenta dos o tres veces. La t1/2de eliminación plasmática es muy rápida, de
alrededor 1 hora, pero el efecto farmacológico depende de la cantidad de dopamina formada y
actuante en el sistema nervioso central (Flores, 2014).
3.2.5-Reacciones adversas
Las reacciones adversas de la levodopa se encuentran ampliamente descriptos (Flores, 2014).
I.
II.
III.
IV.
V.
Digestivas: Se manifiestan por anorexia, nauseas y vomitos debido principalmente a la
acción de la dopamina en la zona quimiorreceptora del área postrema.
Cardiovasculares: Consisten en hipotensión postural o estable y taquicardia auricular y
extrasístoles ventriculares por activación cardiaca.
Discinesias y distonias: Pueden aparecer en las primeras fases del tratamiento, como
consecuencia de un desajuste de dosis.
Fluctuaciones en la respuesta de la sintomatología parkinsoniana: Se trata de la
aparición de bruscas oscilaciones de la sintomatología motórica del paciente, que
sobreviven a partir del segundo o tercer año de tratamiento.
Alteraciones psiquiátricas: Toman la forma de alteraciones del sueño, pesadillas
nocturnas, sueños vividos, seudo alucinaciones, alucinaciones visuales y otros
fenómenos psicóticos de carácter paranoide
3.3-Mucuna pruriens (L.) DC
3.3.1-Taxonomía y descripciones botánicas
Nombre científico: Mucuna pruriens (L.) DC (Fabaceae)
Sinonimias: Stizolobium deeringianum Bort.; S.
aterrimum Piper and Tracey; S. niveum Kuntze.
Nombres comunes: mucuna, poroto terciopelo, poroto
abono, poroto mágico, haba terciopelo, chiporro, velvet
bean, Bengal bean, buffalo bean
Mucuna pruriens
http://www.cnseed.org/mucuna-seed-pruriens.html
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El género Mucuna consta de 100 especies de plantas trepadoras y arbustos, se encuentra en todo
el mundo, en los bosques de las zonas tropicales, especialmente en las regiones tropicales de
África, India y el Caribe. M. pruriens puede alcanzar los 15 metros de longitud. Existen cuatro
variedades botánicas de M. pruriens; M. pruriens var. utilis es la variedad cultivada que no pica, M.
pruriens var. pruriens (―pica pica‖) tiene pelos urticantes que contienen el compuesto irritante
mucunaina, M. pruriens var. hirsuta, de la India, y M. pruriens var. sericophylla, de las Filipinas
(Kumar, 2013). Las principales diferencias entre las especies cultivadas son las características de
la vaina, el color de la semilla y los días de cosecha de la vaina (Lampariello, 2012).
Semillas de diferentes variedades de Mucuna
pruriens (Brunner, 2011)
http://easyayurveda.blogspot.com.ar/2012
/12/kevanch-mucuna-pruriens.html
La planta de Mucuna pruriens está casi cubierta completamente de
pelos difusos cuando son jóvenes pero libre de pelos cuando se
hacen mayores. Las hojas son trifoliadas, alternas o en espiral, los
peciolos son largos y sedosos 6,3 a 11.3 cm. Las flores son de color
violeta, blanco o lavanda (Kavitha 2014). La cáscara es muy peluda
y puede contener hasta siete semillas. Las semillas son aplanadas 1
a 1,9cm de largo y 0.8 a 1,3cm de ancho, las vainas de las semillas
están cubiertas por pelos color naranja que causan picazón al entrar
en contacto con la piel, los compuestos responsables de la picazón
son la mucunaina y la serotonina. Las semillas pueden ser de color
negra, blanca, rojiza, marrón y tienen un hilo levantado (Kumar, 2013).
3.3.2- Cultivo
La especie Mucuna pruriens crece en pleno sol y con abundantes lluvias (1000 a 2500 mm) al
año. También puede crecer en lugares áridos con 400 mm de precipitación, adaptándose a
muchos tipos de suelos como ácidos y de baja fertilidad. Para tener buenos resultados, las semillas
deben ser sembradas a 2,5 cm de profundidad, con una distancia entre 30 o 90 cm de distancia
entre plantas. La germinación tarda entre 14 y 21 días, el crecimiento inicial es lento pero luego se
vuelve rápido. M. pruriens se puede sembrar sola, como abono o se puede intercalar con otros
cultivos como maíz y sorgo. Crece en altitudes de hasta 2100 metros, la temperatura es de 19 a 27
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°C y no tolera heladas. Es una planta muy resistente que tiene pocos problemas de plagas,
posiblemente debido al contenido de toxinas en su follaje. La producción de semillas del frijol
terciopelo es relativamente fácil debido a la ausencia de plagas, la facilidad de la cosecha de las
vainas y los altos rendimientos. Las flores son autopolinizadas, lo que disminuye
considerablemente la posibilidad de la polinización cruzada (Brunner, 2012).
