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Microbiología clínica 2008 - 2009 Crecimiento y muerte de bacterias Tema 3: Crecimeinto y muerte de bacterias Definición de crecimiento microbiano. Parámetros que pueden ser usados para medir el crecimiento bacteriano. Expresión matemática del crecimiento bacteriano. Factores físicos y químicos que influyen en el crecimiento. Efectos de los solutos sobre el crecimiento y el metabolismo. Efecto de la temperatura. Efecto de la concentración de oxígeno. Efecto del pH. Efecto de la actividad de agua. Crecimiento de un cultivo estanco: fases de la curva de crecimiento. Rendimiento del crecimiento. Crecimiento de un cultivo continuo. Crecimiento en medio sólido. Lesiones en los microorganismos. Antibióticos y resistencia. Crecimiento microbiano Ciclo celular 20-30 min E. coli a 37º Crecimiento Medida del crecimiento Número de células Masa celular Componentes celulares Pared celular DNA RNA proteínas Medida del crecimiento Número de células Medida del crecimiento Biología de los microorganismos de Brock Medida del crecimiento Biología de los microorganismos de Brock Medida del crecimiento Masa celular Cinética del crecimiento Nº generaciones (g) Número de células N 0 1 1 2 2 4 3 8 4 16 5 32 6 64 7 128 …. …. g 2g N = N0 2g Cinética del crecimiento 2g 140000 g N 100000 0 1 80000 1 2 60000 2 4 40000 3 8 20000 4 16 5 32 6 64 7 128 8 256 9 512 10 1024 11 2048 3,00 12 4096 2,00 13 8192 1,00 14 16384 15 32768 16 65536 N = N0 120000 0 0 5 10 15 20 6,00 5,00 4,00 0,00 0 5 10 15 20 Cinética del crecimiento 140000 120000 N = N0 2g 100000 80000 60000 Log N = Log N0 + g Log 2 40000 20000 0 0 N puede ser Biomasa Densidad óptica Número de células Conc proteína Conc. DNA Conc. RNA etc .. 5 10 15 20 6,00 5,00 4,00 3,00 2,00 1,00 0,00 0 5 10 15 20 Cinética del crecimiento dN / dt = µ N La velocidad (tasa) de crecimiento es proporcional al número de células dN / N = µ dt ∫ dN / N = µ ∫ dt Ln N – Ln N0 = µ t El logaritmo del número de células varía de forma lineal con el tiempo. La pendiente de la recta de proporcionalidad es la tasa de crecimiento µ LnN = Ln N0 + µt N = N0eµt El aumento del número de células es exponencial Cinética del crecimiento N = N0eµt LnN = Ln N0 + µt N = N0 2g Log N = Log N0 + g Log 2 Cinética del crecimiento N = N0eµt N = N0 2g 2g = eµt g Ln2 = µt µ = g Ln2 / t µ = Ln2 / τ g=t/τ Cinética del crecimiento LnN = Ln N0 + µt LnN Pendiente = µ Ln N0 Tiempo (t) Cinética del crecimiento Log N = Log N0 + g Log 2 Log N = Log N0 + (t/τ) Log 2 Log N = Log N0 + t (Log 2 / τ) Cinética del crecimiento Log N = Log N0 + t (Log 2 / τ) LogN Pendiente = Log2/τ Log N0 Tiempo (t) Cinética del crecimiento Problema 1: Calcular la tasa de crecimiento y el tiempo de generación de las bacterias de un cultivo que pasa de tener una DO550 de 0.1 a 0.78 en 120 min. LnN = Ln N0 + µt Ln0.78 = Ln 0.1 + µ 120 min µ = 1.03 h-1 τ = 0.67 h τ = 40.38 min Cinética del crecimiento Equivalencias entre la tasa de crecimiento y el tiempo de generación µ = Ln2 / τ Cuando µ = 1 h-1 , entonces τ = 0.69 h = 41 min (aporx.) Cuando τ = 0.5 h, entonces µ = 1.4 h-1 Cuando τ = 1 h, entonces µ = 0.69 h-1 Cinética del crecimiento Tiempo de generación de algunas bacterias en condiciones óptimas de cultivo. Bacteria Medio Escherichia coli Glucosa sales Bacillus megaterium Sacarosa sales Streptococcus lactis Leche Streptococcus lactis Caldo de lactosa Staphylococcus aureus BHI Lactobacillus acidophilus Leche Rhizobium japonicum Extr. Manitol levadura M. tuberculosis Sintético Treponema pallidum Testículo ratón Tiempo gen (min) 17 25 26 48 27-30 66-87 344-461 792-932 1980 Efecto de la temperatura sobre la velocidad de crecimiento de los micoorganismos Biología de los Microorganismos de Brock Clasificación de los microorganismos según la temperatura Biología de los Microorganismos de Brock Efecto del ion Na+ sobre el crecimiento microbiano Biología de los Microorganismos de Brock Efecto del pH sobre el crecimiento de microorganismos Biología de los Microorganismos de Brock Efecto del oxígeno sobre el crecimiento de microorganismos Biología de los Microorganismos de Brock Comparación del Transporte Activo con la Difusión Simple Transporte activo Concentración Interna de solutos Difusión Simple Concentración Externa de solutos Biología de los Microorganismos de Brock Cultivo continuo Tasa de dilución D=Φ/V Φ=µ Cultivo continuo Concentración de substrato Biomasa D µmax Cultivo continuo