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INSTITUTO DE ENSEÑANZA SUPERIOR Nº 29 “G A L IL E O G A L IL E O ” CARRERA: Agroindustria de los Alimentación CURSO: 3º Año ASIGNATURA: Microbiología de los Alimentos DOCENTES: Ing. Alberto Hack – Dr. Luis A. Canna Fundamentos En el momento actual, en el que no basta ya que los alimentos no posean gérmenes patógenos, sino que se exige que reúnan una calidad bacteriológica determinada y que cumplan las normas microbiológicas, es fundamental contar con técnicas adecuadas que permitan determinar las especies y grupos de bacterias presentes en los productos que se va a ingestar. Objetivos Los objetivos propuestos son: Conocer los procesos de evolución biológica de las bacterias Poder diferenciar los grupos de bacterias banales y patogénicas Conocer las técnicas microbiológicas e instrumental para poder diferenciar Establecer las condiciones operativas y sanitarias en la industria de la alimentación Contenido Unidad I Concepto de microorganismo. Taxonomía de los microorganismos. Formación y desarrollo de una especie por evolución biológica. Filogénia de los seres vivos. Niveles de organización biológica. Organismo procariota. Los elementos químicos, componentes de la materia viva. Macromoléculas orgánica de interés biológico. Forma, tamaño. Agrupaciones bacterianas. Estructura general de una célula procariota. Parámetros intrínseco que influyen en el desarrollo microbiano: pH, acidez, actividad acuosa (aw), potencial de óxidoreducción (Eh), nutrientes, constituyentes antimicrobiano y estructuras biológicas. Parámeros extrínsecos: temperatura y almacenamiento, humedad relativa del medio ambiente. Unidad II Crecimiento de poblaciones bacterianas. Determinación. Medida de masa bacteriana: método directo, método indirecto, medición de luz transmitida. Estructura superficial de la célula procariota. C ápsula. F unciones capa “S ”. P aredes de las eubacterias. C recim iento de la pared celular de bacterias Gram (-). Septación de bacterias. Estructura y composición de las esporas. Pared de las esporas. Cortex. Exósporio. Desencadenamiento de la esporulación. Fases de la esporulación. Germinación de las esporas. Unidad III Medios de cultivo. Conservación. Preparación. Ajuste de pH. Esterilización. Caldos. Caldos de enriquecimiento. Agua peptonada. Agua de triptona. Soluciones isotónica, hipertónica e hipotónica. Solución de Ringer. Preparación del material en microbiología, esterilización en seco y por vía húmeda, autoclave Chamberland. Teoría de la tinción. Azúl de metileno, verde de malaquita. Bacterias Gram (+) y Gram (-). Unidad IV Determinación de los microorganismos y sus productos metabólicos en los alimentos. Recuento en placas (UFC) y en tubos (NMP). Reacciones bioquímicas de caracterización: IMVyC, ureasa, catalasa, descarboxilasa, oxidasa, reducción de nitratos. Métodos de detección rápida de células. Métodos modernos de identificación: inmunoenzimáticos (ELISA), hibridación DNA, cromatogafía en fase gaseosa, electroforesis disociante en gel de poliacrilamida y sondas moleculares. Petrifilm. Recuento de células somáticas. Recuento por microcopía directa según Breed – Newman. Unidad V Captación de energía en las bacterias quimiótrofas y en las bacterias fototróficas. Micoorganismos indicadores de calidad higiénica en alimentos. recuento de microorganismos psicrótrofos y mesófilos aerobios totales, bacterias termodúricas, esporuladas aerobias y anaerobias. Coliformes. Coliformes termotolerantes. Escherichia Coli. Enterobacteriaceae. Pseudomonas. Staphylococcus aureus coagulasa positiva. Enterococos. Bacillus cereus. Clostridios sulfito reductores y clostridium perfringen. Aislamiento e identifiación de Salmonella. E. Coli 0157/H7. Shigella. Yersinia enterocolítica. Aeromonas hydrophila. Ampylobacter jejuni y Listeria monocytogenes. Recuento de hongos y