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BIOLOGIA 3º bachillerato Actividad de laboratorio 2 Y 3 ººººººººººººººººººººººººººººººººººººººººº INTRODUCCIÓN A LA HISTOLOGÍA ººººººººººººººººººººººººººººººººººººººººº Nombre ……………………………………………….. Subgrupo………….. Fecha de entrega……………… ESTA ACTIVIDAD NOS PERMITIRÁ: Comprender que estudia la Histología . Repasar el funcionamiento de los distintos instrumentos que utiliza esta ciencia ,para poder ver imágenes microscópicas. Estudiar cómo se procesan los preparados histológicos en sus distintas etapas . Entender los que se observa en el microscopio y aprender recursos básicos de dibujo histológico. ACTIVIDADES DOMICILIARIAS PREVIAS Contesta las siguientes preguntas de este cuestionario : 1) ¿QUE ESTUDIA LA HISTOLOGIA? 2) ¿QUÉ DIFEENCIAS EXÍSTEN ENTRE UN MICROSCOPIO ÓPTICO Y OTRO ELECTRÓNICO? 3) ¿POR QUÉ SE DEBEN COLOREAR LOS TEJIDOS? . ¿CUALES SON LO COLORANTES CLÁSICOS EN LA HISTOLOGIA Y QUE CUALIDADES TIENEN? 4) ¿CÓMO SE OBSERVA UN OBJETO TRIDIMENSIONAL EN UN MICROSCOPIO? ¿DE QUÉ DEPENDE LA IMAGEN PLANA QUE OBTENEMOS DE ÉL?. 5) CUALES SON LOS PASOS BÁSICOS PARA MANEJAR UN MICROSCOIPIO ÓPTICO?. ACTIVIDADES EN EL LABORATORIO Observación de microscopios ópticos , sus partes y funcionamiento. Observación de preparados y como se producen. Observación de las células en tejidos , diferentes tipos , características ,y dibujo de las mismas . Marco teórico : La HISTOLOGIA ºººººººººººººº LA HISTOLOGIA ES LA CIENCIA QUE ESTUDIA LA ESTRUCTURA LA COMPOSICIÓN Y LAS FUNCIONES DE LAS CÉLULAS Y LOS TEJIDOS . Para poder estudiar los tejidos y las células la histología necesita ayudarse de un instrumento : EL MICROSCOPIO . LOS MICROSCOPIOS MICROSCOPIO ÓPTICO -- UTILIZA LUZ SOLAR O ARTIFICIAL (FOTONES). MICROSCOPIO ELECTRÓNICO -- UTILIZA UN HAZ DE ELECTRONES . El Tipo de microscopio más utilizado es el microscopio óptico, que se sirve de la luz visible para crear una imagen aumentada del objeto. El microscopio óptico más simple es la lente convexa doble con una distancia focal corta. Estas lentes pueden aumentar un objeto hasta 15 veces. Por lo general, se utilizan microscopios compuestos, que disponen de varias lentes con las que se consiguen aumentos mayores. Algunos microscopios ópticos pueden aumentar un objeto por encima de las 2.000 veces. El microscopio compuesto consiste en dos sistemas de lentes, el objetivo y el ocular, montados en extremos opuestos de un tubo cerrado. El objetivo está compuesto de varias lentes que crean una imagen real aumentada del objeto examinado. Las lentes de los microscopios están dispuestas de forma que el objetivo se encuentre en el punto focal del ocular. Cuando se mira a través del ocular se ve una imagen virtual aumentada de la imagen real. El aumento total del microscopio depende de las distancias focales de los dos sistemas de lentes. El equipamiento adicional de un microscopio consta de un armazón con un soporte que sostiene el material examinado y de un mecanismo que permite acercar y alejar el tubo para enfocar la muestra. Los especimenes o muestras que se examinan con un microscopio