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Pregunta: Identifique los mecanismos que permiten el transporte espermático dentro del tracto femenino y explique qué papel juega la motilidad del espermatozoide. Teniendo en cuenta el tiempo que requieren los espermatozoides para transportarse al oviducto y capacitarse: cuánto tiempo antes de la ovulación deberíamos inseminar una vaca? Respuesta: El proceso de transporte espermático en el tracto reproductivo de la hembra es un fenómeno complejo e interactivo de los espermatozoides entre ellos mismos y con las secreciones y actividad del tracto reproductor femenino. La eficiencia del transporte del esperma en bovinos se asocia con cambios en el control endócrino del tracto reproductor femenino poco antes y durante el estro. El estrógeno promueve la secreción de un mucus cervical muy fluido y abundante, y estimula fuertes contracciones musculares. Se pueden diferenciar 2 fases en el transporte espermático: a) fase rápida del transporte espermático o transporte inmediato: en esta fase el tracto reproductor femenino posee los mecanismos fisiológicos para transportar los espermios al oviducto sin la participación activa de ellos (no esta claro si los espermios son dañados durante su rápido ascenso al oviducto o si los espermios muertos y dañados son los sujetos al transporte rápido). Durante esta fase, los espermios móviles podrían adherirse al epitelio o introducirse en los pliegues o glándulas del cervix y útero, evitando su propulsión por el útero. b) fase prolongada del transporte espermático: durante esta fase los espermios capaces de fertilizar ovocitos llegan al oviducto alrededor de 8 hs después del servicio. El esperma es mantenido en la región caudal del istmo de oviducto por unas 18 hs o más hasta el momento de la ovulación (la permanencia en este lugar se debería a una combinación de características anatómicas y fisiológicas del mismo, incluyendo un lumen restrictivo, edema, contracciones dirigidas hacia al útero y posiblemente también a una depresión temporaria de la motilidad espermática) , luego los espermatozoides avanzan hasta el sitio de fertilización cerca de la unión del istmo con la ampolla. A su vez, las altas concentraciones de estradiol durante el celo van a estimular la contracción del miometrio. Además, las PGF que y PGE2) causan un aumento del tono yse encuentran en el semen (PGF2 motilidad del útero y el oviducto. Las contracciones intermitentes de la musculatura uterina van a propulsar los espermatozoides en ambas direcciones, anterior y posterior. Los fluidos uterinos secretados en el lumen del tracto femenino también van a servir de vehículo para transporte. La motilidad espermática es de gran importancia para tener una exitosa fertilización, ya que los espermios móviles aparentemente se adhieren al epitelio del tracto reproductivo, probablemente penetrando en las glándulas o en los pliegues de la mucosa del útero y criptas del cervix, disminuyendo de esta manera su tasa de eliminación. Luego los espermios pasan a la unión utero-tubárica y de ahí al segmento caudal del istmo, es decir que estos lugares (cervix, unión utero-tubárica e istmo) actúan como reservorios de espermios (barreras anatómicas), de las cuales los espermios se van liberando de manera secuencial. Por último, los espermios capaces de fertilizar, se mueven al sitio de fertilización del istmo y ampolla. Durante este paso por el tracto reproductor femenino, los espermatozoides requieren de un proceso de "capacitación espermática" (adquisición de la capacidad fertilizante), en la cual ocurren tres tipos de cambios: reacción acrosómica, membrana fusionable, y por último hay un cambio en los movimientos de la cola del espermatozoide ("hiperactivación de la cola"), en la cual las ondulaciones regulares son reemplazadas por movimientos más episódicos con mayor amplitud que empujan al espermatozoide hacia delante (motilidad progresiva sostenida), la cual es esencial para pasar las capas del ovocito ovulado. La vaca debería ser inseminada de 12 a 16 horas antes de la ovulación. Pregunta: Explique fisiológicamente y anatómicamente porqué es indispensable