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Bio-Combo Rota/Adeno
Código: 3001080
Prueba combo Rota-Adeno para la determinación cualitativa de Rota y
Adeno virus por inmunocromatografía. (25 cassettes)
INTENCIÓN DE USO
El combo Rota/Adeno es un ensayo inmunocromatográfico in Vitro
Cualitativo para la detección rápida de antígenos rota y Adeno virus en
muestras de heces humanas. Esta prueba es utilizada como auxiliar en
el diagnóstico de infección y monitoreo de la efectividad del tratamiento
terapéutico.
INTRODUCCIÓN
El rota virus es el principal agente causal de gastroenteritis pediátrica y
diarrea en todo el mundo. La ingesta de comida o agua contaminada y
la mala higiene provoca que no decrezca la incidencia de infecciones por
rota virus, casi todos los niños del planeta con una edad de 5 años han
padecido diarrea una vez. Científicos dicen que en el mundo alrededor
de 900,000 niños jóvenes mueren cada año por infecciones relacionadas
con rota virus. La mayor incidencia de infecciones se da entre los meses
de diciembre y abril en bajas temperaturas; sobre todo en el hemisferio
norte. El mayor número de muertes ocurre en países poco desarrollados
y normalmente empieza con fiebre. Algunos pequeños inician con vómito
y tienen intenso dolor estomacal. Los vómitos avanzan y los siguen las
diarreas acuosas intensas los siguientes tres a nueve días. La mayoría
del tiempo los niños se recuperan con poca dificultad, resultado de la
intensa deshidratación. La extrema deshidratación puede estar causada
por rota virus y en segundo por la bacteria del cólera. La infección surge
repentinamente y le sigue un promedio entre 4 y seis días. El rota virus
es extremadamente contagioso. Una pequeña partícula es necesaria
para transmitir la infección. Éstas se originan en las heces, pero éstas
también se pueden encontrar en el medio ambiente o en lugares donde
los niños lleguen a pasar mucho tiempo, principalmente durante los
meses de invierno. Este virus es muy resistente al uso de desinfectantes
para superficies, así como antibacteriales y lavadores de manos.
Las partículas de rota virus permanecen activas en las manos humanas
hasta por 4 horas e inclusive en superficies con gran humedad hasta
pueden permanecer hasta por diez días, y en otras áreas húmedas hasta
por semanas. Una infección no tratada de rota virus puede resultar en
severas enfermedades como la deshidratación y disturbios en el cuerpo.
Generando un balance anormal electrolítico; especialmente en recién
nacidos y niños de preescolar. Éste virus es el principal causante de
hospitalizaciones por encima de un 50% en infantes y niños jóvenes. La
deshidratación causada por rota virus es un importante factor de
mortalidad en países desarrollados y subdesarrollados. La alta
prevalencia de enfermedades por experiencia se ve reflejada en climas
con temperaturas bajas en los meses invernales del año. En climas
tropicales la infección por rota virus puede ocurrir durante todo el año.
Los grupos de edades más susceptibles a la infección son siempre los
menores.
ADENO-VIRUS
El adenovirus es el segundo agente causal más frecuente de
enfermedades diarreicas virales en niños (10-15%). Además, este virus
puede causar enfermedades respiratorias y dependiendo del serotipo
puede causar diarrea, conjuntivitis, cistitis, etc.
Se han contado 47 serotipos de adenovirus que tienen relación, todos
éstos comparten un campo común con un antígeno del hexon y sean los
asociados al del gastro enteritis a del que el síndrome principal es la
diarrea que puede durar entre 9 y 12 días asociados a fiebre y vomito.
PREPARACIÓN DEL REACTIVO
Llevar todos los reactivos a temperatura ambiente incluidos las
muestras.
PRINCIPIO DE LA PRUEBA
EL Combo Rota Adeno es una prueba en sándwich que se lleva a cabo
en su fase sólida debido a que es un ensayo inmunocromatográfico.
Para que este ensayo se lleve a cabo es necesario tomar una muestra
de heces diluida con la solución diluyente e incorporada a la ranura de
muestra en el cassette. La muestra fluye a través de la fase sólida que
contiene anticuerpos agregados de adenovirus y rotavirus asociados a
un complejo colorante de oro coloidal, esta muestra que contiene
antígenos de rota virus y adenovirus. El antígeno cuando se une al
anticuerpo asociado al oro coloidal forma un complejo Antígeno-Oro
Coloidal-anticuerpo, este fluye a través de la membrana de nitrocelulosa
por acción de la capilaridad hasta la zona de prueba donde se formara
una línea rojiza, la aparición de la línea indicara la positividad del ensayo.
En el caso de que la línea aparezca solo en la zona marcada con la letra
“R” significa que ocurrió una unión entre el antígeno viral de Rotavirus
con el anticuerpo anti-rotavirus unido este al oro coloidal, este complejo
al unirse dan forma a una línea color rojiza. En el caso del adenovirus
ocurre lo mismo solo que la línea que se genera por la formación del
complejo Antígeno anticuerpo se llevara a cabo en dirección de la letra
“A”; la formación de una línea en la zona de control “C” siempre debe
aparecer ya que esta es indicativa del correcto funcionamiento del
sistema de la prueba en caso de no aparecer en cualquier caso es
invalida.
MATERIALES SUMINISTRADOS
1. Una prueba rápida del combo Rota/Adeno cada Cassette contiene
una tira reactiva con anticuerpos Anti Rota y Adenovirus así como
una sección membranosa que contiene el oro coloidal .
