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División de Ciencias Biológicas y de la Salud
Ingeniería Bioquímica Industrial
Ingeniería Enzimática
Trimestre 2015-I
18 de febrero de 2015
1. Se ha determinado la velocidad inicial de una reacción catalizada por una enzima
(E0=10 nM) para diversas concentraciones de sustrato. Los datos obtenidos son:
[S] (µM)
30
50
100
300
600
1000
V (µM min-1)
0.44
0.68
1.14
2.52
3.52
3.70
a. Calcula Vmax y KM utilizando un método de regresión lineal
b. Calcula kcat
k
c. Determina el coeficiente de especificidad,   cat
KM
2. En un experimento donde se presenta inhibición por sustrato, se midió la tasa inicial de
una reacción enzimática, v, a varias concentraciones de substrato [S]. Con los datos
donde se observó incremento de la actividad, se graficó 1/v versus 1/[S] y se observó
una línea recta con ordenada al origen (b) es 0.0032 M-1 min y la pendiente (m) es
7160.8 min. El punto de inflexión de la velocidad se observó a una concentración de
sustrato de 1000 mM.
a) ¿Cuál es el valor de KS y el de Vmax para esta reacción enzimática?
b) ¿Cuál es el valor de KI para esta enzima?
3. Considere una reacción enzimática, en presencia de un inhibidor competitivo. A una
concentración de sustrato ([S]) de 4.28x10-3 M, la velocidad observada en presencia del
inhibidor es el 80 % de la velocidad observada sin inhibición, es decir, una actividad
relativa igual a 0.80. Calcule la constante de Michaelis (KM) si la constante de
inhibición (Ki) es 1.7 x 10-5 M y la concentración del inhibidor [I] es 7.5 x 10-5 M.
4. Calcule la concentración de inhibidor no-competitivo, [I], que produce 70% de
inhibición de una reacción catalizada enzimáticamente si la constante de inhibición es
KI = 6.5x10-5 M.