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Sociedad Venezolana de Microbiología. Capítulo Sucre XXIX Jornadas Venezolanas de Microbiología "Dr. Vidal Rodríguez Lemoine" Cumaná del 9 al 11 de Noviembre de 2005 DIAGNÓSTICO MOLECULAR DE LA LEPTOSPIROSIS HUMANA EN VENEZUELA M. Cardona, R. Moros, L. Eneida, J.L. Pérez, R. Hernández. Sección de Inmunoserología Bacteriana. Instituto Nacional de Higiene “Rafael Rangel”. Caracas. Venezuela. Rosalbamor sa@yahoo.com La leptospirosis es una zoonosis producida por bacterias de género Leptospira que afecta a diferentes mamíferos. El hombre se infecta al entrar en contacto con ambientes contaminados con la orina de animales infectados o sus vísceras. La enfermedad está asociada a una variedad de manifestaciones clínicas que no la caracterizan como ictericia, hepatomegalia, vómito, síndrome pulmonar, hemorragias, insuficiencia renal, entre otras. Por lo tanto, se requiere confirmar los casos por el laboratorio. El diagnóstico de la leptospirosis se realiza mediante los métodos serológicos MAT y TR, además del aislamiento. Recientemente, la técnica Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) ha sido implementada en laboratorios de referencia de Francia y Holanda como método de diagnóstico de la Leptospirosis, demostrándose su alta sensibilidad y especificidad. EL objetivo del trabajo consistió en estandarizar la PCR en muestras clínicas de pacientes con diagnóstico presuntivo de Leptospirosis. Se procesaron 84 muestras en total, entre orinas y sueros. La extracción del DNA se realizó mediante el método fenol-cloroformo. La PCR se llevó a cabo con los iniciadores G1/G2 que amplifican una secuencia específica de las leptospiras patógenas. Se detectó ADN de Leptospira en el 52,8% y 52% de las muestras de orinas y sueros estudiadas, respectivamente. Estos resultados se compararon con los obtenidos por las pruebas serológicas, demostrándose la mayor sensibilidad en fase aguda y la utilidad de la técnica PCR en el diagnóstico rápido de la Leptospirosis, lo cual es muy importante en los casos graves que requieren un tratamiento oportuno. Palabras claves: Leptospirosis, PCR.
