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LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA MÉDICA PARA FARMACIA
SEMANA 1
IMPORTANTE!: Toda la materia que se explica a continuación puede ser evaluada en el
Quiz 1 de laboratorio
USO DEL MICROSCOPIO, NIVELES DE BIOSEGURIDAD
La siguiente materia entra en el quiz de entrada, por lo tanto, debe estudiarse con al
menos 2 días de anticipación:
Cualquier individuo, sea o no parte del equipo de Salud, debe conocer, en primera
instancia, que al ingresar a un área en particular del hospital, clínica, asilo, etc, hay un
riesgo implícito y probabilístico de que, en dicha área, contraiga una enfermedad
microbiológica, contacte una superficie no desinfectada, inhale un aerosol, sufra un
accidente con algún punzocortante, o use cosméticos como lápices labiales o productos
para maquillaje que sirvan como medio de cultivo para bacterias y hongos. De ahí, que
hablemos de laboratorios con riesgo microbiológico 1, 2, 3 o 4.
I. Nivel de bioseguridad 1:
En este nivel se trabaja con agentes que presentan un peligro mínimo para el personal
del laboratorio y para el ambiente. El acceso al laboratorio no es restringido y el trabajo se
realiza por lo regular en mesas estándar de laboratorio. No se requiere equipo especial ni
tampoco un diseño específico de las instalaciones (croquis visible al público en general). El
personal de estos laboratorios es generalmente supervisado por científicos entrenados en
microbiología. Incluye varios tipos de microorganismos con escasa virulencia y
patogenicidad. Recordemos la diferencia entre los conceptos de virulencia, que es el nivel
de peligrosidad o capacidad de daño que puede causar un microorganismo; y
patogenicidad es sencillamente la capacidad de producir una enfermedad en un
hospedero. Tenemos el ejemplo clásico de Escherichia coli, muestras que contienen
únicamente biota indígena, hongos del ambiente, virus que sólo se replican en animales y
no en humanos, y bacterias no infecciosas. En este nivel las precauciones tomadas con los
materiales de riesgo biológico en cuestión, son los guantes de plástico y algún tipo de
protección facial. El laboratorio no está necesariamente aislado de las demás instalaciones
del edificio. El trabajo se realiza generalmente en mesas de trabajo abiertas. Por lo
general, los materiales contaminados se desechan en recipientes de residuos abiertos. Los
procedimientos de descontaminación para este nivel son similares en muchos aspectos a
las precauciones modernas contra los microorganismos de la vida cotidiana (por ejemplo,
lavarse las manos con jabón antibacteriano, lavar todas las superficies expuestas del
laboratorio con desinfectantes)
II. Nivel de bioseguridad 2:
Es similar al nivel 1 y en él se manejan agentes de peligro moderado hacia el
personal y el ambiente, pero difiere del nivel 1 en las siguientes características:
1. El personal de laboratorio tiene entrenamiento específico en el manejo de agentes
patógenos.
2. El acceso al laboratorio es restringido cuando se está realizando algún trabajo.
3. Se toman precauciones extremas con instrumentos punzocortantes contaminados.
4. Ciertos procedimientos en los cuales pueden salpicar los agentes al laboratorista y
se sabe que se podrían generar aerosoles, se llevan a cabo en gabinetes de trabajo
denominados en nuestros hospitales como Cámaras de Flujo Laminar.
III. Nivel de bioseguridad 3:
Corresponde a muchos laboratorios de investigación de universidades u hospitales,
en los cuales se realiza trabajo con agentes exóticos o que puedan causar daño serio y
potencialmente mortal como resultado de la inhalación de sus esporas o exposición a
los mismos. Por agente exótico entendemos a todo aquel que no se encuentra en
nuestro medio y por lo general tiene ciclos de vida con reservorios selváticos, vectores
biológicos muchas veces desconocidos, como sería el caso de los virus Hanta y de la
bacteria esporulada Bacillus anthracis. El personal de laboratorio tiene una formación
específica en el manejo particular de patógenos y agentes potencialmente mortales,
mediante el uso de trajes especiales u otros dispositivos de contención física, junto
con altos estándares de seguridad en cuanto al manejo de equipos. Para poder operar
de manera segura, estos laboratorios deben seguir los siguientes lineamientos:
1. Ventilar el aire del laboratorio al exterior.
2. La ventilación del laboratorio si tiene que hacer con un flujo de aire direccional
controlado.
