Download Presentación - Foro de Debate en Oncologia

The changing face of cancer diagnosis
Biopsia Liquida
Utilidad Clínica- Impacto en la Oncología
Carlos Camps
H. General Universitario Valencia
Guía de la Ponencia
• Peculiaridades del Cáncer
• Peculiaridades de la Muestra Biológica
– Limitaciones del Tejido
– Heterogeneidad y Cambios temporales
• ctDNA y sus Aplicaciones Clínicas
- Una nueva forma de evaluación: Respuesta Molecular
- Resultados HGUV BEAMing (CCRm)
Evolution of NSCLC Subtyping to a Multitude of
Molecular-Defined Subsets
Adenocarcinoma
NSCLC
as one
disease
First-targeted tx
ALK
EGFR
Other
11%
Squamous
34%
Adenoca
55%
Histology-Based Subtyping
Li T, et al. J Clin Oncol. 2013;31:1039-1049.
Squamous Cell Cancer
ALK
HER2
BRAF
PIK3CA
AKT1
MAP2K1
NRAS
ROS1
RET
EGFR
KRAS
Unknown
EGFRvIII
PI3KCA
EGFR
DDR2
FGFR1 Amp
Unknown
Cancer. Molecular Classification
9017: Total mutation burden (TMB) in lung cancer (LC) and relationship with response to PD-1/PD-L1 targeted
therapies – Spigel D et al
•
Key results
– TMB was similar across all lung cancer histologies (9.1 to 11.3) and higher than the average TMB of 7.3 for all 60,000+
samples in the database
– TMB was consistently low in lung cancers harbouring known drivers, with the exception of BRAF or KRAS mutant
tumours
– Microsatellite instability was found in 0.4% of lung cancer cases and strongly correlated with high TMB
Cases by TMB, %
100
80
60
TMB-high
TMB-low
40
2%
0
•
Conclusions
– TMB was consistent across histologies and was significantly reduced in most lung cancer histologies with confirmed
oncogenic drivers, but not in KRAS or BRAF mutated cases
Spigel et al. J Clin Oncol 2016; 34 (suppl): abstr 9017
– Microsatellite instability strongly correlated with high TMB
Historia de la evaluación del DNA libre circulante tumoral (ctDNA)
1869 - Australian Medical Journal, 1869;14:146.
1955 - Acta Chirurgica Scandinavia, 1955;201:1.
Jiang, Lung cancer, 2015
Biología del DNA libre circulante tumoral (ctDNA)
Fuentes de DNA en plasma
•Apotosis/necrosis tumoral
•Microvesículas/exosomas
•Apoptosis de tejido normal
•Células inflamatorias
El DNA tumoral circulante representa
<0.5% del total del DNA libre circulante
Crowley, Nature Reviews Clin Oncol, 20
El ADN libre circulante es detectable en la mayoría de los cánceres en
estadios tardíos (100% en CCRm)
Bettegowda et al, Sci Tran Med Feb 2014
El ADN tumoral circulante es más
detectable en enfermedad
metastásica
THE TISSUE IS THE ISSUE, pero son NECESARIAS NUEVAS ESTRATEGIAS
¿Cuales son las limitaciones de los test en tejido y las ventajas de los test ct ADN?
Procedimiento invasivo
No invasivo. Alto cumplimiento
Alto riesgo
Bajo riesgo
RAS+
Tejido archivado
Test
Moleculares
Perfil de mutaciones estático
Tejido no siempre
accesible
Paciente/ Oncólogo
ADN fresco
Cirujano
El tejido archivado puede estar degradado y tener
un perfil mutacional diferente
RAS Accesible
Test
Directo en
Plasma
NSCLC, HCC, etc.
Solo se precisa una nuestra de sangre
Sesgo de selección
No Sesgo de selección
Heterogeneidad del Tumor
Permite evaluar el tumor primario y las metástasis
con una sola muestra
La intra/inter-heterogeneidad del tumor no es un
problema
Test Local
Inefectivo para terapia sistémica
Células Normales
Células Tumorales
No permite la
monitorización
Resistencia, respuesta, etc.