3.3.3- Historia y usos tradicionales
El síndrome clínico de parkinson fue identificado en la antigua India antes del periodo de Cristo.
Existen evidencias que prueban que en el año 300 aC, Charaka propone una visión coherente de
la EP describiendo temblor, rigidez, bradicinesia, y trastornos de la marcha como sus síntomas
principales. En el siglo 15 "Bhasava Rajyam" introdujo el término Kampavata para una enfermedad
por cuyos síntomas de la es considerado como un análogo ayurvédico de la enfermedad de
Parkinson. El elemento esencial en la terapia fue la administración de las semillas en polvo de
Mucuna pruriens, llamadas Atmagupta, que según hoy se conoce, contiene elevadas cantidades
de levodopa (Ovallath y Deepa, 2013). En 1937, investigadores de India aislaron levodopa de las
semillas de Atmagupta. Posteriormente en 1978, fue confirmado el efecto de Atmagupta en la EP
mediante estudios controlados. Así mismo en Ayurveda fueron reconocidos sus efectos tóxicos que
incluían dolores de cabeza, distonía, fatiga, temblores, sincope y sed.
Todas las partes de mucuna poseen propiedades medicinales y han sido investigadas en
diferentes actividades incluyendo antidiabéticas, afrodisíacas, antineoplásicas, antiepilépticas y
antimicrobianas, asi mismo ha demostrado actividad neuropropectora, antiinflamatoria y analgésica
(Oudhia 2001, Lampariello y col, 2012). Las raíces de Mucuna pruriens se utilizaron en la medicina
ayurvédica como termogénicas, antihelmínticas, emolientes, afrodisíacas, estimulantes, purgantes,
febrífugas, tónicas, (Oudhia 2001; Katzenschlager et al., 2004). Las hojas son populares y son
útiles en ulceras e inflamación. Los pelos (tricomas) de las vainas son usados como vermífugos y
mezclados con la miel eran utilizados como antihelmínticos (Sastry, 1990). Las semillas como
astringentes, laxante, afrodisiaco, antioxidante y se encontró también que tiene propiedades
antidepresivas para trastornos neurológicos, tuberculosis y ulceras (Oudhia, 2001; Katzenschlager
et al., 2004). En la antigüedad, se consumían semillas de Mucuna pruriens para protegerse de la
mordedura de distintas serpientes durante años, eran utilizadas para el tratamiento del Parkinson,
y como analgésico y antidiabético (Houghton, 1994).
3.3.4-Usos actuales
Las semillas secas se pueden comer después de remojarlas en agua 24-48 horas, y luego
cocinarlas cambiando el agua varias veces para reducir el contenido de compuestos tóxicos y
antinutrientes (Kumar, 2016). Las hojas de Mucuna pruriens son utilizadas también como forraje y
abono verde ya que aporta materia orgánica y nitrógeno al suelo. Las semillas tostadas se usan
como sustituto del café en Guatemala y México (Kavitha 2014).
Existe un sinnúmero de suplementos dietarios conteniendo extracto o polvo de las semillas de
Mucuna pruriens. En países como Inglaterra, Estados Unidos, India, Francia y Tailandia, éstos se
comercializan en forma de cápsulas o comprimidos conteniendo de 200 a 750mg. Soumyanath y
col en 2012 analizaron el contenido de 6 productos en mercado por HPLC, concluyendo que existe
una gran discrepancia entre lo declarado en la etiqueta y el contenido de L–Dopa. Todos los
productos existentes actualmente en el mercado no tienen registro de medicamento sino de
suplemento dietario. Por estar registrados como suplementos dietarios son considerados
alimentos, y no se le exige a los elaboradores para su registro controles de calidad, valoración del
principio activo, ni ausencia de toxicidad. Por otra parte no pueden hacer referencia a tratamiento
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de enfermedades ni a dosis terapéutica, dado que su utilización es para personas sanas con
carencias alimentarias. Se los promociona para disfunciones sexuales, como bloqueante de la
prolactina incrementando los niveles de testosterona, antioxidante y como mejoradores de la
capacidad mental.