levaduras. Metabolitos de los mohos con accíon tóxica. Aflatoxinas en distintos alimentos enmohecido. Aflatoxina B1, B2, G1, G2, M1, M2 Unidad VI Control de calidad microbiológica en alimentos. código de buenas prácticas de manufacturas (BPM). Sistema de análisis de peligros y control de puntos críticos (HACCP). Recolección de muestras y consideraciones estadísticas para los planes de muestreo. Conservación de los alimentos por alta temperaturas. Factores que afectan la resistencia al calor en los microorganismos. Destrucción térmica de los microorganismos. Unidad VII Conservación de los alimentos por desecación. Preparación y desecación de los alimentos. Efectos de la desecación sobre los microorganismos. Alamacenamiento y rehidratación de los alimentos. Alimentos de humedad intermedia. Conservación de los alimentos por el empleo de bajas temperauras. Desarrollo de los microorganismos en alimentos refrigerados. Efecto del empleo de bajas temperaturas en los micoorganismos. La congelación de los alimentos y sus efectos en la microflora contaminante. Congelamiento y descongelamiento de los alimentos. Estabilidad de los alimentos congelados. Unidad VIII Conservación de los alimentos por medio de radiaciones. Destrucción de los microorganismos mediante el empleo de radiaciones. Radapertización, radicidación y radurización. Almacenamiento y estabilidad de los alimentos irradiados. Tecnologías emergentes en la conservación de alimentos: alta presión, campos eléctricos pulsados de alta intensidad, campos magnéticos oscilatorios, pulsos lumínicos, efecto Joule, microondas. Unidad IX Conservación de los alimentos por agentes químicos. Inhibición del desarrollo microbiano en los alimentos. utilización de benzoatos. Agentes oxidantes. Acidos orgánicos y sus sales. Dióxido de azufre. Óxido de etileno. Ozono. Antibióticos. Sales y azúcares. Nitratos y nitritos. Alimentos envasados. Aspectos microbiológicos relacionados con la calidad. Permeabilidad y otras características de los envases. Grado de vacío y mezcla gaseosa utilizadas para la conservación de los alimentos envasados. Alimentos enlatados. Grupos microbiano asociados con la alteración de los microogranismos a elevadas temperaturas. Control de esterilidad comercial. Enfermedades transmitidas por alimentos (ETA). Infecciones, intoxicaciones y toxicoinfecciones producidas por microorganismos contaminantes de alimentos. Higiene de las industrias alimentarias y de los establecimientos preparadores y expendedores de alimentos. Control de la calidad bacteriológica del agua. Metodología Los temas desarrollados se complementarán con exposiciones gráficas, muestras de cepas en distintos estados, experiencias en el laboratorio como ser microscopía, siembras de alimentos utilizando las últimas técnicas e interpretación de resultados. Se hará uso permanente de las normas de control microbiológica a los efectos de poder analizar la inocuidad de los alimentos. Evaluación y aprobación El sistema de evaluación y aprobación final de la signatura se regirá por lo establecido por el nuevo Plan de Estudios Agroindustria de la Alimentación, año 2003. Decreto Nº 3225/02. Bibliografía Microorganismos de los alimentos. Tomo I - II Ed. Acribia 1983 Ecología microbiana de los alimentos Tomo I – II Ed. Acribia 1980 Microbiología de los alimentos J.M. Jay Ed. Acribia 1978 Microbiología de los alimentos y sus procesos de conservación J.T. Nickerson, A.J. Sinskey Edi. Acribia 1978 Código Alimentario Mercosur Bergey Manual Edi. Wilkinson and Wilkinson Standart Methods for the Examination of Dairy Products 15 th Ed. Amercian Public Health Association Washington Conservación no térmica de los alimentos Gustavo Barbosa Canovas Ed. Acribia 2004 Federation International de Laiterie (FIL-IDF) Brucella – Belgique 1989 Biología de los Microorganismos Brock, 8º edición - 2000 Edi. Prentice Hall