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BIOLUMINISCENCIA
 APLICACIONES EN
MICROBIOLOGIA
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 Cuando la reacción quimioluminogénica es
enzimática, ocurre en un organismo vivo o bien se
produce en sistemas químicos derivados de éstos, al
fenómeno se le denomina BIOLUMINISCENCIA
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 El complejo luciferin –luciferaza para medir ATP se
detecto por primera vez en Photinus pyralis cola de
la luciernaga .
 La luz producida en la bioluminiscencia se mide en
un tubo detector multiplicador y se expresa en
unidades relativas de luz ( URL)
 Cuantificadas por un fotometro o luminimetro
Molécula + enzima + un poco de oxígeno = luz
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 La producción de bioluminiscencia en los animales es un
proceso químico complejo en el que la oxidación de un
sustrato de proteína luciferina es catalizado por la enzima
luciferasa.
 La luciferina acompañada de la enzima luciferasa, la
molécula energética ATP
 La combinación entre la luciferina y el oxígeno provoca la
oxidación de la luciferina dando lugar a la oxiluciferina.
Esta reacción necesita del ATP para generar moléculas de
oxiluciferina en estado excitado
 y el oxígeno genera la luz bioluminiscente
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 La bioluminiscencia es un fenómeno que ha sido
explorado por una variedad de organismos. Para
que esta reacción química ocurra es necesaria la
presencia de una proteína denominada luciferina, la
enzima catalizadora luciferasa, oxígeno molecular y
ATP (Trifosfato de adenosina), sustancia capaz de
generar la energía necesaria para que se dé la
reacción
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 Se puede observar del verde al azul, que es lo más
frecuente, ya que es la luz que se transmite a mayor
profundidad en el agua. Aunque se observa también
del rojo o al ámbar, en menor medida ya que el color
rojo se absorbe rápidamente en el agua y pocos
organismos marinos tienen la capacidad de percibir
ese color.
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 La bioluminiscencia no debe confundirse con la
fluorescencia, la fosforescencia o la refracción de la
luz, técnicas empleadas también por numerosos
organismos.
 Es un recurso evolutivo presente en bacterias,
hongos, protistas unicelulares, celentéreos, gusanos,
moluscos, cefalópodos, crustáceos, insectos,
equinodermos y peces.
La técnica de detección está basada en la
reacción ATP (Adenosin-trifosfato) presente en todos
los organismos vivos.
La cantidad de luz emitida es
proporcional a la cantidad de ATP presente ya sea en
una mesada (lote) o en el producto final.
Mediante un Luminómetro portátil se mide la
cantidad de fotones
emitidos en URL o Unidades Relativas de Luz que es
proporcional a la cantidad de microorganismos
presentes.
Desventajas
El método de Bioluminiscencia permite
obtener resultados
en un corto periodo de tiempo, sin
embargo, no especifica cuantitativamente
la población microbiana existente en una
muestra determinada debido al ATP no
microbiano presente en la muestra.
INNOVACIONES

para el monitoreo ambiental
conocer un estudio donde se destacan los beneficios
de
productos de ATP, además de ofrecerles un artículo
sobre cómo
identificar las zonas críticas y la frecuencia de las
pruebas de ATP
EL LUMINOMETRO
MIDE EL ATP EN UNA MUESTRA EN
30 segundos
Usos en la Higiene
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 Se utiliza para la detección rápida de
microrganismos vivos y su monitorización
 Especialmente en la valoración de la contaminación .
 Especialmente en la Higiene de superficies
instrumentos ,que afecta la calidad de los productos .
 Siendo las biopeliculas las que emiten
microrganismos que pueden contener .
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 Las superficies que indican bajo ATP indican
ausencia de contaminación .
 Si son altas indican presencia de organismos vivos o
materia orgánica
 Los desinfectantes alteran la membrana celular
,inhiben la actividad metabólica .
 Disminuyendo la emisión de luz
Interferencias en el
Metodo
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 Factores ambientales como :
 Ph
 Temperatura
 Restos de detergente
 Desinfectantes .
 Provocando una disminucion de la luz emitida
 La medición de valores altos de ATP no indica
necesariamente contaminación microbiana .
INDICADORES
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 Si la cantidad de ATP es baja puede deberse a
 Presencia de bacterias gram negativas o esporas .
 Si es alta levaduras o gram positivas con actividad
metabólica alta .
 Por lo tanto no sustituye los métodos tradicionales .
Equipos para medir ATP
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 Es un luminómetro portátil multifuncional que
puede ser usado para validar higiene, empleando
hisópos para medir ATP residual en superficies o
líquidos. También puede ser empleado con zondas
para medir PH, Temperatura y Conductividad.
Reduce la necesidad de tener diferentes
instrumentos en la planta. El equipo puede
almacenar en su poderosa memoria hasta 5000
resultados.
principales
características
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 :
 Monitoreo de limpieza en 10 segundos con sensibilidad de 0.000000000015
gramos de ATP ó contaminación por materia orgánica
 Cuenta con calibradores trazables NIST y controles positivos de ATP
 Totalmente portátil y ergonómico, 460 gramos de peso
 Almacena hasta 10,000 resultados y puede configurar hasta 1000 puntos
diferentes
 Exclusivo software para configurar datos, transferencia a la computadora
en un solo paso y software para analizar datos con capacidad gráfica con
sólo configurar una pantalla en menos de 1 minuto
 Determina pH 0-14, temperatura de -20° hasta 105°C y concentración de
sanitizantes y limpiadores desde 10 hasta 100,000 microsiemens y/o 10
hasta 200,000 ppm.