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Tlamati Sabiduría Volumen 7 Número Especial 1, Septiembre 2016 3er. Encuentro de Jóvenes en la Investigación de Bachillerato-CONACYT Acapulco, Guerrero 22-24 de Septiembre 2016 Memorias Cuantificación de bacterias resistentes al hipoclorito de sodio provenientes del sistema de abastecimiento de agua en Chilpancingo, Gro. Mariela Lizbeth TejedorJavier (Becaria) Lis_14_12@hotmail.es Unidad Académica Preparatoria No. 26, Universidad Autónoma de Guerrero. Dra. Jeiry Toribio Jiménez (Asesora) Jeiryjimenez2014@gmail.com Unidad Académica de ciencias químico-Biológicas, Universidad Autónoma de Guerrero. QBP. Rogelio Gabriel Torres Ramos (Co-Asesor) Rogatora17@gmail.com Unidad Académica de ciencias químico-Biológicas, Universidad Autónoma de Guerrero. Tesista Liber Amauri Pacheco Bello (Co-Asesor) apache.180@hotmail.com Unidad Académica ciencias químico-biológicas, Universidad Autónoma de Guerrero Introducción La eliminación de los patógenos se pueden lograr de muchas formas, pero la más común es mediante la adición de hipoclorito de sodio1. Para desinfectar el agua que reciben diariamente los habitantes de la ciudad de Chilpancingo el mejor agente químico utilizado es el hipoclorito de sodio (cloro), ya que ayuda a eliminar los microorganismos que pueden ser nocivos para la salud. El cloro funciona cuando entra en contacto directo con los microorganismos. Si el agua contiene lodo, 1 Figura 1.- Manatial Omiltemi Según el artículo “medición del cloro residual en el agua” existen muchas formas para mejor la calidad del agua como la filtración y la decantación. 663 Tlamati Sabiduría Volumen 7 Número Especial 1, 2016 las bacterias se pueden esconder dentro del mismo. La mayoría de las enfermedades se relacionan al consumo de agua contaminada. En países en desarrollo el agua es el principal transmisor de enfermedades, siendo la diarrea la causa principal de muerte infantil.2 Actualmente en el centro poblacional de Chilpancingo el servicio de agua es través de la Comisión de Agua Potable y Alcantarillado de Chilpancingo, que realiza la operación mediante subsidios tanto federal, estatal y municipal.3 Los cuatro subsistemas que abastecen a la ciudad de Chilpancingo son Acahuizotla, Omiltemi, Mochitlán y Peña Rajada (varias fuentes pequeñas); en estre trabajo solo estudiaremos dos: Omiltemi y Acahuizotla, el primero está constituido por el aprovechamiento de manantiales localizados al poniente de la ciudad a una elevación de 2150 msnm, el agua es captada y conducida hasta el tanque llamado Amelitos y de ahí se distribuye a la parte norte y nororiente de la ciudad.4 El subsistema de Acahuizotla aprovecha el agua proveniente de la gruta de Acahuizotla, encontrada en el sur de la ciudad a una elevación de 730 msnm es conducida por bombeo hasta el denominado Salto de Valadéz y el tramo conducido por gravedad Figura 2.- Manantial Acahuizotla llega hasta la red directa de distribución y a veces al tanque Margarita Viguri.5 El subsistema de Omiltemi cuenta con la cloración del agua que abarca la mayor parte de su área de abastecimiento. Para el sistema de Acahuizotla el punto de cloración se encuentra en la caja de cambio de Salto de Valadéz. En el sitio de entrega al público más cercano al punto de cloración se verifica que los niveles de cloro estén dentro de los límites establecidos (entre 0,5 y 0,2 mg/L); en el punto más lejano de la tubería, donde probablemente los niveles de cloro residual sean los más bajos. Si los niveles de cloro se encuentran por debajo de 0,2 mg/L, es necesario añadir más cloro en un punto intermedio de la red de tuberías.6 2 Según la UNICEF hay 4000 millones de casos de diarrea de los cuales 1.8 millones son mortales y más del 60% son niños menos de 5 años. 3 La comisión de Agua Potable y Alcantarillado abastece a una población de 170 00 habitantes. 