3.3.5-Componentes nutricionales en semillas de Mucuna pruriensl
Siddhuraju y col. en 1996 y Kala y Mohan en 2010 investigaron la composición de nutrientes de
las semillas de Mucuna pruriens. Estos autores reportan que las semillas maduras contienen:
Proteína cruda: 314,4 g/kg (Siddhuraju y col, 1996 y Kala y Mohan, 2010)
Fibras dietarias: 51,6 g/kg (Siddhuraju y col, 1996); 85,6±0.5 g/kg).
Lipidos totales 67,3 g/kg (Siddhuraju y col, 1996); 87.4±0.7 g/kg (Kala y Mohan, 2010);
Carbohidratos: 525,6 g/kg (Siddhuraju y col, 1996)
El valor calórico contenido en 100 g de semillas es de 1641.78 kJ (Kala y Mohan 2010). Lo que
según Hinz y col, 2011 puede colaborar en contrarrestar la pérdida de peso corporal observada en
los pacientes con EP.
También se registraron altas concentraciones de potasio, calcio, fosforo y magnesio, asi como
vitaminas niaciana y ácido ascórbico (Siddhuraju y col, 1996; Kala y Mohan, 2010);Las globulinas
y albuminas constituyen las principales proteínas de reserva (22,7 g y 100 g de harina de semillas).
Los ácidos oleico y linoleico constituyen los ácidos grasos predominantes (65,5 %) junto con el
ácido palmítico (20,16%). (Siddhuraju, 1996).
Se identificaron 19 aminoácidos en las semillas de Mucuna y el contenido total de aminoácidos se
encuentra dentro de los valores de ingesta recomendados por la FAO (Misra y Wagner, 2007).
Según Kala y Mohan (2010) en términos de g/100 g se encontraron: ácido glutámico -11,60; ácido
aspártico-13.28; serina –4,54; treonina -3,54; prolina–3,09; alanina–4,16; glygcine–5,22; valina–
3,63; Cystine–1,11; Metionina–0,78; Isoleucina–6,68; Leucina–5,24; Tirosina–3,31; fenilalanina–
4,03; lisine–5,20; histidine–2,94; triptofano–1, 01; y arginina–6,74.. La metionina y la cisteína son
los aminoácidos limitantes en la mayoría de las especies de M. pruriens (Chaparro, 2009).
10
Es conocido que en los pacientes con EP tienen bajos niveles de actividad de la tirosina
hidroxilasa, y que la administración de levodopa conduce al agotamiento de L-tirosina, L-ttriptofano,
serotonina, aminoácidos azufrados como glutatión y S-adenosinmetionina Por otra parte se ha
observado deficiencias de varios aminoácidos en pacientes que reciben levodopa. La levodopa
inhibe la absorción de tirosina, fenilalanina y triptófano. Esta deficiencia puede ser debida a la
reducción de la ingesta o a una reducción de conversión enzimática de la fenilalanina Asi mismo
los pacientes con EP pueden tener disminuida la capacidad para utilizar L-tirosina (Kasture y col,
2013).
Los componentes llamados antinutricionales más importantes de las especies de Mucuna son la Ldopa (3-6%), taninos (0.03-0.07%) y fenoles (4-7%) principalmente, e inhibidores de proteasas,
lectinas y ácido fítico (Chaparro, 2009).
3.3.6-Mucuna pruriens en el tratamiento de la enfermedad de Parkinson
Varios estudios en animales y humanos demuestran la eficacia del polvo o de los extractos de las
semillas de Mucuna pruriens (MP) en el tratamiento de la enfermedad de Parkinson.
En el año 1978 Vaidya y col trataron con el polvo de la semillas de MP a pacientes con
enfermedad de Parkinson. Los resultados mostraron que comparados con los tratados con L-Dopa
sintética disminuía la incidencias de efectos adversos.
