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Fisiología y Biofísica – Carril C Introducción 2006 FISIOLOGÍA Y BIOFÍSICA - CARRIL C CLASES DE INTRODUCCIÓN 2006 El desarrollo de los temas se hará en forma de Seminarios y Trabajos Prácticos. Los Seminarios son clases participativas donde se cumplimentarán los objetivos docentes más complejos. El alumno deberá traer calculadora científica y conocer su funcionamiento. PROGRAMA DE SEMINARIOS SEMINARIO 1: INTRODUCCIÓN AL ESTUDIO DE LAS VARIABLES FISIOLÓGICAS CONTENIDOS: Introducción al análisis de las variables fisiológicas. Conceptos de variabilidad biológica. Parámetros de importancia médica y biológica. Distribución de frecuencias: Formas de distribución. Distribución normal o Gaussiana. Parámetros que la caracterizan. Clasificación de las variables: no numéricas, numéricas discretas y continuas. Probabilidad teórica y experimental. Población y muestra. La media y la desviación estándar y su significación. El parámetro Z. Concepto de normalidad. OBJETIVOS: Al finalizar este Seminario el alumno debe ser capaz de: 1. Comprender al hombre como un sistema de variables fisiológicas 2. Entender el concepto de variabilidad biológica 3. Conocer la diferencia entre probabilidad teórica y experimental 4. Comprender el concepto de normalidad SEMINARIO 2: INTRODUCCIÓN AL ESTUDIO DE LAS VARIABLES FISIOLÓGICAS CONTENIDOS: Importancia de los valores medios. El error estándar de la media (SEM). Media de la muestra y media de la población. Estudios con muestras pequeñas. El parámetro t. Las pruebas "antesdespués". Experiencias con datos pareados. Intervalo de confianza. Pruebas de significación. OBJETIVOS : Al finalizar este Seminario el alumno debe ser capaz de: 1. Entender las diferencias entre desviación estándar y error estándar 2. Entender las pruebas de significación SEMINARIO 3: COMPOSICIÓN DE LOS COMPARTIMENTOS DEL ORGANISMO. MEDIO INTERNO. CONTENIDOS: El hombre como sistema termodinámico: diferencias entre estado estacionario y estado de equilibrio. Homeostasis. Los grandes compartimentos del organismo (Intra- y extracelular. Intravascular e intersticial): definición, composición y marcadores. Formas de expresar la concentración de una solución: % masa/volumen, Molaridad, Normalidad y Osmolaridad. Los grandes Mecanismos disipativos y sus fuerzas impulsoras: Gradientes químicos, eléctricos, osmóticos y de presión hidrostática. OBJETIVOS: Al finalizar este Seminario el alumno debe ser capaz de: 1. Comprender al hombre como un sistema termodinámicamente abierto y en estado estacionario. 2. Describir al hombre como un sistema de compartimentos integrados. 3. Conocer la composición y alteraciones de los diferentes compartimentos. 5. Entender los procesos de difusión, ósmosis y filtración. SEMINARIO 4: BIOELECTRICIDAD CONTENIDOS: Potencial electroquímico. El potencial de difusión. Concepto de permeabilidad iónica. Equilibrio Donnan. Ecuación de Nernst. Ecuación de Goldman- Hodgkin y Katz. Potencial de membrana. Bases iónicas del potencial de reposo. Diferencia entre potencial de membrana generado por una única especie iónica permeable de aquel en el que hay más de una especie permeable. El papel de la bomba Na+/K+ ATPasa. OBJETIVOS 1. Entender la importancia de los fenómenos bioeléctricos en la fisiología. 2. Comprender las propiedades pasivas de las membranas 3. Conocer las bases iónicas del potencial de reposo 4. Entender la actividad eléctrica de las células excitables 1 Fisiología y Biofísica – Carril C Introducción 2006 FISIOLOGÍA Y BIOFÍSICA - CARRIL C TRABAJOS PRACTICOS - INTRODUCCIÓN 2006 SEMINARIO 1: INTRODUCCIÓN AL ESTUDIO DE LAS VARIABLES FISIOLÓGICAS 1. ¿Qué entiende por valor "normal" de una medición biomédica? 2. Mencione ejemplos de variables continuas y discretas. 