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PROYECTO AL15-PID-37 TÍTULO: Análisis funcional de sistemas de secreción d e tipo
III y de tipo VI de bacterias endosimbiontes asociadas a
pallar y frijol
PARTICIPANTES:
- Universidad Politécnica de Madrid, España
Responsable: Luis Rey Navarro
Profesor Titular de Universidad
Participantes: Tomás Ruiz-Argüeso
Catedrático de Universidad
José Manuel Palacios Alberti Catedrático de Universidad
David Duran Wendt
Becario predoctoral
Alba Pacheco Moreno
Estudiante Trabajo Fin de Carrera
Dirección
Universidad Politécnica de Madrid , Centro de Biotecnología y Genómica de
Plantas , Campus de Montegancedo , Autovía M-40, Km 38 , 28223 Pozuelo
de Alarcón (Madrid)
Teléfono:
34-91-3364570
Fax:
34-91-7157721
Contacto:
luis.rey@upm.es
http://www.cbgp.upm.es/en/pagina_personal.php?x=1405
- Universidad Agraria La Molina, Lima, Perú,
Reponsable: Ernesto Ormeño Orrillo
Investigador postdoctoral
Dirección
Apartado 12-056, Lima – Perú. Pabellón Rectorado, 2do. piso.
Teléfono:
Fax:
Contacto:
(51-1) 614-7112 - 614-7110
(51-1) 614-7111
teseron@hotmail.com
- Centro de Ciencias Genómicas. Universidad Autónoma Nacional de
México, Cuernavaca, México
Responsable: Esperanza Martínez Romero
Investigador Titular
Dirección
Centro de Ciencias Genómicas, Universidad Nacional Autónoma de México,
Apdo. Postal 565-A, Cuernavaca, Morelos, México
Teléfono:
Fax:
Contacto:
527773131697
527773175581
emartine@ccg.unam.mx
Simbiosis Rhizobium /leguminosa-Sistemas de
secreción rizobianos!
Nódulos
de
guisante(
Planta de guisante!
Nódulo con
bacteroides
fluorescentes(
bacteroides
fluorescentes(
Sistema de secreción de
proteínas tipo VI (T6SS)(
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OBJETIVOS DEL PROYECTO
Conocer el papel de los sistemas de secreción tipo III en la simbiosis
Bradyrhizobium icense LMTR13 y B. paxllaeri LMTR21 con Phaseolus lunatus.
Conocer el papel de los sistemas de secreción tipo VI en las simbiosis Rhizobium
etli Mim1 y Rhizobium phaseoli Ch24-10 con Phaseolus vulgaris
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
- Objetivo 1. Análisis funcional de T3SS y T6SS en la simbiosis con judías
La importancia del T3SS/T6SS de estas bacterias se valorará a través del
comportamiento de cepas mutantes deficientes en los genes estructurales al
inocular judías (Phaseolus spp ) y otras leguminosas.
- Objetivo 2. Análisis de la expresión de los T3SS y T6SS.
Para conocer las condiciones que regulan la expresión del los T3SS/T6SS se
obtendrán fusiones de posibles regiones promotoras con un gen delator como
lacZ/gusA o se realizarán técnicas de qRT-PCR que permiten cuantificar la
expresión de diferentes genes en diferentes condiciones.
Para este propósito, en el caso del T6SS, también utilizaremos anticuerpos contra
una proteína, Hcp, que es parte de la nanojeringa que constituye el sistema y cuya
presencia se ha demostrado en otras bacterias que se corresponde con la
expresión de T6SS (Wu et al., 2012. PLOS Pathogens 8: Issue 9 e1002938, pp119). En estos momentos estamos preparando la sobreexpresión de Hcp en E. coli
para su purificación y posterior inoculación en conejo.
COMPARACIÓN DE ESTRUCTURA DEL FAGO T4 (A) Y T6SS (B)
Records 2011 Records, A (2011) MPMI Vol. 24, No. 7, 2011, pp. 751–757.
doi:10.1094/MPMI -11-10-0262. © 2011 The American Phytopathological Society
Organización génica T6SS en B.canariense ISLU101
hcp
clpV
impA
impB
impD
impC
impF
impS
impI
impJ
impK
impL
impN
impM
vgrG
Gen hcp
Organización génica T6SS en R.etli Mim1