Se demostró una menor incidencia de efectos adversos en pacientes tratados con polvo de
semillas enteras de Mucuna pruriens (4.02% de L-Dopa) que con L-Dopa comercial. Ensayos más
recientes muestran una mejoría en la sintomatología de la EP en 60 pacientes tratados con el
polvo del endocarpio de MP (5.28% de L-Dopa). Basados en estos trabajos se investigó en
animales el efecto a largo plazo (52 días consecutivos) de MP en neurotransmisores
monoaminérgicos determinando que la administración oral del endocarpio de MP produce efectos
significativos en el contenido de dopamina en la corteza cerebral sin efectos significativos en
levodopa, norepinefrina o dopamina, serotonina y sus metabolitos en la vía nigroestriada.
Concluyen que esto sugiere que los efectos antoparkinsonianos pueden deberse a otros
componentes de MP o a la exaltación de los efectos de la levodopa (Hussain y Manyam, 1997;
Manyam y col., 2004).).
Estudios previos han demostrado un efecto farmacocinético similar en la administración de
endocarpio de MP en comparación con levodopa/ carbidopa (Manyam y col., 1996). Por otra parte
el endocarpio de MP no tiene efectos tóxicos agudos o crónicos significativos en animales y la
fase II en ensayos clínicos en humanos ha mostrado la eficacia de un producto llamado HP-200
(elaborado con el endocarpio de semillas de MP) en pacientes con EP (Hussain y Bala, 1997).
Katzenschlager, y col en 2004 llevaron adelante un estudio doble ciego con el objeto de
determinar si una formulación de polvo de semillas de mucuna tenían un efecto antiparkinsoniano
comparable o superior respecto a la L-Dopa sintética. Los resultados muestran que 30g de la
preparación de mucuna, llevaron a un inicio del efecto mucho más rápido comparado con el
estándar de levodopa/carbidopa. El inicio de acción rápida y de larga duración sugieren que el
polvo de MP es una fuente natural de levodopa, y se justifica la eficacia y tolerabilidad a largo plazo
en un estudio aleatorizado y controlado.
11
El trabajo de recopilación de datos sobre estudios clínicos y preclínicos de Kasture y col en 2013
muestra la eficacia y seguridad de la utilización de las semillas de Mucuna pruriens en la EP y hay
indicios de que es más eficaz que la levodopa en la reducción de las discinesias. Describen varios
componentes de las semillas, en el contexto de utilidad terapéutica en el tratamiento de la
enfermedad de Parkinson como la genisteína (como inhibidor de la decarboxilación periférica de la
levodopa), el ácido gálico, ácidos grasos insaturados (ác. esteárico y ác. oleico), ácidos grasos
saturados (ác. palmítico), alcaloides derivados de la beta carbolina (harmina), otros alcaloides
como la nicotina y bufotenina la lecitina, etc. por poseer actividad antioxidante y/o neuroprotectora
colaboran con la actividad anti EP de la levodopa. El uso prolongado de la levodopa conduce a
discinecias, toxicidad y disminución de la eficacia. Y dado que el tratamiento convencional de la EP
usando levodopa con otros fármacos complementarios es muy costoso y las semillas de Mucuna
se encuentran fácilmente disponibles y económicas, los autores sugieren que el uso del polvo o
extractos estandarizados de semillas de Mucuna puede reducir drásticamente el costo de
tratamiento así como la progresión de la enfermedad.
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4- Primera Etapa del Proyecto
4.1.Materiales y Métodos
4.1.1- Material Vegetal: Las semillas de Mucuna pruriens son procedentes de cultivos de la
provincia de Formosa provistos por el Ing. Miguel S. López del Grupo Parki-Form Asociación Civil
Formosa
. Planta cultivada de mucuna
Frutos no maduros
Planta de mucuna con frutos.
Fotos provistas por el Ing. Miguel S. López:
Las semillas fueron molidas para la preparación de la muestra.
4.1.2-Estándar de trabajo: El estándar de L-DOPA (Sigma) fue proporcionado por el laboratorio
de análisis instrumental de la Universidad de Belgrano.
4.1.3-Equipos y materiales:
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
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HPLC, marca Shimadzu Prominence con bomba LC-AT; detector UV-VISIBLE con arreglo
de diodos SPD-M 20 A; horno de la columna CTO-10ASVP; inyector Rheodyne y un
software LCSolutions para el manejo de datos.
Balanza analítica, marca Shimadzu, modelo AUW 220D. (0.001mg)
Centrifuga, marca Rolco, modelo 2036, serie 29205.
Sonicador, marca Branson, modelo 3510E-MHT, serie EMB08101099H.
Columna Kinetex, C18, 264 100 A (Phenomenex).
