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Manual de biología de procariotas PRACTICA 11 Antibiograma Introducción Se entiende por antibiograma el estudio de la sensibilidad "in vitro" de las bacterias a los antibióticos, aunque se extiende a algunos quimioterápeuticos. El antibiograma es un método de diagnóstico rápido y preciso, ya que no se puede predecir la susceptibilidad de las bacterias, hongos y virus a los agentes antimicrobianos, con frecuencia es necesario estudiar la sensibilidad individual de cada patógeno a estas drogas, pudiéndose elegir entonces el agente apropiado que provee mayores posibilidades de una evolución favorable. Objetivos 1. Que el alumno conozca el efecto que tienen las bacterias ante los antibióticos. Material de laboratorio por equipo Material del Equipo Pinzas Cinta adhesiva transparente Círculos de papel filtro estéril Marcador indeleble o lápiz graso Diferentes tipos de antibióticos Cultivo bacteriológico Espátula de vidrio Alcohol 100% Cajas de Petri con AN Actividad practica Método de la difusión en medio sólido 1. Se siembra el microorganismo a estudiar esparciéndolo por toda la caja de Petri. 2. Las pinzas de disección se colocan en un vaso precipitado con alcohol al 96%. 3. Se toman las pinzas de disección se pasan por la llama del mechero y se toma un disco de papel filtro estéril y 4. sobre la superficie del medio se coloca el disco (observar figura) 5. Se repite los paso 2,3 y 4 por cada disco 6. Se le agrega a cada disco 5 l de un determinado antibiótico o quimioterápeutico. Nota: cuida la presentación del trabajo, la ortografía y la redacción, recuerda que es un entrenamiento para tu carrera profesional y/o científica. mmgj Manual de biología de procariotas 7. Para que la concentración de antibiótico que impregna los discos no sea ni excesiva ni insuficiente, realizar un banco de diluciones. La concentración de 100 g/ml ya es adecuada para trabajar. 8. Incubar a 37C por 24 hrs. C Cl Rf P St T E Paso 4. Se muestra la forma como se colocan los discos en la superficie del medio de cultivo. Cl, cloranfenicol; P, penicilina; T, tetraciclina; E, eritromicina; St, estreptomicina; Rf, rifampicina; C, control. Resultados Reportar los resultados del antibiograma. Recopilar sus resultados en el cuadro incluyendo el diámetro del halo de inhibición. Discutir en cada caso cuáles fueron el rango de sensibilidad del microorganismo ante las diferentes drogas. (resistente, intermedia y sensible) de acuerdo a el diámetro del halo de inhibición. Discutir en cada caso el rango de acción de las drogas con los diferentes microorganismos. (de amplio espectro, de bajo espectro) Nota: cuida la presentación del trabajo, la ortografía y la redacción, recuerda que es un entrenamiento para tu carrera profesional y/o científica. mmgj Manual de biología de procariotas Bacteria 1 Bacteria 2 Esquema Diámetro del halo para: Penicilina Cloranfenicol Eritromicina Estreptomicina Tetraciclina Rifampicina Cuestionario 1. ¿Cuales son las estrategias para disminuir la aparición de resistencias a los antibióticos? 2. Clasifica a los antimicrobianos usados en la práctica de acuerdo a su estructura química y mecanismo de acción en la estructura celular. 3. ¿Cuáles son las bases para la utilización clínica de los antimicrobianos? 4. ¿Qué otros métodos se pueden utilizar para la valoración y selección de antimicrobianos? Nota: cuida la presentación del trabajo, la ortografía y la redacción, recuerda que es un entrenamiento para tu carrera profesional y/o científica. mmgj