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Curso de Métodos electrofisiológicos en
Neurociencia
Curso teórico, práctico y demostrativo, cuyo objetivo es capacitar al
alumno en el entendimiento de los fundamentos y el uso de
metodologías de registros dinámicos de la actividad neural. Se hará
énfasis en el registro electrofisiológico in vitro, utilizando como
modelo neuronas sensoriales en cultivo y rebanadas de hipocampo y
de tronco encéfalo. En neuronas sensoriales primarias en cultivo se
realizarán además registros de actividad eléctrica neuronal y
registros simultáneos de imagen de Ca2+ intracelular y temperatura,
además del registro extracelular ex vivo de neuronas
termorreceptoras corneales. Se realizará expresión y registro de
canales iónicos en sistemas heterólogos y registros in vivo de
actividad eléctrica neuronal en la médula espinal.
Objetivos: Familiarizar al alumno con los usos, las ventajas y las
limitaciones de las diversas técnicas de registro electrofisiológico, con
énfasis en la aplicación de las técnicas de imagen de calcio, de registro
extracelular, patch-clamp bajo voltaje y corriente controlados, y
voltage clamp con dos electrodos.
Perfil del Estudiante: Estudiantes regulares de programas de
Doctorado o Magister en áreas afines, ya sea de la USACH u externos.
Plan de estudio:
UNIDAD I: Técnicas electrofisiológicas básicas, expresión heteróloga
de canales de iones, imagen de calcio: Aplicaciones en Neurociencia
(TEORÍA). N° HORAS: 10 Horas pedagógicas.
-Introducción. Conceptos básicos de biofísica y de registro de
señales eléctricas en membranas biológicas. Registro extracelular e
intracelular.
-La técnica de patch-clamp. Expresión y registro de canales iónicos
en sistemas heterólogos. Cultivos neuronales. Rebanadas de
hipocampo y de tronco encéfalo.
UNIDAD II: Técnicas electrofisiológicas básicas, expresión
heteróloga de canales de iones, imagen de calcio: Aplicaciones en
Neurociencia (PRÁCTICA). N°HORAS: 96 Horas pedagógicas.
Módulo II.1.: Expresión heteróloga de canales de iones.
- Expresión estable del canal TRPM8 en células HEK293 y manejo de
línea celular.
Módulo II.2.: Registro de la actividad de canales TRPM8 en línea de
expresión estable utilizando imagen de calcio.
- Registro de la actividad de canales TRPM8 en línea de expresión
estable, utilizando la técnica de imagen de calcio, con Fura 2 como
indicador de calcio.
Módulo II.3.: Registro de la actividad de canales TRPM8 en una línea
de expresión estable utilizando la técnica de patch clamp.
- Registro de la actividad de canales TRPM8 en una línea de expresión
estable, utilizando la técnica de patch-clamp en la configuración de
célula completa, en su modalidad de voltaje controlado.
Módulo II.4.: Registro de la actividad de canales P2Xs en ovocitos
utilizando la técnica de voltage clamp con dos electrodos.
- Registro de la actividad eléctrica de canales P2X2 y P2X4 en ovocitos
de Xenopus utilizando la técnica de voltage clamp con dos electrodos.
Módulo II.5.: Registro de la actividad eléctrica de neuronas sensoriales
primarias individuales en cultivo y ex vivo.
- Cultivo de neuronas sensoriales de ganglios trigeminales de ratón y
termorreceptoras de frío corneales ex vivo.
- Registro de la actividad eléctrica de neuronas individuales en cultivo
utilizando la técnica de patch-clamp, tanto en la configuración de
célula adherida como en la configuración de célula completa, en sus
modalidades de voltaje controlado y corriente controlada. Registro
extracelular de la actividad eléctrica de termorreceptoras de frío
corneales ex vivo.
Módulo II.6.: Registro extracelular de la actividad eléctrica neuronal
en rebanadas de hipocampo.
- Preparación de rebanadas de hipocampo de rata.
- Estimulación y registro de la actividad eléctrica de neuronas
hipocampales en rebanadas. Inducción de potenciación de larga
duración (LTP) y depresión de larga duración (LTD)
Módulo II.7.: Registro de la actividad eléctrica neuronal en rebanadas
de tronco encéfalo.
- Preparación de rebanadas de tronco encéfalo de ratón y sistema
nervioso central aislado.
- Estimulación y registro de la actividad eléctrica de neuronas de
tronco encéfalo
Módulo II.8.: Registro intracelular de neuronas espinales in vivo.
- Preparación de animales para registro in vivo
- Estimulación y registro de la actividad eléctrica de neuronas
espinales en ratas anestesiadas.
Metodología: Cada módulo tiene una prueba final con nota (1.0 a 7.0),
Auditorías en práctica - informe con nota (1.0 a 7.0), además se exigen
trabajos prácticos grupales de desarrollo en sus trabajos (con recogida
de datos reales).
Cuerpo Académico:

Coordinador Académico:
o Dr. Rodolfo Madrid.

Docentes:
o Dr. Patricio Rojas
o Dr. Rodolfo Madrid
o Dra. María Pertusa
o Dr. Carlos Rozas
o Dr. Bernardo Morales
o Dr. Alejandro González
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Dr. Juan Pablo García-Huidobro
Dr. Elías Leiva
Dr. Jaime Eugenín
Dra. Isabel Llona
Dr. Sebastián Beltrán
Dr. Luis Constandil.
Dr. Gonzalo Ugarte
Requisitos de Ingreso: Ser estudiante regular de posgrado, Magister
o Doctorado.
Requisitos de Aprobación: Aprobar el curso con nota mínima final
4,0 (escala de 1.0 a 7.0) y tener un porcentaje de asistencia de 90%.
Valor: $100.000
Modalidad: Presencial
Jornada: Ambas
Horario: Lunes a Viernes, 9:00 a 18:00hrs
Duración: 106 horas
Opciones de descuento: 10% a ex alumnos Universidad de
Santiago
Formas de pago: Efectivo, Cheque
Número de Vacantes: 12
Fecha Inicio Clases: 17/08/2015
Fecha Término Clases: 31/08/2015
Facultad de Química y Biología
Departamento de Biología
Director o Coordinador del programa: Carlos Rozas Salas
Consultas: Mariela Pilquiñir
22 7181126
mariela.pilquinir@usach.cl
http://www.quimicaybiologia.usach.cl/programa/doctorados/d
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