3. En 1000 partos en la maternidad del Hospital Sardá se observó el nacimiento de 504 varones. Calcule la probabilidad experimental y teórica del nacimiento de un varón. Haga el mismo análisis sabiendo que en 400 operaciones con circulación extracorpórea se produjeron 10 fallecimientos intraoperatorios. ¿Qué conclusiones puede sacar? 4. La siguiente lista muestra los pesos en kilogramos de 40 pacientes sometidos a un programa de control de peso: 62 71 72 80 73 73 73 54 68 71 78 78 76 81 82 65 66 72 65 85 82 89 72 64 60 71 73 76 77 79 71 84 75 76 71 57 68 73 71 72 a) Utilizando los cinco intervalos mencionados en la tabla siguiente calcule las frecuencias absolutas, relativas y relativas porcentuales para cada uno de ellos. b) Grafique el histograma de frecuencias relativas porcentuales. Intervalos Frecuencia absoluta Frecuencia relativa Frecuencia relativa porcentual Entre 54 - 61 Entre 62 - 68 Entre 69 - 76 Entre 77 - 84 Entre 85 - 92 c) ¿Los resultados del histograma representan una distribución normal? d) Calcule el promedio y la desviación estándar 5. Se tomó la presión arterial (sistólica) a 100 personas que pasaron por la estación de subterráneos “Tribunales”. a) ¿Es esta una muestra representativa de la ciudad de Buenos Aires?. b) El resultado de la medición mencionada fue 135 15 mm Hg ( X SD; n = 100). ¿Qué significa esta expresión? 6. Se realizaron las mediciones de la presión arterial en 200 personas mayores de 20 años sorteadas entre todos los habitantes de Buenos Aires y en condiciones basales (posición horizontal tras 5 minutos de reposo). El resultado fue: 2 Fisiología y Biofísica – Carril C Introducción 2006 130 10 mm Hg ( X SD; n = 200) a) ¿Es esta una muestra representativa? b) ¿Cuáles son las probabilidades de haber encontrado valores por encima de 150 mm Hg? ¿Y por debajo de 120 mm Hg? ¿Y entre 120 y 150 mm Hg? ¿Y por encima de 160 mm Hg? c) A una de las personas de la muestra se le midió una presión arterial sistólica de 170 mm Hg. ¿Podemos concluir que es hipertensa? SEMINARIO 2: INTRODUCCIÓN AL ESTUDIO DE LAS VARIABLES FISIOLÓGICAS 1. ¿Es posible estimar la media de la población a partir de la media de una muestra? 2. ¿Cómo explicaría el concepto de error standard de la media (SEM)? ¿Qué define el intervalo X SEM? ¿y X 2SEM? ¿y X 3SEM? Explique la diferencia entre SD y SEM. Calcule estos intervalos para los datos del ejercicio 4 del Seminario anterior. 3. Cuando nos hallamos frente a una diferencia entre dos valores medios podemos plantearnos dos hipótesis. ¿Cuáles son? Se midió la concentración de hemoglobina en un grupo de mujeres de 20 a 40 años (n =10) dando un valor de X SDn-1 de 12.13 1.56 (g/dl). a) ¿Cuál sería el valor de t para la hemoglobina de 13.69 g/dl? ¿Para una de 9.01 g/dl? ¿Y para una de 16.81 g/dl? b) ¿Cuáles son las probabilidades de haber encontrado valores por encima de 16.81 g/dl? ¿Y por debajo de 9.01 g/dl? c) Si la concentración de hemoglobina ( X SD n-1) en un grupo de mujeres de 40 a 68 años (n =10) es de 16.11 0.98 g/dl: ¿existen diferencias significativas entre los valores de hemoglobina de ambos grupos? ¿Con qué valor de probabilidad y con cuántos grados de libertad? 5. En un informe científico se lee: El valor medio hallado para la glucemia en pacientes diabéticos no tratados fue de 160 8 mg/100 cm3 ( X SEM, n = 30) y en pacientes tratados de 130 10 mg/100 cm3, n = 28). Supongamos que el informe correspondiente al estudio dice: 4. - La diferencia entre las medias de las muestras fue de 30 mg/100 ml - El SEM diff fue de 12,8 mg/100 ml - En base a lo anterior se llega a la conclusión que la diferencia fue significativa a un nivel de p < 0,01 ¿En lo antes expuesto, existe algún error? Si es así, ¿Cuál es? 6. Explique qué entiende por prueba con datos pareados. De un ejemplo 7. Se realizó un estudio con una droga hipoglucemiante en 14 pacientes por el método antesdespués con los siguientes resultados (valores de glucemia en ayunas en mg/100 ml): Paciente 1 2 3 4 5 6 Antes 170 200 180 164 178 165 Después 140 120 180 124 168 170 3 Fisiología y Biofísica – Carril C Introducción 2006 7 8 9 10 11 12 13 190 159 183 174 205 167 194 130 155 127 142 175 114 118 a) Calcule el t para una prueba antes-después. b) Calcule con que probabilidad la droga sería efectiva como hipoglucemiante. 