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Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Programa Analítico Nombre de la Asignatura: Virología Plan de Estudios: 2008 Carrera: Lic. en Ciencias Biológicas Profesor a Cargo: Dra. Mónica Wachsman I-Objetivos: 1. Proveer los conocimientos teóricos básicos sobre el origen de los virus, sus propiedades, ciclos replicativos y sus distintos tipos de interacción con el huésped, formas de cultivo y prevención para lograr su comprensión como entidades biológicas, agentes infecciosos, herramientas en uso dentro de la ingeniería genética o como vehículos de genes foráneos. 2. Brindar conocimientos prácticos para el cultivo de virus y su detección mediante técnicas serológicas, PCR o reacciones de inmunotransferencia. Marcación de macromoléculas con precursores radiactivos y purificación de los componentes virales. Ensayo de antivirales. Tipos de interacción virus-célula. Respuesta de las células a la infección. 3. Estimular en el alumno la comprensión de abordajes experimentales mediante la exposición de seminarios de trabajos publicados en revistas internacionales sobre temas de interés virológico. II- Contenidos: a. Contenidos mínimos: Concepto de virus. Principales características. Diferencias con bacterias y hongos. Estructura de los virus. Clasificación actual según el Comité Internacional de Taxonomía Viral. Ciclo de multiplicación. Bioseguridad en el laboratorio de Virología. Cultivo de virus animales. Genética de virus. Infección viral in vivo: entrada, diseminación y eliminación. Respuesta inmune del huésped frente a las infecciones virales. Vacunas virales: distintos tipos. Antivirales. Principales familias de virus con genoma a DNA y a RNA: características. b. Unidades: Unidad 1: La virología como ciencia biológica. Consideraciones históricas. Naturaleza de los virus. Su relación con otros microorganismos. Virus animales, virus de plantas, virus bacterianos, virus de insectos, virus de peces, otros. Taxonomía viral: nomenclatura y clasificación. Teorías sobre el origen de los virus. Evolución viral. Unidad 2: Composición química de los virus. Componentes estructurales de un virión. Características de ácidos nucleicos, proteínas y membranas virales. purificación de virus. métodos de uso común. Análisis de subestructuras virales. Universidad de Belgrano – Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Página 1/4 Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Programa Analítico Unidad 3: Estructura y arquitectura viral. Morfología. Componentes de la partícula viral. Técnicas de microscopía electrónica. Difracción con rayos X. Simetría de las cápsides. Simetría helicoidal y cúbica. Estructura tridimensional de algunas proteínas virales. Organización de las envolturas virales. Unidad 4: Bioseguridad. Características de un laboratorio de virología y de un laboratorio de cultivos celulares. Niveles de seguridad para el manejo de virus. Laboratorios tipo 1 al 4. Métodos de contención. Conducta segura dentro de un laboratorio de virus. Técnicas de eliminación de aerosoles. Eliminación de residuos peligrosos. Manejo de material radiactivo. Qué hacer en caso de accidente. Unidad 5: Detección, cultivo y cuantificación de virus. Aislamiento y caracterización. Aplicación a los distintos tipos de virus. Propagación de virus animales en distintos huéspedes. Métodos de titulación. Métodos de detección de secuencias virales: PCR Unidad 6: Multiplicación viral. Curva de crecimiento. Curva de un solo ciclo explicada con fagos. Etapas del ciclo de multiplicación: adsorción, penetración, síntesis de macromoléculas, ensamble y brotación. Distintas estrategias de los virus para su multiplicación: clasificación de Baltimore. Uso de inhibidores metabólicos. Unidad 7: Interacción virus-célula huésped. Distintos tipos de infecciones in vivo e in vitro producidas por virus citocídicos, moderados, lentos y transformantes. Infección persistente. partículas defectivas interferentes. Infección citocídica: alteraciones morfológicas y efecto sobre las macromoléculas del huésped. Unidad 8: Genética de virus animales. Tipos de mutantes y técnicas de obtención. Recombinación y complementación. Mapas físicos y genéticos. Interacciones entre virus en las infecciones mixtas. Mezcla fenotípica. Variabilidad genética y antigénica. Evolución. Vectores virales. Unidad 9: Inactivación de virus. Efecto de distintos agentes físicos y químicos sobre la infectividad y la antigenicidad viral. Su aplicación a la obtención de inmunógenos. Unidad 10: Los viriones como antígenos. Reacciones