son transparentes y se observan con una luz que los atraviesa; se suelen colocar sobre un rectángulo fino de vidrio. El soporte tiene un orificio por el que pasa la luz. Bajo el soporte se encuentra un espejo que refleja la luz para que atraviese el espécimen. SISTEMA ÓPTICO M. ÓPTICO * Lentes (ocular y objetivo) SISTEMA MECÁNICO * Engranajes para enfocar (tornillos Macro y Micrométricos) * CONDENSADOR (concentra la luz) SISTEMA DE ILUMINACIÓN * FUENTE DE LUZ (ESPEJO,ETC.) * DIAFRAGMA ( Cantidad de luz) MICROSCOPIO ELECTRÓNICO La potencia amplificadora de un microscopio óptico está limitada por la longitud de onda de la luz visible. El microscopio electrónico utiliza electrones para iluminar un objeto. Dado que los electrones tienen una longitud de onda mucho menor que la de la luz, pueden mostrar estructuras mucho más pequeñas. La longitud de onda más corta de la luz visible es de alrededor de 4.000 ángstrom (1 ángstrom equivale a 0,0000000001 metros). La longitud de onda de los electrones que se utilizan en los microscopios electrónicos es de alrededor de 0,5 ángstrom. Todos los microscopios electrónicos cuentan con varios elementos básicos. Disponen de un cañón de electrones que emite los electrones que chocan contra el espécimen, creando una imagen aumentada. Se utilizan lentes magnéticas para crear campos que dirigen y enfocan el haz de electrones, ya que las lentes convencionales utilizadas en los microscopios ópticos no funcionan con los electrones. El sistema de vacío es una parte relevante del microscopio electrónico. Los electrones pueden ser desviados por las moléculas del aire, de forma que tiene que hacerse un vacío casi total en el interior de un microscopio de estas características. Por último, todos los microscopios electrónicos cuentan con un sistema que registra o muestra la imagen que producen los electrones. Hay dos tipos básicos de microscopios electrónicos: el microscopio electrónico de transmisión (Transmisión Electrón Microscope, TEM) y el microscopio electrónico de barrido (Scanning Electrón Microscope, SEM). Un TEM dirige el haz de electrones hacia el objeto que se desea aumentar. Una parte de los electrones rebotan o son absorbidos por el objeto y otros lo atraviesan formando una imagen aumentada del espécimen. Para utilizar un TEM debe cortarse la muestra en capas finas, no mayores de un par de miles de ángstrom. Se coloca una placa fotográfica o una pantalla fluorescente detrás del objeto para registrar la imagen aumentada. Los microscopios electrónicos de transmisión pueden aumentar un objeto hasta un millón de veces. ESQUEMA DE DIFERENTES MICROSCOPIOS 3 PASOS BÁSICOS PARA MANEJAR EL MICROSCOPIO ÓPTICO 1) ILUMINAR EL CAMPO DEL MICROSCOPIO 2) COLOCAR EL PREPARADO . 3) USAR EL OBJETIVO DE MENOR AUMENTO GIRANDO EL REVOLVER. 4) DESCENDER EL OBJETIVO CON EL MACROMÉTRICO HASTA OBTENER UNA IMÁGEN BORROSA . 5) CORREGIR CON EL MICROMÉTRICO HASTA QUE QUEDE NÍTIDA LA IMÁGEN. 