Acetonitrilo (Sintorgan). Calidad HPLC. Lote N° 32279. Titulo 99,5%
13



Ácido fórmico. (Cicarelli). Calidad pro análisis. Lote N° 34412. Titulo 85%
Hidróxido de amonio (Anedra). Calidad reactivo analítico. Lote N° 23396-2. Titulo (como
NH3) 26,8% p/p.
Agua calidad HPLC.
4.1.4-Valoración del contenido de levodopa por HPLC
Sistema cromatográfico (Hasegawa y col, 2011)






Columna: Columna Kinetex, C18, 264 100 A (Phenomenex).
Fase Móvil: 10 mMoles/L de buffer formiato de amonio pH=3,5/Acetonitrilo (3:7).
Detección: 280nm.
Flujo: 1ml/min.
Temperatura del horno: 40°C.
Volumen de inyección: 20ul.
-Preparación de las soluciones (Hasegawa y col, 2011)
Fase móvil: se miden en una bureta 70 ml de acetonitrilo y 30 ml de buffer de formiato de amonio
pH=3,5, agitar y transferir al recipiente de fase móvil.
Buffer de formiato de amonio: Para preparar 10mMoles de buffer de formiato de amonio
pH=3,5: Se miden 37,70 ml de ácido fórmico y 39,8 ml de hidróxido de amonio, y se lleva a
volumen (1 L) con agua calidad HPLC. Se toman 10 ml de esta solución y se añade agua
hasta los 950 ml, medir y ajustar el pH al deseado. Llevar a volumen con agua calidad HPLC
(1 L).
-Preparación de la solución estándar (Hasegawa y col, 2011): La solución estándar o patrón
(1000 ug/ml) se preparó pesando 20 mg de L-dopa y diluyéndola en 20 ml de
acetonitrilo/agua/ácido fórmico (50: 50: 1). Se midió 1ml de esta solución y se llevó a volumen con
acetonitrilo/agua/ácido fórmico (50: 50: 1) en un matraz aforado de 10ml.
-Preparación de las muestras (Hasegawa y col, 2011): Las semillas de Mucuna pruriens fueron
pulverizadas usando un molinillo hasta obtener un polvo fino. Se pesaron 100 mg del polvo, se
transfirió a un matraz aforado de 5ml y se llevó a volumen con acetonitrilo/agua/ácido fórmico (50:
50: 1). Esta mezcla se sónico durante 15 minutos y luego se centrifugo 10 minutos. El
sobrenadante fue transferido a un matraz aforado de 20 ml, el precipitado fue re extraído con 5ml
de acetonitrilo/agua/acido fórmico (50: 50: 1) y centrifugado en las mismas condiciones. Los
sobrenadantes de las dos extracciones se combinaron en un matraz aforado de 20 ml y se llevó a
volumen con acetonitrilo/agua/ácido fórmico (50: 50: 1). La solución fue filtrada por filtros de 0.45
um. 1ml de esta solución se llevó a volumen en un matraz aforado de 10 ml con
acetonitrilo/agua/ácido fórmico (50: 50: 1).
-Procedimiento: La cuantificación se realizó por el método del Standard Externo. Para esto se
inyectaron duplicados de la solución testigo por duplicado, registrando el cromatograma a 280nm.
La muestra se preparó por duplicado y se inyecto dos veces, registrando el cromatograma a
280nm. Se identificó la L-dopa comparándolo con el tiempo de retención de la sustancia de
referencia.
4.1.3-Validación del método
14
El método de HPLC utilizado para la determinación de L-dopa se validó siguiendo las normas
establecidas por la ICH (International Committee of Harmonization). Se validaron los siguientes
criterios: linealidad, límite de detección y límite de cuantificación.


Linealidad: Se determinó analizando 5 diluciones de la solución patrón de 1000 ug/ml, en
un rango de 0,1 a 1000 ug/ml. Esto se hizo por duplicado. La linealidad se evaluó
calculando el coeficiente de regresión R2 de un gráfico de áreas obtenidas en función de la
concentración.
Límite de detección y límite de cuantificación: Basandose en una estimación del límite
de detección= 3 veces el ruido y el límite de cuantificación=10 veces el ruido, se preparo
una muestra de Mucuna pruriens con la concentración calculada de L-dopa para calcular
su detectibilidad y su cuantificación.