serológicas su uso en Virología. Neutralización: sus bases y mecanismo. Aplicaciones al diagnóstico y clasificación. Otras reacciones serológicas como ELISA, fijación de complemento, inmunotransferencia. Aplicación al diagnóstico virológico. Unidad 11: Respuesta inmune a las infecciones virales. Inmunidad humoral y celular. Mecanismos de defensa específicos y no específicos. Papel de la respuesta en la protección y patogenia. Infecciones, agudas, crónicas, persistentes. El papel del interferón como mecanismo de defensa. . Unidad 12: Control de las enfermedades virales. Inmunización con vacunas inactivadas, atenuadas, a subunidades u obtenidas por ingeniería genètica. Vacunas DNA. Antivirales: mecanismo de acción. Diseño racional. Interferón: propiedades mecanismo de acción antiviral en la célula infectada. Unidad 13: Principales familias de virus animales cuyo genoma es DNA: Adenovirus, Papovavirus, Herpesvirus, Hepadnavirus. Unidad 14: Principales familias de virus animales cuyo genoma es RNA: Picornavirus, Togavirus, Rhabdovirus. Ortho y Para mixovirus. Arenavirus y Retrovirus. Universidad de Belgrano – Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Página 2/4 Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Programa Analítico Unidad 15: Virus de la inmunodeficiencia adquirida HIV. Mecanismo de replicación. Formas de transmisión. Prevención. Diagnóstico. Epidemiología molecular. Antivirales en uso. Otros retrovirus patógenos para el hombre. Unidad 16: Virosis emergentes. Cambios en el ecosistema que influyen sobre la emergencia. Otros factores importantes. Hantavirus. Dengue. Influenza. Fiebre amarilla. Fiebres hemorrágicas III- Bibliografía: Fundamental Virology. Editors. B.Fields, D.Knipe, P.Howley. Third Edition. Lippincot Raven Press. Philadelphia 1996. Microbiología Biomédica. Editores J.A. Basualdo, C.E. Coto y R.A de Torres. Editorial Atlante. 2006. Principles of Molecular Virology, A. Cann, Academic Press, 1997 Tortora G.J.; Funke, B.R.; Case C.H., Introducción a la Microbiología, Editorial Panamericana, Bs. As. Argentina, 2007. Biochemical Methods in Cell Culture and Virology, R.J. Kuchler, Academic Press, 1977. All the Virology in the www. Dirección: http:// www.tulane.edu/ % TEdmsander/garryfavweb.htlm. Alphabetical list of ICTV approved Virus families and genera. Referencia inmediata sobre la clasificación actualizada de los virus. Dirección: htpp:// life.anu.edu.au/viruses/Ictv/vf-fstVirología General, Luria. Editorial Omega, 1997 Basic Virology, E.K. Wagner, M. Hewlett, Blackwell Science Inc., 1999 Virología Médica, G. Carballal y J. Oubiña, 3ª. Edición, El Ateneo, 1998 IV-Metodología Clases teóricas y seminarios de discusión de trabajos de investigación sobre los que se basan determinados conocimientos de aceptación general. Serán expuestos por los alumnos y discutidos por los asistentes con la guía del profesor. Realización de prácticas de laboratorio sobre técnicas virológicas básicas. Dichas prácticas consistirán en la observación de distintos cultivos celulares, efectos citopáticos que realizan los virus sobre las células que infectan, se mostraran placas de lisis de distintos virus citolíticos como por ejemplo, virus de la estomatitis vesicular y herpes simples tipo 1. Se mostrará como se hace la cuantificación de un virus animal por métodos enumerativos. Se observarán inmunofluorescencias totales y de membrana para distintos virus. Para realizar las observaciones de estas prácticas se utilizarán aproximadamente entre 1 y 2 h cátedra, en distintos momentos del curso. Por otro lado también se proyectarán videos, sobre distintos temas como: Bioseguridad, HIV, etc. V- Criterios de Evaluación Examen parcial y su recuperatorio escrito. Evaluación basada en el análisis de los informes de las prácticas de laboratorio y una evaluación diagnóstica de los temas discutidos en los seminarios mediante la presentación de un cuestionario de preguntas basadas en los trabajos presentados. Este cuestionario o problema será resuelto en grupos de 3 o 4 alumnos que expondrán su análisis también en forma de seminario agregando una reseña breve por escrito. Examen Final Integrador sobre todos los contenidos del curso. Universidad de Belgrano – Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Página 3/4 Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Programa Analítico ANEXO I A1 - Carga Horaria - Modalidad de Enseñanza Modalidad Teóricas Act. Prácticas Evaluaciones Total del curso Horas cátedra 48 48 96 Universidad de Belgrano – Facultad de Ciencias Exactas y Naturales Página 4/4