6) SI USA UN OBJETIVO DE MAYOR AUMENTO GÍRELO DIRECTAMENTE SIN SUBIR NUEVAMENTE EL TUBO DEL MICROSCOPIO Y AJUSTE EL MICROMÉTRICO . IMÁGENES DE LOS CORTES EL CORTE HISTOLOGICO FORMA PARTE DE UNA ESTRUCTURA TRIDIMENSIONAL .AL M.O. (MICROSCOPIO ÓPTICO) , SOLO VEMOS UNA IMÁGEN PLANA POR DONDE PASÓ EL CORTE . PREPARADOS HISTOLOGICOS LAS CÉLULAS Y LOS TEJIDOS EN LOS PREPARADOS HISTOLÓGICOS REALIZADOS PREVIAMENTE ESTÁN MUERTOS. ETAPAS DE LA REALIZACIÓN DE UN PREPARADO HISTOLOGICO : FIJACIÓN, CONSERVA LA FORMA DE LAS ESTRUCTURAS CELULARES . INCLUSIÓN , SOLDIFICA LA PIEZA PARA PODER CORTARLA . CORTE , SE REALIZA EN UNA MÁQUINA QUE CORTA CAPAS MUY FINAS DEL MATERIAL LLAMADA "MICRÓTOMO " . COLORACIÓN , LOS TEJIDOS Y LAS CÉLULAS NO TIENEN COLORES , ES NECESARIO COLOREARLOS PARA DISTINGUIRLOS MEJOR . LOS COLORANTES MÁS USADOS SON : HEMATOXILINA .- COLORANTE BÁSICO QUE TIÑE DE COLOR AZUL VIOLETA LAS PARTES ALCALINAS, POR ELLO TAMBIÉN ES CONOCIDO COMO COLORANTE BÁSICO . EOSINA .- COLORANTE ÁCIDO QUE TIÑE DE COLOR ROSADO A ROJO SEGÚN LA INTENSIDAD DE LA ACIDEZ DE LA ESTRUCTURA , POR ELLO TAMBIÉN ES CONOCIDO COMO COLORANTE ACIDÓFILO . Actividad de laboratorio 3 MANEJO DEL MICROSCOPIO OBSERVACIÓN DE CÉLULA Y NOCIONES DE DIBUJO HISTOLÓGICO. Actividad de laboratorio 3 ESTA ACTIVIDAD NOS PERMITIRÁ : Aprender a manejar el microscopio óptico . Visualizar tejidos y células . Diferenciar distintos tipos celulares , y reconocer estructuras intracelulares, (citoplasma , núcleo,). ACTIVIDADES EN EL LABORATORIO EL OBJETIVO DEL PRACTICO DE HOY ES QUE TE FAMILIARICES CON EL INSTRUMENTO , RECONOZCAS LOS DIFERENTES AUMENTOS Y DESCUBRAS DONDE ESTÁN LAS CÉLULAS EN UN TEJIDO . TAMBIEN QUE OBSERVES DIFERENTES FORMAS DE CÉLULAS QUE SE RELACIONAN SIEMPRE CON SU FUNCIÓN . 5 RECUERDA SIEMPRE QUE LO QUE MÍRAS SE ENCUENTRA EN DOS DIMENSIONES , Y EL OBJETO VERDADERO QUE OBSERVAS TIENE 3 DIMENSIONES. NO IMPORTA QUE PREPARADO ELEGISTE PARA VER , UNA VEZ COLOCADO EN EL MICRO , ORIENTA LA LUZ Y COLOCA EL OBJETIVO DE MENOR AUMENTO, TRATA DE ENFOCAR LA IMAGEN . AL PRINCIPIO SE VERÁ BORROSO , A MEDIDA QUE TE ACERQUES AL FOCO DEL PREPARADO SE NOTARÁ LA NITIDEZ . SEGURAMENTE LO PRIMERO QUE VEAS TE DESILUCIONE, ESTÁS MIRANDO A PEQUEÑO AUMENTO (OBJETIVO DE 10 ,15 o 20 ), POR LO QUE MUY PROBABLEMENTE LAS CÉLULAS SE VEAN COMO PUNTOS CASI IMPERCEPTIBLES. NO TE DESMORALICES , OBSERVA EN GENERAL EL PREPARADO MOVIÉNDOLO LENTAMENTE , MUEVE EL MICROMÉTRICO PARA LOGRAR LA MEJOR NITIDEZ . LUEGO DE ESTO ,SIN MOVER EL MACROMÉTRICO , CAMBIA AL OBJETIVO DE MEDIANO AUMENTO , TRATA DE ENFOCARLO PUES AL PRINCIPIO SE VERÁ BORROSO . TAL VEZ TE CUESTE MÁS ENCONTRAR EL FOCO EN ESTE OBJETIVO ASÍ QUE PROCEDE MUY LENTAMENTE . CUANDO ENFOQUES , VERÁS QUE SE OBSERVAN UNOS PUNTITOS AZULES OBSCUROS , DEBE HABER GRAN CANTIDAD DE LOS MISMOS .ESOS SON LOS NÚCLEOS DE LAS CÉLULAS . EL CITOPLASMA ES LA SUSTANCIA QUE SE ENCUENTRA ALREDEDOR DE ELLAS , PERO NO VAS A VER CLARAMENTE LOS LÍMITES DEL CITOPLASMA Y MUCHO MENOS LA MEMBRANA CELULAR POR QUE ES MUY FINA . OBSERVA LA FORMA DE LAS CÉLULAS QUE ESTAS VIENDO , ALGUNAS SON REDONDEADAS , OTRAS PUDEN SER ESTRELLADAS ALARGADAS, EN FÍN , LAS FORMAS PUEDEN VARIAR MUCHO . UNA VEZ QUE UBIQUES LAS CÉLULAS , Y SOLO CUANDO LAS UBIQUES , LAS OBSERVES, Y DECIDAS