4 El subsistema de Omiltemi abaste a las colonias del norte entre ellas Cuauhtémoc y Ampliación Lázaro Cárdenas. 5 El sistema de Acahuizotla aprovecha los manantiales: Naranjuelos, Yerbabuena, Iglesia Vieja y La imagen. 6 Guía técnica no. 11 de saneamiento, y salud. OMS 2009. 664 Memorias del 3er Encuentro de Jóvenes en la Investigación de Bachillerato-CONACYT Acapulco, Guerrero 22-24 de Septiembre 2016 El cloro debe estar en contacto con el agua, por lo menos, media hora para desinfectarla. El mejor momento para añadirlo es después de todos los otros procesos de tratamiento y antes de su almacenamiento y uso. La falsa seguridad que aporta la cloración llegó a su fin en 1993 cuando una epidemia trasmitida por un abastecimiento de agua en Malwaukee, EEUU, provocando 400 000 casos de Criptosporidiosis, una parasito intestinal que resiste a altas concentraciones de cloro 7. Las bacterias Gram negativas por lo general son más resistentes a los antisépticos y desinfectantes que las Gram positivas. Varias bacterias de interés se han encontrado en el agua cruda tales como Shigella, Salmonella, Vibrio Cholerae, Giarda, E. Coli y Cryptosporidium las cuales han presentado una considerable resistencia a la desinfección durante el tratamiento de agua potable. 8 Objetivos Cuantificar las Unidades Formadoras de Colonias bacterianas y su resistencia al hipoclorito de sodio, provenientes del sistema de abastecimiento en la ciudad de Chilpancingo, Gro. Metodología Se tomaron muestras en frascos estériles de diferentes distribuidoras de agua que surten a la ciudad de Chilpancingo y se transportaron al laboratorio de inmediato. Se prepararon cajas de agar nutritivo (Mueller Hinton BD), posteriormente se le agregó hipoclorito de sodio hasta obtener concentraciones de 1, 5 y 8 ppm respectivamente, estas se conservaron en refrigeración hasta su uso. De cada muestra se hicieron diluciones seriadas en solución salina estéril al 0.85% hasta 10-3. Se sembraron 100 a cada placa sin y con diferentes concentraciones de cloro por duplicado. Posteriormente se incubaron durante 24 horas a 37°C. Pasadas las horas de incubación, se revisaron las cajas y se notó crecimientos, se realizó un conteo y se expresó en UFC/ml, a todas las colonias se les realizó la morfología macroscópica y microscópica. 7 8 Aislamiento, identificación bioquímica y pruebas de cloro, en la red de distribución del acueducto de Bogotá Artículo: Microorganismos Patógenos de Interés, capitulo II. 665 Tlamati Sabiduría Volumen 7 Número Especial 1, 2016 Resultados. Los resultados obtenidos en base a las muestras de agua obtenidas y analizadas se lograron dectectar que varias bacterias son restistentes al hipoclorito de sodio que diariamente se usa para desinfectar. En la figura 1 se describen la UFC/ml de agua que son resitentes , es notorio que en 1ppm son mucho más bacterias siendo captadas 17 000 UFC en el PRD, mayor de 100 000 UFC en Omiltemi, 95 000 UFC en Salubridad , 22 000 UFC en Acahuizotla y 27 000 UFC en Garrafón, en cuanto al rubro de 8 ppm aún se notan la identificación de UFC en todas las muestras depués de aumentar la dosis de NaClO. A las bacterias más resistentes se le aplicó la tinción de