depositar en el cuerpo del útero aproximadamente 10.000.000 de espermatozoides mótiles en una IA. Respuesta: La explicación a esto se debe a que en el tracto reproductivo femenino existen varios lugares que actúan como barreras anatómicas, estos son el cervix, la unión úterotubárica y el istmo. En el caso de la unión útero-tubárica esta reduce el número de espermatozoides que entran al oviducto en 2 o 3 magnitudes, y en el caso del istmo este realiza una completa restricción de la migración hacia la parte superior del oviducto hasta la ovulación, esto se debe a la presencia de un lumen restrictivo, edema, y contacciones dirigidas hacia el útero. También hay grandes perdidas de espermatozoides debido al transporte retrógrado, contracciones del miométrio, fluidos uterinos y fagocitosis. Es decir, que tenemos una gran perdida de espermatozoides desde que lo deposiyamos en el cuerpo del útero hasta que llegan al sitio de fertilización (ampolla); hay trabajos que documentan que luego de 24 hs de haber inseminado con una pajuela de 10 millones de espermatozoides se encuentran en el útero solamente 10000 espermas. Además a esto habría que sumarle las perdidas debido a la manipulación y deposición del semen (el lugar de siembra del semen tiene que ser estrictamente el cuerpo del útero, ya que si la siembra es en el cervix las perdidas serán mucho mayores). Pregunta: Qué factores cree usted que debería tener en cuenta si quisiera extraer el embrión de una hembra y transferirlo al útero de otra para que determine el reconocimiento materno de la gestación en ella? Respuesta: Básicamente la transferencia embrionaria es pasar un embrión de una vaca donante a una vaca receptora. Por lo tanto una de las tantas cosas que hay que tener en cuenta para que la transferencia tenga éxito, y puntualmente para que la receptora reconozca la gestación, es la sincronicidad en cuanto a los días del ciclo de la vaca receptora y la edad del embrión (estadio de desarrollo) de la vaca donante, es por eso que en el caso de la transferencia a celo detectado (receptora) la siembra del embrión se hace a los 7-7,5 días de detectado el celo, y con un embrión que se encuentre en un estadio de desarrollo de mórula o blastocisto temprano(7-8 días de edad). También hay que tener en cuenta que la receptora tenga un cuerpo lúteo funcional, y que la siembra del embrión se haga en el cuerno ipsilateral al cuerpo lúteo. Vale la pena mencionar que el embrión es el responsable de garantizar su supervivencia , es decir que pude ser expulsado rápidamente por mecanismos inmunológicos como un tejido extraño o bien logra informar a su madre que esta presente y se transforma en prioridad absoluta; es por eso que en el útero debe ocurrir un ajuste inmunológico para evitar la destrucción inmunológica del embrión. A su vez en el trofoblásto esta alterada la expresión de los antígenos del complejo mayor de histocompatibilidad (comparada con la mayoría de los tejidos). Durante la preñez se crea un ambiente uterino en el cual los tejidos maternos y el trofoblásto secretan moléculas linfocito-inhibitorias que disminuyen la reacción inmune. La acción antiluteolítica del embrión se ejerce por medio de una o varias proteínas que pueden bloquear la síntesis de por la mucosa uterina, estas proteínas están reguladas por elPGF2 interferón-tau (el cual es producido por las células del trofoectodermo durante el período de implantación). Su función principal es informar de la presencia del embrión y rescatar el CL de la luteólisis para que se transforme en CL de la gestación. Otra proteína que interviene indirectamente en el mantenimiento del CL es la proteína específica de la preñez B, que induce la secreción de PGE2, con acción luteotrófica y luteoprotectora, y producida por las células binucleadas del ectodermo trofoblástico. Por último y para resumir los factores a tener en cuenta son: sincronización de la vaca donante y receptora, receptora con CL funcional y de calidad, el lugar de descarga del embrión debe ser en el cuerno del útero ipsilateral el CL, día del ciclo de la receptora, estadío de desarrollo del embrión y calidad del embrión entre otros.