QUE FORMA GENERAL TIENEN ,(REDONDEADA, CUADRADA ,RECTANGULAR , ESTRELLADA, ETC.) ,RECIÉN AHÍ COMIENZA A TRATAR DE DIBUJARLA . NO TRATES DE DIBUJAR CUALQUIER COSA QUE APAREZCA POR EL OCULAR DEL OBJETIVO , SI NO ESTAS SEGURO/A PREGUNTA , YO VOY A ESTAR POR ALLÍ . NUNCA DIBUJES LO QUE NO ENTIENDAS . (UNA VEZ UN ALUMNO DIBUJÓ ALGO QUE NO ENTENDÍA , Y RESULTÓ QUE ESTABA DIBUJANDO SU PROPIO OJO POR UN DEFECTO DE ENFOQUE DEL MICROSCOPIO ) LA OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA NECESITA PACIENCIA , SERENIDAD , CURIOSIDAD .DEBES TRATAR DE DISFRUTAR DE LA POSIBILIDAD DE VER ALGO QUE SÓLO ALGUNOS TENEMOS LA FORTUNA DE VER Y ENTENDER . OBSERVAR AL MICROSCOPIO ES COMO APRENDER A VER DE NUEVO. EL CITOPLASMA DE LAS CÉLULAS PUEDE TENER DIFERENTES COLORES , ROSADO , ROJO , AZUL O VIOLETA . TAMBIEN DEBES OBSERVAR COMO ESTÁN AGRUPADAS LAS CÉLULAS: DESORDENADAS Y AL AZAR EN FILA FORMANDO ACÚMULOS EN FORMA DE BARRERA , ETC. TAL VEZ PUEDAN ESTA FORMANDO ESTRUCTURAS , (CIRCUNFERENCIAS, AROS , ÓVALOS). OBSERVAR EL AGRUPAMIENTO CELULAR ES MUY IMPORTANTE POR QUE TE AYUDARÁ A DIBUJAR EL CONJUNTO DE LAS CÉLULAS . SIEMPRE CONVIENE QUE TENGAS COLORES ROJO ,ROSADO , AZUL O VIOLETA , QUE SON LOS QUE MÁS VEMOS EN ESTOS PREPARADOS . PUEDE SER QUE EN EL PREPARADO HAYA VARIOS TIPOS DE CÉLULAS , EN ESE CASO SE PUEDEN DIFERENCIAR POR EL COLOR QUE TIENEN , LA FORMA DE LAS MISMAS , O EL TAMAÑO DE ELLAS O DE SUS NÚCLEOS. SI PIENSAS QUE SE PODRÍAN VER MÁS CERCA LAS CÉLULAS Y TIENES UN OBJETIVO DE MUCHO AUMENTO ,(NO TODOS LOS MICROS DE CLASE TIENEN OBJETIVOS DE GRAN AUMENTO), PUEDES INTENTAR USARLO , PARA ESO VUELVE A GIRAR EL REVOLVER Y COLOCA EL OBJETIVO MÁS LARGO , NORMALMENTE NO HAY QUE MOVER EL MACROMÉTRICO PERO EN ALGUNOS MICROS SE PUSIERON OBJETIVOS QUE NO SON DE ELLOS , POR LO QUE SI VES QUE EL OBJETIVO VA A CHOCAR CONTRA EL PREPARADO O LA PLATINA ,LEVANTA UN POCO EL MACROMÉTRICO . CUANDO USAS UN OBJETIVO DE MUCHO AUMENTO NECESITAS , MUCHA MÁS LUZ , Y EL FOCO ES CRÍTICO , ESTO QUIERE DECIR QUE ES MUY DIFÍCIL DE ENCONTRARLO POR QUE TIENE UNA DISTANCIA MUY PEQUEÑA . OTRO PROBLEMA ES QUE EL OBJETIVO QUEDA CERCA DEL PREPRADO Y DISTRAIDO PUEDES ROMPERLO . PARA EVITAR ESTO TE RECOMIENDO QUE LOS OBJETIVOS DE GRAN AUMENTO LOS COLOQUES TOCANDO EL PREPARADO MIRANDO PRIMERO POR FUERA DEL OCULAR, Y LUEGO OBSERVANDO POR EL OCULAR LO LEVANTES MUY LENTAMENTE HASTA DAR CON EL FOCO. CUANDO ENCUENTRES EL FOCO AJÚSTALO CON EL MICROMÉTRICO. LAS CÉLULAS SE VERÁN CON ESTE OBJETIVO MUY PARECIDAS A COMO TE LAS IMAGINABAS . VERÁS DETALLES EN EL NÚCLEO ,(GRUMOS DE CROMATINA), Y TAL VEZ EL NUCLEÓLO,(UN PUNTO NÍTIDO OBSCURO DENTRO DEL NÚCLEO ). RECUERDA QUE A ESTE AUMENTO UN MILÍMETRO QUE CORRAS EL PREPARADO EQUIVALE A METROS DE DESPLAZAMIENTO , POR LO QUE ACTÚA DESPACIO . DEBES DIBUJAR POR LO MENOS DOS TIPOS CELULARES , SI UTILIZAS DISTINTOS AUMENTOS , COLOCA LOS MISMOS AL LADO DE LOS DIBUJOS PARA LUEGO TENER UNA IDEA DEL TAMAÑO ENTRE LAS DISTINTAS CÉLULAS. SUERTE .. . ACTIVIDAD DOMICILIARIA REALIZA DIBUJOS DE LOS PREPARADOS QUE OBSERVASTES INDICANDO DONDE SE ENCUENTRAN LAS CÉLULAS Y SUS NÚCLEOS. 7