Gram método que sirve para poder identficar si son bacterias Gram positivas o Gram negativas, dichas tinciones se leyeron en un microscopio optico. Muestra Control 1 ppm 5 ppm 8 ppm Tinción de Gram Acahuizotla 93 000 22 000 20 000 8 000 Estafilococos + PRD 214 000 17 000 6 000 3 000 Estafilococos + Omiltemi 152 000 >100 000 >100 000 19 000 Estafilococos + Garrafón 72 000 27 000 19 000 16 000 Estreptobacilos - Salubridad >100 000 95 000 54 000 38 000 Estafilococos + Tabla 1. Resistencia a hipoclorito de sodio En la fotografía 1 se pueden apreciar las evidencias del crecimiento de cepas de cada una de las tomas . Fotografía 1.- Crecimiento de cepas. a) representa la toma de Acahuizotla b) es la toma de la colonia PRD c) es de la toma de la colonia de Omiltemi d) es de la toma de garrafón e) es de la toma de la colonia de Salubridad. 666 Memorias del 3er Encuentro de Jóvenes en la Investigación de Bachillerato-CONACYT Acapulco, Guerrero 22-24 de Septiembre 2016 Conclusiones Las bacterias que presentaron más resistencia al cloro, son Gram positivas. Hay una diverisda de bacterias gram +, por ejemplo la bacteria Staphylococcus aureus que puede provocar, infecciones, intoxicaciones provocadas por la ingesta detoxinas termoestables, entre otras. Como estas hay mucho más bacterias que pueden causar muchos problemas de salud, en algunos casos es contralado por Figura 3.- Bacteria gram Positiva observada por microscopio. vacunas o tratamientos médicos pero en ocasiones, la población no tiene el recurso para pagar por ellas y en ciertos centros gratuitos tienen mucha escasez lo que provoca que la enfermedad llegue hasta la muerte. Se calcula que la contaminación del agua potable provoca más de 502 000 muertes por diarrea al año de los cuales 361 000 son niños menores de cinco años. Casi 240 millones de personas se ven afectadas por esquistosomiasis, una enfermedad grave y crónica provocada por lombrices parasitarias contraídas por exposición a agua infestada. Según la OMS en todo el mundo, al menos 1800 millones de personas se abastecen de una fuente de agua potable que está contaminada por heces. Referencias bibliográficas 1. http://www.unicef.org/spanish/wash/index_wes_related.html 2. http://www.lenntech.es/biblioteca/enfermedades/enfermedades-transmitidas-por-elagua.htm 3. https://www.ministeriodesalud.go.cr/gestores_en_salud/comision_agua_segura/legislacio n/CAS_reglamento_calidad_agua_potable.pdf 4. http://www.bvsde.paho.org/legislacion/mexico/nom-127-ssai.pdf 5. http://www.lenntech.es/biblioteca/enfermedades/enfermedades-transmitidas-por-elagua.htm#ixzz4EMIn6Dvn 6. http://www.ambientum.com/enciclopedia_medioambiental/aguas/Bacterias.asp 7. http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs391/es/ 8. OMS (2004) Guidelines for drinking water quality, 3RD ED., OMS, Ginebra 667 Tlamati Sabiduría Volumen 7 Número Especial 1, 2016 9. NOVA - PUBLICACIÓN CIENTÍFICA EN CIENCIAS BIOMÉDICAS - ISSN:17942470 VOL.6 NO. 10 JULIO - DICIEMBRE DE 2008:101-236. 10. Colombia Medica: Vol. 38. No. 2, 2007 (Abril-Junio). La resistencia de bacterias a antibióticos, antisépticos y desinfectantes, una manifestación de los mecanismos de supervivencia y adaptación. 11. RESISTENCIA A CLORO EN CEPAS DE Listeria monocytogenes AISLADAS DENTRO DE UNA PLANTA PROCESADORA DE ESPINACA. TESIS 12. Ismael Rosas Castillo: Gestión de la dotación de agua en Chilpancingo Gro. 13. Claudia Rocío Cote Coy: Aislamiento, identificación bioquímica y pruebas de cloro, en la red de distribución del acueducto de Bogotá. 668