Download 1 Ejercicio Práctico

DIRECCIÓN DE MEDICINA FORENSE HONDURAS
INVESTIGACION EN CIENCIAS FORENSES
Ensayo de Aptitud
Ejercicio de Comparación Interlaboratorios
CONTROL DE CALIDAD SLAGF 2016-2017
Coordinado por: Mireya Matamoros Zelaya/ Investigación en Ciencias Forenses. Dirección de Medicina
Forense, Honduras.
Con la colaboración de los Doctores Carlos Díaz, Yessica Pinto, Ligia Castro del Laboratorio de SerologíaGenética y de la Dra. Julissa Villanueva/ Directora de la Dirección de Medicina Forense de Honduras.
1 EJERCICIO PRÁCTICO
Se remiten cuatro muestras de origen humano que fueron extraidas de donantes saludables, sin enfermedades infectocontagiosas conocidas o declaradas, a excepcion de la muestra osea que corresponde a un individuo fallecido a causa de
un accidente de tránsito, cuyos antecedentes medicos se desconocen. Todas las muestras deberan manipularse
observando el protocolo de bioseguridad establecido, para garantizar la seguridad del personal que las manipula y la no
contaminacion de las mismas.
Se intentó simular un caso de asalto sexual en el cual se cuenta con muestra de hisopado vaginal, muestra de la víctima y
muestra de un sospechoso. Se envia adémas un fragmento de resto óseo, limpio y procesado, listo para la extracción.
Las muestras preparadas en FTA, se conservaron a temperatura ambiente (25-30 °C), el resto oseo se matuvo en
refrigeracion hasta su preparación final para envio, posteriormente se almacenó a temperatura ambiente. Se realizaron
ensayos de estabilidad, genotipificando las muestras en diferentes momentos del proceso, para descartar interferentes
debido al almacenamiento. Se realizaron controles positivos y negativos, obteniendose resultados adecuados.
Cada laboratorio participante se identificará con un codigo para mantener el anonimato.
Los resultados se analizaran por consenso, aunque se valorara individualmente para fines del certificado, el cual se
extendera UNICAMENTE a los participantes con resultados CONFORMES.
Los resultados se discutiran en las proximas jornadas de la SLAGF, en Mexico.
Cualquier consulta o duda comunicarse a mireyam556@yahoo.com con copia a control SLAGF
Las muestras se rotularon como:
M1: Muestra de 50ul de sangre,recolectada en papel FTA, que corresponde a la víctima.
M2: Muestra mezcla de secreción vaginal y semen de 50ul, impregnada en papel FTA, con un componente
mayoritario y uno minoritario.
M3: Muestra de 50ul de sangre, recolectada en papel FTA, que corresponde a un sospechoso.
M4: Fragmento de femur.
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INVESTIGACION EN CIENCIAS FORENSES
Los participantes deben analizar geneticamente las muestras , informar el genotipo obtenido en cada una de
ellas y determinar si M3 es un posible aportante de la mezcla.
Se requiere que los participantes informen:
1a. Método de extracción utilizado.
1b. Método de purificaciónutilizado.
1c. Método de cuantificación utilizado.
1d. Metodologia de Amplificación
-PCR punto final o tiempo real.
-Kits multiplex utilizados.
1c. Metodo de deteccion (Equipo de electroforesis utilizado y/o electroforesis manual?).
1d. Genotipos obtenidos según lo establecido en plantilla de Anexo 1.
1e. Resultados, calculos estadisticos si aplican y conclusiones
1f. Informar si en su rutina, no procesa restos oseos.
2 EJERCICIO TEORICO
Se trata de un caso en el cual dos personas de diferentes madres, quieren saber si comparten padre biológico.
Determinar:
1) El INDICE de MEDIO-HERMANDAD (IMH) para cada marcador autosómico y el IMH total.
2) El INDICE y PROBABILIDAD de pertenencia a una misma patrilínea.
3) Indicar las CONCLUSIONES tal como las informaría en su laboratorio.
Muestra
H1
H2
Muestra
H1
H2
Muestra
H1
H2
pág. 2
D3S1358 D3S1358
1
2
17
15
17
17
HUM
THO1
1
HUM
THO1
2
7
8
9
9
31.2
29
33.2
32.2
15
15
15
20
D7S820
2
D16S
539
1
D16S
539
2
CSF
1PO
1
CSF
1PO
2
11
11
11
9
13
13
10
10
13
11
FGA
1
FGA
2
21
21
23
21
D13S317 D13S317 D7S820
1
2
1
9
9
10
13
VWA
1
VWA
2
16
17
18
17
10
10
D21S11 D21S11 D18S51 D18S51 Penta E Penta E D5S818 D5S818
1
2
1
2
1
2
1
2
D8S1179 D8S1179
TPOX 1 TPOX 2
1
2
13
14
14
14
8
8
8
8
16
21
21
24
9
9
11
13
Penta D Penta D Amelog Amelog
1
2
enin 1 enin 2
10
9
13
11
X
X
Y
Y
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Muestra
H1
H2
Muestra
H1
H2
DYS
576
17
17
DYS
570
18
18
DYS
389I
13
13
DYS
635
23
23
DYS
448
19
19
DYS
390
23
23
DYS
389II
29
29
DYS
439
12
12
DYS
19
14
14
DYS
392
13
13
DYS
391
11
11
DYS
643
10
10
DYS
481
22
22
DYS
393
13
13
DYS DYS
549 533
14
12
14
12
DYS DYS
458 385a/b
16 10/14
16 10/14
DYS DYS
438
437
12
15
12
15
DYS Y-GATAH4
456
16
12
16
12
Para efecto del EJERCICIO TEORICO, debe tomarse la FRECUENCIA POBLACIONAL DE ARGENTINA, que
se encuentra en www.slagf.org. La frecuencia haplotípica del cromosoma Y debe obtenerse de
www.yhrd.org
3 ANEXO 1 (TABLAS DE REPORTE)
3.1.- Marcadores autosómicos
Muestra
D3S1358 D3S1358 HUMTHO1 HUMTHO1 D21S11
1
2
1
2
1
D21S11 D18S51 D18S51 Penta E Penta E D5S818 D5S818
2
1
2
1
2
1
2
M1
M2
M3
M4
Muestra
D13S317 D13S317
1
2
D7S820
1
D7S820
2
D8S1179
1
D8S1179
2
D16S539 D16S539 CSF1PO CSF1PO Penta D Penta D Amelog Amelog
1
2
1
2
1
2
enin 1 enin 2
M1
M2
M3
M4
Muestra
M1
M2
M3
M4
pág. 3
VWA
1
VWA
2
TPOX
1
TPOX
2
FGA
1
FGA
2
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3.2 Marcadores del Cromosoma Y
Muestra
M1
M2
M3
M4
Muestra
DYS
576
DYS
389I
DYS
448
DYS
389II
DYS
19
DYS
391
DYS
481
DYS
549
DYS
533
DYS
438
DYS
437
DYS
570
DYS
635
DYS
390
DYS
439
DYS
392
DYS
643
DYS
393
DYS DYS DYS Y-GATAH4
458 385a/b 456
M1
M2
M3
M4
3.3 AGREGAR TABLAS ADICIONALES PARA OTROS MARCADORES COMO X, MITOCONDRIAL, ETC.
pág. 4