4 Fisiología y Biofísica – Carril C Introducción 2006 SEMINARIO 3: COMPOSICIÓN DE LOS COMPARTIMENTOS DEL ORGANISMO. MEDIO INTERNO. 1) La Organización Mundial de la Salud (OMS) recomienda una solución electrolítica rica en glucosa para el tratamiento de las diarreas infantiles. La misma tiene la siguiente composición: - NaCl 3,5 g/l (PM: 58,5) - KCl 1,5 g/l (PM: 74,5) - NaHCO3 2,5 g/l (PM: 84) - Glucosa 20,0 g/l (PM: 180) A un niño con diarrea estival se le suministra un vaso de 200 ml de la solución luego de cada deposición diarreica. El niño recibirá en cada dosis: a. .......... mEq de Clb. .......... mEq de Na+ c. .......... mEq de K+ d. .......... mEq de HCO32) Un paciente de 30 años posee una talla de 1,70 m y pesa 60 kg. Calcule cuál será en este individuo el valor aproximado de agua corporal total (ACT) en litros y cuál será el valor de la masa de Na+ extracelular (mEq). Considere la concentración normal de Na+ EC: 142 mEq/l. 3) A un paciente inconsciente se le quiere administrar por goteo endovenoso 150 mEq de sodio en 24 h. a) ¿Qué volumen por minuto debemos administrarle si la solución es de NaCl 0,9% P/V (solución fisiológica)? PM NaCl: 58,5. b) Si el volumen de cada gota es aproximadamente 50 µl, ¿Cuál deberá ser el ritmo de goteo? 4) Para determinar el volumen total de sangre (volemia) de un paciente, se le inyectaron 2,45 g de Azul de Evans. Luego de 15 min se le tomó una muestra de sangre y se encontró que la concentración del marcador es 0,875 mg/ml y el valor del hematocrito del 47%. Calcule el valor de la volemia (en ml) del paciente. 5) A la guardia de un hospital llega un paciente con signos de deshidratación (vómitos y diarrea durante los últimos 3 días). El médico ordena un análisis de glucosa, urea y electrolitos, dando el siguiente resultado: Na+...................158 mEq/l K+.........................3 mEq/l Glucosa.............100 mg/100 ml (PM 180) Urea...................30 mg/100 ml (PM 60) a) Calcule la osmolaridad del plasma del paciente. b) El médico sospecha que el análisis de los electrolitos no es correcto ya que la osmolaridad informada por el laboratorio es de 247 mOsm/l. El bioquímico opina que el error puede estar en la medición del Na+. ¿Por qué? 5 Fisiología y Biofísica – Carril C Introducción 2006 c) Si el valor de K+ es correcto, el médico debe aumentar la concentración de K+ hasta los valores normales (5 mEq/l). ¿Cuántos mEq de K+ es necesario inyectar al paciente con un peso corporal de 65 kg teniendo en cuenta que el déficit de K+ es sólo extracelular? 6) ¿Cuantos mEq de Cl- y cuantos de Ca2+ hay en 20 ml de una solución 6 mM de CaCl2? (PM CaCl2: 111) 7) Con el fin de rehidratar, por vía endovenosa, a un paciente deshidratado se utilizó una solución " Ringer Lactato“ cuya composición figura a continuación: PM NaCl............... 0,60 g 58,5 KCl................. 0,03 g 74,5 CaCl2.............. 0,02 g 111 Na(C3H5O3)..... 0,31 g 112 H2O c.s.p....... 100 ml (c.s.p.: cantidad suficiente para) a) Calcule la osmolaridad de la solución “Ringer Lactato“. b) ¿Es ésta una solución iso-osmótica con el plasma? 8) Los siguientes indicadores se utilizan para medir el volumen de los compartimientos corporales. Señale cual es la opción correcta. a PLASMATICO EXTRACELULAR INTRACELULAR AGUA TOTAL azul de Evans agua tritiada inulina agua tritiada ninguno inulina agua tritiada inulina ninguno azul de Evans ninguno agua tritiada inulina inulina ninguno agua tritiada b azul de Evans c agua tritiada d azul de Evans e azul de Evans 6 Fisiología y Biofísica – Carril C Introducción 2006 SEMINARIO 4: BIOELECTRICIDAD 1. Responda las siguientes preguntas: a) ¿4.5 mEq de Ca2+ tienen la misma carga que 4.5 mEq de K+? b) ¿El valor de potencial Nernst de un ion puede ser afectado con la temperatura? 