4.1.4. Análisis de la pureza del pico a valorar en la muestra de mucuna: Se analizó la pureza
del pico de levodopa presente en la muestra preparada con las semillas de mucuna a diferentes
long de onda.
4.1.5- Análisis de la bibliografía: Se revisaron las bases de datos PubMed, Science Direct,
Cochrane y datos de la web para las palabras claves Mucuna pruriens y Parkinson´s. Los artículos
de interés fueron bajados en forma de texto completo.
4.2. Resultados de la 1era etapa del proyecto
4.2.1-Validación del método: El método es lineal con un valor de regresión lineal (R2) = 0,9991,
en las concentraciones de 0,1 – 1000 ug/ml.
El límite de detección calculado como 3 veces el ruido, resulto ser de 0,15 ug/ml y el límite de
cuantificación calculado como 10 veces el ruido fue de 0,5 ug/ml.
4.2.2-Valoración de L-dopa en muestras de semillas de Mucuna pruriens
Las Fig A y B muestran los cromatogramas obtenidos con el estndar de levodopa (100ug/ml) y con
la muestra preparada a partir de las semillas de Mucuna pruriens recogida en la provincia de
Formosa,
Argentina.
15
Área y tiempo de retención:
Área
Estandar de levodopa
1230925
Muestra de semillas de
Mucuna pruriens
359642
Tiempo de retención
(minutos)
2,228
2,216
El análisis de pureza del pico (tr 2,216) de la muestra de mucuna a diferentes longitudes de onda
muestra que el pico contiene un único compuesto y es factible de ser valorado
Teniendo en cuenta los parámetros: área del estándar, área de la muestra, y las diluciones
realizadas durante el procedimiento de extracción, se determino la cantidad de levodopa en la
muestra de Mucuna pruriens correspondiendo a un 5,87%.
4.2.3-Revisión bibliográfica De la revisión de las bases de datos PubMed, Science Direct,
Cochrane, y datos de la web para las palabras claves Mucuna pruriens y Parkinson´s, Parkinson y
Mucuna. Se obtuvieron 39 resultados en PubMed; 0 en Cochrene y 189 resultados en
ScienceDirect. Los artículos de interés fueron bajados en texto completo. La información obtenida
de los correspondientes a ensayos en humanos se tomaron como referencia para los cálculos de
equivalencia de g de polvo de semilla de Mucuna pruriens vs L-Dopa/carbidopa.
4.3-Discusión de los datos obtenidos en la 1era etapa del proyecto
Los resultados indican que las semillas de Mucuna pruriens (MP) recogidas en la Prov de Formosa
contienen una cantidad de levodopa (5,8% % p/p) acorde a los datos de bibliografía para esta
especie en otras partes del mundo. El análisis bibliográfico de los ensayos clínicos en humanos
evaluando los efectos clínicos y farmacocinéticos, señalan que las semillas molidas de MP son
eficaces en el tratamiento de la enfermedad de Parkinson y que una dosis de 30 g de semillas
molidas equivaldrían a una dosis de 200/50 mg de levodopa/carbidopa. El inicio de acción rápida y
de larga duración sugiere que el polvo de MP es una fuente natural de levodopa, y se justifica la
eficacia y tolerabilidad a largo plazo.
De acuerdo con datos recientes de la bibliografía, esta dosis de 30 gr podría reducirse si se
combina con semillas de soja. La administración de soja incrementa la biodisponibilidad de la
levodopa y suprime su degradación através del COMT, además tiene efectos favorables en las
complicaciones motoras que ocurren con la administración de levodopa (Nagashima y col., 2016).
Asi mismo la ausencia de toxicidad en ratones y conejos y el uso de cientos de años de de esta
especie en el tratamiento de los síntomas de la enfermedad de Parkinson (EP) avalan la seguridad
de su ingesta.