Células Tumorales con mutación
La Monitorización en Tiempo Real
Permite monitorizar la respuesta al fármaco y la
resistencia
Patología
Laboratorio Clínico
9001: Epidermal growth factor receptor (EGFR) genotyping of matched urine, plasma and tumor tissue from nonsmall cell lung cancer (NSCLC) patients (pts) treated with rociletinib – Wakelee H et al
• Key results (cont.)
– Plasma, tissue and urine identify unique and overlapping subsets of T790M+ patients
– 96% of samples were T790M+ by at least one sample type
– 4% were T790M- or inadequate by all three sample types
T790M-positive cases (n=181)
Tissue
Urine
16
8
5
104
18
19
4
Total positive by tissue:
146 of 181
Total positive by plasma:
145 of 181
Total positive by urine:
144 of 181
104 (57%) were positive by all 3 sample types
Plasma
• Conclusions
– T790M plasma, tissue and urine tests complement one another with each test identifying cases missed by
the other tests
– In T790M+ patients, ORR was similar whether T790M status was identified by tissue, plasma or urine
– EGFR mutation detection from plasma and urine are viable approaches
Wakelee et al. J Clin Oncol 2016; 34 (suppl): abstr 9001
Guía de la Ponencia
• Peculiaridades del Cáncer
• Peculiaridades de la Muestra Biológica
– Limitaciones del Tejido
– Heterogeneidad y Cambios temporales
• ctDNA y sus Aplicaciones Clínicas
– Una nueva forma de evaluación: Respuesta Molecular
– Resultados HGUV
Limitaciones del tejido ( a Huge Problem)
Adquisición del tejido
Idoneidad del tejido
•Técnica invasiva y molesta
•Muestras en parafina.
•Coste asociado al cuidado del paciente
•Limitaciones en el análisis del genoma
•Complicaciones frecuentes (17%
•Cantidad células tumorales (30- 50 %)
Biopsias torácicas)
•Muestras pequeñas
Overman JCO 13
Kopetz ASCO 14
Coghlin , JTO, 2010
Heterogeneidad tumoral
McGranahan, Sci Transl Med, 2015
MacGranahan and Swanton, Cancer Cell, 2015
Guía de la Ponencia
• Peculiaridades del Cáncer
• Peculiaridades de la Muestra Biológica
– Limitaciones del Tejido
– Heterogeneidad y Cambios temporales
• ctDNA y sus Aplicaciones Clínicas
- Ca Pulmon / Ca Colon
- Una nueva forma de evaluación: Respuesta Molecular
- Resultados HGUV
Different methods used to detect EGFR mutations in
plasma or serum samples of lung cancer patients
Clinial uselfulness is still limited by a relatively low sensitivity (43-78%)
Jiang, Lung cancer, 2015
Métodos de detección y evaluación de biomarcadores
La tasa de determinación de mutaciones EGFR fue mayor en
tejido (13.7%) que en plasma (10.6%)
•Concordancia: 94.3%
•Sensibilidad: 65.7%
•Especificidad: 99.8%
Douillard, BJC, 2014
BIOPSIA LÍQUIDA: Métodos muy sensibles
y cuantitativos (cantidad de alelos mutados en plasma)
Diaz and Bardelli.- J Clin Oncol 2014
BIOPSIA LÍQUIDA: Métodos muy
sensibles
We must be SCRUPULOUS in
the analytical phase to avoid
erroneous results
Clinically irrelevant molecular
changes due to the high
sensitivity
Tecnologias detección ctDNA
Métodos de detección y evaluación de biomarcadores
Comparación entre técnicas
Comparación de 4 plataformas
38 muestras de plasma
Thress, Lung Cancer, 2015
Métodos de detección y evaluación de biomarcadores
Detección de mecanismos de Resistencia
Ensayo TIGER- fase de expansión.