2. botella colectora de muestra 1.5 ml que se debe almacenar entre
los 2-30ºC
MATERIALES NO PROVISTOS
1. Contenedor para la recolección de la muestra
ADVERTENCIAS Y PRECAUCIÓNES
1. Úsese solo para diagnostico in Vitro
2. Se deben usar guantes protectores para la manipulación, tanto de
la muestra como del reactivo.
3. Las muestras de los pacientes y el control positivo inactivo pueden
contener agentes infecciosos y solo deben ser manipulados con
guantes desechables, esta debe ser manejada como
potencialmente biopeligrosa.
4. No usar componentes del kit después de la fecha de expiración.
5. Desechar todos los materiales utilizados en el contenedor
apropiado. Tratarlo como potencialmente infecto contagioso.
INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO
1. La fecha de expiración está indicada en la etiqueta del empaque.
2. El almacenamiento de los tubos colectores de muestra se debe
mantener entre los 2-30ºC (solución Buffer)
3. El almacenamiento del kit debe ser entre los 2-30ºC.
RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA
Las muestras de heces se deben tomar tan pronto como los síntomas
aparezcan. Las partículas virales disminuyen a partir de una semana, las
muestras deben ser recolectadas en medios que no contengan
preservantes, sueros animales, o detergentes debido a que la mayoría
de los preservantes interfieren con la reacción.
Las muestras pueden ser almacenadas entre 2-8ºC por dos días
después de esto existirán interferencia en los resultados. Para prolongar
el uso de la muestra es necesario conservar la muestra congelada a 20ºC se recomienda la congelación rápida para evitar resultados
erróneos posteriores.
PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
1. No usar directamente el bote contenedor usar el aplicador adjunto
sobre la tapa,
2. Agregar una pequeña porción de muestra (4-6 mm de diámetro,
aproximadamente 50-200 mg) dentro del contenedor de buffer.
Para muestras liquidas o semisólidas añadir 100 microlitros de
muestra en el vial.
3. Retire el aplicador de la botella y apriete con seguridad.
4. Mezcle el contenido de la botella agitando vigorosamente durante
algunos segundos.
CARACTERÍSTICAS DE FUNCIONAMIENTO
La prueba rápida en combo rota Adeno virus muestra la correlación
entre otras marcas comerciales rebasando las expectativas de
sensibilidad y especificidad entre un 98.6 y 98.9%
PROCEDIMIENTO
1. Llevar todas las muestras y los reactivos a temperatura ambiente.
2. Extraer el cassette del sobre contenedor del mismo.
3. Sostenga la botella de la muestra vertical con la extremidad
apuntando en la dirección contraria del ejecutante retire el broche
de presión de la prueba.
4. Mantenga la botella en posición vertical sobre la ranura de muestra
en el cassette y agregar 3 gotas (120-150 µl) de muestra diluida.
5. Leer los resultados entre los próximos 5-10 min. un resultado
positivo se mostrara de inmediato.
6. Los resultados después de 10 minutos son inválidos.
REFERENCIAS
1. WHO. Scientific Working Group: Rotavirus and other viral diarrheas.
Bull WHO 58(2): 183-198,1980
2. Brand CDD, etal: Pediatric viral gastroenteritis during eight years of
study: Clin microbiol 18(1): 71-78,1983
3. Morine F., et al: Rapid detection of rotavirus in stool by latex
agglutination: comparison with radioinmmmunoassay and electron
microscopy and clinical evaluation of the test. J Med Virol 11:91-97,
1984.
4. Motti P.F., et al: Comparative efficiency of commercial
immunoassays for the diagnosis of rotavirus gastroenteritis during
the course of infection. J Clin Microbiol 22(5): 693-698, 1985.
5. Shaw R.D., et al: specific enzyme linkes immunoassay for rotavirus
serotypes 1 and 3. JClin Microbiol 22(2): 286-291, 1985.
6. Cukor G, and Blacklow N.R., Human viral gastroenteritis.
MicroReviews 48:157-179,1984
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
1.
Positivo: La aparición de una marcada línea de color en las zonas
de Prueba “R” o “A” son indicadores específicamente en la zona en
la que aparecen.
2.
Negativo: La ausencia de cualquiera de las líneas en la zona de
prueba “R” o “A” indica la ausencia de antígenos en la muestra por
lo tanto se concederá negativa.
3.
Inválida: la ausencia en cualquier caso de la línea de control en la
zona marcada “C” hace referencia a la falla de funcionamiento por
lo tanto se considera inválida.
Reproducibilidad:
La reproducibilidad de la prueba está dada por la utilización de controles
negativos, positivos débiles y positivo alto. Esta pruebas se emplearon
por réplicas de 10 con tres diferentes operadores en diferentes
laboratorios llegando a un reproducibilidad el 100%
CONTROL DE CALIDAD
1. La banda de control es una reacción interna para el procedimiento
de control. Esta banda siempre debe aparecer para verificar el buen
desempeño del reactivo.
2. Las buenas prácticas de laboratorio siempre recomiendan el uso
diario de material de control para la validación, la reproducibilidad
y el funcionamiento. Los materiales de control no se proveen en
este kit.
LIMITACIONES DE LA PRUEBA
1. Esta prueba está destinada para la identificación de antígenos rota
y Adeno-virus, no está indicada para la cuantificación de los
mismos.
2. Úsese solo para diagnostico in Vitro
Negativo
Positivo
Adenovirus
Positivo
rota-virus
Positivo
rota/Adeno
-virus
Distribuido por:
Grupo Industrial MexLab S.A. de C.V.
01800-111-4343
www.grupomexlab.com
El resultado de esta prueba solo debe aplicarse en pacientes con una
clara manifestación de los síntomas relacionados con la infección.
Rev. 10-2016