En la actualidad se comercializan en el mundo numerosos suplementos dietarios a base de
semillas molidas de Mucuna pruriens o de sus extractos. El hecho de que se encuentren
registrados como alimentos, implica la prohibición desde los Organismos de Control (EMEA, FDA)
de poner indicaciones para el tratamiento de enfermedades. Por este motivo se los promociona
con otros fines como antioxidantes, antienvejecimiento, para las disfunciones sexuales, como
16
antiestres, coadyuvante en el síndrome metabólico, etc. En la mayoría de los casos promocionan
en sus páginas web su actividad en la disminución de los síntomas de la EP. Los comprimidos o
cápsulas suelen contener cantidades variables desde 200mg a 750 mg de polvo o de extracto de
semillas de Mucuna pruriens. A la luz de los trabajos de investigación analizados (ensayos clínicos,
de biodisponibilidad y farmacocinética) sobre el tratamiento con semillas de MP, estas ―dosis‖ son
totalmente ineficaces, con el riesgo de interaccionar con otros medicamentos. La ausencia de
control de calidad en cuanto al contenido de principio activo es otra característica de los
suplementos dietarios, lo que empaña más el uso en una enfermedad por demás delicada y de
tratamiento continuo.
Así mismo, tanto los suplementos como las semillas y el polvo de la semillas puede adquirirse
libremente en internet recurriendo a lo publicado en la web para sus indicaciones o tratamiento. Es
cierto también que muchas personas de bajos recursos o aquellas con excesivos efectos adversos
al tratamiento convencional, intentan recurrir a las semillas o al polvo de las semillas en búqueda
de tratamientos más económicos o mejor calidad de vida.
Ninguna de estas formas antes mencionadas de automedicación contribuye al tratamiento de la
EP. Para conseguir una eficacia terapéutica con un producto seguro debe existir un medicamento
de manejo farmacéutico y un médico que recomiende la dosis y evalúe eficacia terapéutica y
efectos adversos. Hasta el momento no hay medicamentos en el mundo con Mucuna pruriens que
le aseguren al paciente un tratamiento adecuado a la patología de la EP.
4.4-Conclusiones y propuestas para la etapa final del proyecto
Existe una clara necesidad de nuevos tratamientos para la EP tanto para mejorar los síntomas y
efectos adversos como para sostener los tratamientos en personas de bajos recursos. Atendiendo
a la duración y el costo del tratamiento con levodopa/carbidopa o
benserazida proponemos un medicamento a base de polvo de
semillas de Mucuna pruriens con una dosis de 30g con seguridad
y calidad controladas. El volumen que ocupa estos 30g hace que
no sea posible darle una forma farmacéutica de comprimido o
cápsulas (pueden llegar a 600-900 mg para extractos de origen
vegetal). Se podrían presentar en sobrecitos termosellados
(preservados de la humedad y luz) para ser ingerido con agua o
algunos jugos.
Nuestra propuesta se encuentra basada en nuestro trabajo de
investigación y en la bibliografía consultada.
La especie Mucuna pruriens es una planta invasora de fácil acceso y reproducción, se desarrolla
en forma silvestre en Argentina en la provincia de Formosa por lo que puede ser fácilmente
cultivable. Esta característica hace que el proyecto tenga además características aplicables al
desarrollo social en áreas desfavorables como sería el cultivo y la producción de la especie, la
recolección de las semillas y su comercialización a laboratorios, dando impulso a productores
locales y constituyendo núcleos socio productivos estratégicos
17
5. Propuestas para la segunda etapa del proyecto
Basados en los resultados obtenidos en la 1era etapa del proyecto es factible la elaboración de un
medicamento a base del polvo de las semillas de Mucuna pruriens cultivada en Argentina.
Proponemos para esta segunda etapa:
1-Valorar el contenido de levodopa en el endocarpio de las semillas de Mucuna pruriens tostadas
luego de retirar el tegumento (epicarpio).
2-Desarrollar una monografía de control de calidad de producto final para ser presentada para su
registro en ANMAT como Medicamento Herbario de uso tradicional.
3- Consolidar las relaciones establecidas con las Asociaciones sin fines de lucro de los enfermos
de Parkinson: Grupo Parki-Form Asociación Civil Formosa através de su presidente Miguel
Salvador López y Fundación Vamos Juntos (Corrientes) através de su presidente Dr. Daniel
Merino quienes impulsaron este proyecto.
4-Corroborar la equivalencia de dosis propuesta del polvo de semillas de Mucuna pruriens con las
dosis utilizadas de levodopa/carbidopa en ensayos clínicos sobre el producto terminado. Para esto
se cuenta con la colaboración del Dr. Rodolfo Rey director del CEDIE Centro de Investigaciones
Endocrinológicas ―Dr. César Bergadá‖.
5-Establecer contactos con laboratorios para la elaboración y comercialización del medicamento
elaborado con polvo del endocarpio de semillas de Mucuna pruriens
18
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