La expresión de T790M en plasma presenta buena sensibilidad y especificidad
188 pacientes
con plasma y tejido
Sequist, ASCO, 2015
Liquid Biopsy May Help Guide Treatment Decisions for
Advanced Solid Tumors. Mack P. PASCO 2016
• This study ( GUARDANT 360) included 15,191 patients
with advanced lung cancer (37%), breast cancer (14%),
colorectal cancer (10%), and other cancers (39%).
• ctDNA mutations were detected in 83% of the blood
samples
• ctDNA was positive for key abnormalities in EGFR,
BRAF, KRAS, ALK, RET, and ROS1 that drive tumor
growth, the same mutations were reported in tissue
94-100% of the time
Concordancia entre Tejido y ADNtc en mutaciones clínicamente relevantes
23
Performance of standardized BEAMing platform for detecting RAS mutations in the blood of
metastatic colorectal cancer (mCRC) patients. J Clin Oncol 34, 2016 (suppl; abstr 11538)
• 205 mCRC OncoBEAM RAS CRC kit 34 mutations KRAS/NRAS codons 12, 13, 59,
61, 117, 146.
• Results: ctDNA showed a high degree of concordance 92.2%
cases, 90.4% positive agreement, 94.4% negative agreement
(CCR Estadio IV)
Schmiegel et al.2016
Performance of Standardized BEAMing Platform for Detecting RAS Mutations in the Blood of
Metastatic Colorectal Cancer (mCRC) Frederick S. Jones, PASCO 2016
3 cases that were RAS+ in plasma at baseline but were WT in the archival
tumor were consistently RAS+ during serial monitoring of plasma samples
The high overall agreement of plasma and tissue RAS testing results (93.3%) demonstrates that blood-based
OncoBEAMTM RAS CRC testing is a viable alternative to tissue-based RAS testing. Plasma RAS testing also
provides an opportunity to monitor tumor RAS mutation dynamics during therapy in patients with systemic disease.
Aplicaciones clínicas de la determinación ctDNA
• Diagnóstico molecular
– determinación de mutaciones drivers.
• Monitorización de la carga tumoral (tumor burden):
– correlacion con la carga tumoral (tumor burden)
– predección precoz respuesta a tratamiento
– monitorizar recaídas
• Monitorización de la respuesta a fármacos
– detección precoz de clones tumorales de resistencia.
• Peculiaridades del Cáncer
• Peculiaridades de la Muestra Biológica
– Limitaciones del Tejido
– Heterogeneidad y Cambios temporales
• ctDNA y sus Aplicaciones Clínicas
- Ca Pulmon / Ca Colon / Ca Mama
- Una nueva forma de evaluación: Respuesta Molecular
Slide 41
Slide 42
Monitorización Volumen tumoral
Señal Normal
BEAMing puede utilizarse para monitorizar el ADN tumoral
circulante antes y después de la cirugía
Antes de la Cirugía
Después de la Cirugía
Después de la Cirugía
Día de Cirugía
Día 3
Día 244
AND humoral
circulante
mutado residual
Señal Mutada
Diehl et al. Nature Medicine 2008
31
El ADN tumoral circulante predice la respuesta al
tratamiento antes que las pruebas de imagen
Imagen Basal
8 semanas después
Courtesy of: Jeanne Tie, Peter Gibbs
EGFR- TKI treatment: Follow up
Diagnosis
8/8/2013
tissu
e
1st line EGFR TKI
26/9/2013
del exon 19
2nd line
Bone metastasis
10/4/2014
13/3/2015
30/4/2015
3/5/2015
Pos
blood
Pos
Neg
Neg
ctDN
A
Diagnosis
6/5/2013
tissu
e
1st line EGFR TKI
26/5/2013
PD
3/4/2014
2nd line
28/8/2014 2/9/2014
del exon 19
blood
ctDNA
NEG
Camps C et al.
2016
Guía de la Ponencia
• Peculiaridades del Cáncer
• Peculiaridades de la Muestra Biológica
– Limitaciones del Tejido
– Heterogeneidad y Cambios temporales
• ctDNA y sus Aplicaciones Clínicas
– Una nueva forma de evaluación: Respuesta Molecular
• Resultados HGUV BEAMing (CCRm)