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Pruebas confirmatorias de
Errores Innatos del
metabolismo.
Olga Y. Echeverri. Bact. cPhD.
Instituto de Errores Innatos del Metabolismo
Pontificia Universidad Javeriana
Bogotá.
Error Innato del Metabolismo
Los Errores Innatos del Metabolismo (EIM)
son enfermedades monogénicas. En las
cuales la alteración de un gen produce un
defecto, que conduce ya sea de manera
directa o indirecta a alteraciones
bioquímicas características
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Olga Y. Echeverri P.
Noviembre. 2013
Aproximación diagnóstica
de los EIM
A
B
C
F
G
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D
E
Aproximación diagnóstica
de los EIM
A
B
F
D
C
G
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•
•
•
•
•
E
Sustrato
Producto
Metabolitos Secundarios
Enzima
Mutación
Abordaje diagnóstico
específico para EIM
Tiempo
Sensibilidad
Especificidad
Prenatal
Diagnóstico
EIM
Sintomático
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Neonatal
Abordaje diagnóstico específico para
EIM -- Neonatal
Sustrato / Metabolitos secundarios
MOLECULAS PEQUEÑAS
TAMIZAJE
MS/MS
≈50 enfermedades
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CONFIRMACION
Abordaje diagnóstico específico para
EIM
Molécula Pequeña
• Aminoacidopatías
• Acidemias Orgánicas
• Defectos de monosacáridos
Macromoleculas
• Glucogenosis
• Enfermedades de Deposito Lisosomal (MPS,
Esfingolipidosis)
Otras
• Peroxisomales
• Mitocondriales
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MOLECULAS PEQUEÑAS
Cualitativas
Sustrato – Metabolitos secundarios
• Colorimétricas
• Cromatográfia
Cuantitativas
Sustrato – Metabolitos secundarios - Enzima
• Cromatografías
• Determinaciones enzimáticas
Molecular
• Mutaciones específicas
• Secuenciación del gen
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AMINOACIDOPATIAS
Metabolitos
Secundarios
• Colorimétricas en Orina (Cualitativas)
• Cromatografía en Capa Fina (Cualitativo).
• Cromatografía Líquida de Alta Resolución
Sustrato
(HPLC). (Cuantitativo. Hasta 42
metabolitos)
• MS-MS (Cuantitativo)
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Cromatograma – Estandar de aminoácidos- Biochrom30+
ACIDEMIAS ORGÁNICAS
Metabolitos
Secundarios
Sustrato
• MS/MS (Cuantitativo)
• GC-MS (Cualitativo o Cuantitativo)
• GC-MS (Cualitativo o Cuantitativo)
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Perfil de ácidos orgánicos en el
diagnóstico de AO
Incrementos
Metabolitos anormales
>100 casos
confirmados
GALACTOSEMIA
Metabolitos
Secundarios
Sustrato
• GC-MS (Cualitativo o Cuantitativo)
• Pruebas Colorimétricas en orina (Cualitativo)
• Cromatografía en Capa Fina (Cualitativo)
• GALT (Cuantitativo)
Enzima
• GALK (Cuantitativo)
• GALE (Cuantitativo)
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MACROMOLECULAS
Sustrato
• Histológico
• Bioquímico
Enzima
• Determinaciones enzimáticas
Molecular
• Mutaciones específicas
• Secuenciación del gen
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GLUCOGENOSIS
• Tinción PAS (Cualitativo)
Sustrato
• Glucógeno (Cuantitativo)
• Estructura de Glucógeno (Cualitativo)
Enzima
• Tipo I, II (Cuantitativo)
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MUCOPOLISACARIDOSIS
• GAG urinarios (Cualitativo - Cuantitativo)
Sustrato
• Electroforesis – Cromatografía
(Cualitativo)
• Tipo I, II, IV, VI, VII (Cuantitativo en
Enzima
célula)
• Tipo I, II, IV, VI, VII (Cuantitativo en DBS)
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ESFINGOLIPIDOSIS
• Acúmulo celular (Cualitativo)
Sustrato
• Pruebas Colorimétricas (Cuantitativas)
• Cromatografía (Cualitativo)
• Gaucher, GM1, GM2, Fabry, Krabbe,
Enzima
Leucodistrofia Metacromática
(Cuantitativo)
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PEROXISOMALES
Sustrato
• GC-MS
• Determinación de plasmalogenos
Enzima
• Determinaciones enzimáticas
Molecular
• Mutaciones específicas
• Secuenciación del gen
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Noviembre. 2013
MITOCONDRIALES
Metabolitos
Secundarios
• Lactato/Piruvato
• GC-MS
Enzima
• Determinaciones enzimáticas
Molecular
• Mutaciones específicas
• Secuenciación del gen
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Noviembre. 2013
Abordaje diagnóstico específico para
EIM -- Prenatal
Sustrato
Molecular
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Noviembre. 2013
Enzima
Quantitative Schemes
Qualitative Schemes
Amino Acids
Cystine in White Blood Cells
Lysosomal Enzymes
Purines and Pyrimidines in Urine
Quantitative Organic Acids in Urine
Special Assays in Serum
Special Assays in Urine
Acyl carnitine in Blood Spots
Congenital Disorders of Glycosylation
Diagnostic Proficiency Testing
Qualitative Organic Acids in Urine
Urine Mucopolysaccharides
Director:
Luis Alejandro
Barrera Ph.D.
Diagnostico:
Olga Y. Echeverri
Ines Stella Morales
Nina Pulido
Andrea Ardila
Johana Guevara
Estudiantes
Posgrado:
Angela Johana Espejo
Johana Guevara
Investigadores:
Carlos Javier Alméciga
Dennis Diaz
Alexander Rodríguez
Angela Johana Espejo
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Olga Y. Echeverri P.
Noviembre. 2013
Administrativos:
Magda Reyes
Jenny Granados