2. En la tabla se indican las concentraciones iónicas de dos tipos de células de mamífero y del medio que las rodea (extracelular). Calcule la relación iónica entre el exterior y el interior celular. ¿Qué significado tiene?. Calcule el potencial de equilibrio para cada ion. Analice los resultados. Considere la temperatura igual a 37ºC. Fibra muscular Ion [Ion]ext (mEq/l) [Ion]int (mEq/l) Na+ 145 12 K+ 4.5 155 Ca2+ 1 10-4 Cl- 116 4.2 EXT/INT Eion (mV) EXT/INT Eion (mV) Células somáticas 3. Ion [Ion]ext (mEq/l) [Ion]int (mEq/l) Na+ 145 15 K+ 4 120 Ca2+ 1 10-4 Cl- 123 20 Teniendo en cuenta los datos de concentración iónica de Na+, K+ y Cl- de las dos células del ejercicio 2: a) calcule el Vm resultante de acuerdo a la ecuación de Goldman Hodgkin y Katz considerando que la relación entre las permeabilidades son: para Na+ 0,03 (siendo 1 para el K+ y el Cl-). Indique con flechas en los siguientes esquemas hacia donde espera que haya flujo neto para ión si considera los potenciales de membrana calculados. Célula somática Vm= Vm= Fibra muscular 7 Fisiología y Biofísica – Carril C Introducción 2006 b) calcule nuevamente el Vm de acuerdo a la ecuación de Goldman Hodgkin y Katz considerando ahora que la relación entre las permeabilidades son: para Na + 10 (siendo 1 para el K+ y el Cl-). ¿Qué significado tiene el resultado obtenido? 4. En el siguiente gráfico se comparan los potenciales Nernst de cada ión con respecto al potencial de membrana de reposo. Complete los recuadros con el cálculo de las fuerzas impulsoras que operan para cada ion indicado en particular y analice los resultados. ¿Qué conclusiones puede sacar? ¿Cuál es el ion con mayor fuerza impulsora? ¿Qué se observa para el caso del Cl-? Si el potencial de membrana se depolarizara a +40 mV, se modificarían las fuerzas impulsoras? 5. La siguiente figura muestra la relación entre la [K+] externa (expresada en mM, en escala logarítimica) y el potencial de membrana (mV) de una fibra muscular. Los círculos indican los valores experimentales y las líneas continuas la relación teórica para las ecuaciones indicadas en el interior de la figura. Responda: a) ¿Qué sucede a altas concentraciones de K+? ¿Cómo lo explica? b) ¿Qué sucede a concentraciones fisiológicas de K+? c) ¿Encuentra diferencias a lo observado a bajas concentraciones de K+? ¿Por qué? d) ¿Qué representan las dos ecuaciones indicadas? 8 Fisiología y Biofísica – Carril C Introducción 2006 6. En los dos siguientes esquemas se representan un capilar sistémico y una neurona. a) Analice para cada caso la relación entre especies químicas permeables (Na+, K+, Cl-) y no permeables (proteínas). ¿Qué sucede con la distribución de las especies permeables? Describa la relación para ambos casos. b) En el caso del capilar sistémico, ¿donde espera encontrar la concentración de Na+ más elevada? c) Si en el caso de la neurona se inhibe la síntesis de ATP, al cabo de cierto tiempo se observa que la diferencia de potencial llega a un valor fijo distinto de cero. ¿Por qué el Vm no llega a 0 mV? ¿Qué componentes celulares son responsables de generar esta diferencia? ¿Qué pasa con las concentraciones de las especies iónicas permeables a ambos lados de la membrana? 7. Los siguientes gráficos muestran experimentos en donde se midió el potencial de membrana de una célula excitable a diferentes concentraciones de potasio extracelular, realizando dos tratamientos: incubando las células con ouabaína y bajando la temperatura de la cámara de incubación a 4°C. ¿Qué sucede en ambos casos? ¿Cuál sería la explicación? efecto de la ouabaína efecto de la temperatura sin con -80 -60 Vm (mV) -60 Vm (mV) 17C 4C -80 -40 -40 -20 -20 0 0 1 10 + 100 log [K ] extracelular (mM) 1 10 100 + log [K ] extracelular (mM) 9