3. El acceso al laboratorio está restringido.
4. Seguir el estándar de prácticas microbiológicas para el nivel de bioseguridad 2.
IV. Nivel de bioseguridad 4:
Este nivel es el que se utiliza para trabajar con agentes biológicos que representan
un alto riesgo individual de contagio y que además son un riesgo para la vida tal como
lo sería el trabajo con los virus productores de la fiebre hemorrágica por Ébola-
Marburg. Los agentes nuevos que tienen un cierto parecido con los antígenos de
agentes conocidos que operan en el nivel 4, son confinados a este nivel hasta que se
tiene suficiente información para confirmar que pertenecen a este nivel o bien
pasarlos al nivel adecuado. Los laboratorios se mantienen con una presión de aire
negativa, lo cual ayuda a impedir que los agentes nocivos escapen al ambiente.
Además, las instalaciones están en un edificio separado o en un área controlada
dentro de un edificio, que está completamente aislada de las demás área del edificio.
Los laboratorios nivel 4 son pocos en el mundo entero, siendo Alemania y Estados
Unidos los dos países que cuentan con las más importantes facilidades de este tipo.
Ahora bien, hágase usted la pregunta: ¿a cuál nivel de bioseguridad pertenece el
laboratorio en el cual voy a hacer las prácticas de este curso? Reflexione.
Si su respuesta oscila entre el nivel 1 y el 2, está en lo correcto. En Costa Rica, los
laboratorios de microbiología médica tienen componentes que corresponden a los dos
grupos, algunos en mayor o menor medida que otros. Sin embargo, para efectos
prácticos, y por el tipo de trabajo que vamos a realizar, vamos a clasificarnos dentro
del nivel 1. No obstante, deben considerar que, por ejemplo, los hospitales de la CCSS
son clase 2, al igual que muchos del subsector privado.
FIGURA 1. Símbolo universal de riesgo microbiológico.
NORMAS GENERALES DE SEGURIDAD BIOLOGICA EN EL LABORATORIO DE
MICROBIOLOGIA MÉDICA
La peligrosidad de un agente está directamente relacionada con el tipo de manipulación a
la que es sometido. Por ello es básico:
1. Conocer los agentes, sustancias y productos peligrosos que existen en el laboratorio.
2. Conocer la metodología de trabajo del laboratorio.
3. Conocer el equipamiento del laboratorio.
4. Conocer las medidas a tomar en caso de emergencia.
5. Conocer las leyes relacionados con la seguridad biológica.
6. Respetar y hacer cumplir lo anterior.
REGLAS GENERALES PARA LA BUENA PRÁCTICA MICROBIOLÓGICA
1. El acceso al laboratorio es limitado o restringido a discreción del profesor del
laboratorio. No se debe permitir el ingreso al área de trabajo a personas que presenten
riesgo aumentado de adquirir infecciones, como por ejemplo inmunosupresos y niños.
2. Todas las áreas estarán debidamente marcadas con la señal de riesgo biológico y su
nivel de contención
3. Las puertas y ventanas deben permanecer cerradas para mantener la adecuada
contención biológica.
4. Todas las superficies de trabajo se limpiarán y desinfectarán diariamente y siempre que
se produzca un derrame.
5. El laboratorio debe permanecer limpio y ordenado, no es aconsejable utilizar los
pasillos como almacén para en caso de emergencia poder evacuar el laboratorio.
6. Se pondrá extremo cuidado en minimizar el riesgo de auto inoculación y de generación
de aerosoles.
7. Los derrames y los accidentes deben ser informados inmediatamente al jefe del
laboratorio.
8. Esta rigorosamente prohibido pipetear con la boca.
9. En la zona de trabajo no debe colocarse material de escritorio ni libros ya que el papel
es de difícil desinfección.
10. Comer, beber, fumar y aplicarse cosméticos esta formalmente prohibido en el área de
trabajo del laboratorio, así como el almacenamiento de comida y bebida.
11. Residuos: si en el laboratorio no existen sistemas de esterilización como el autoclave,
el transporte de los mismos se debe realizar en envases apropiados para biopeligrosos.
MEDIDAS DE SEGURIDAD DEL PERSONAL
1. Todo el personal debe poner especial cuidado en evitar el contacto de la piel con
materiales potencialmente infecciosos. Con este fin deben usarse guantes cuando se
manipulen muestras o cultivos que contengan posibles patógenos. Los guantes siempre
serán desechados antes de salir del área de trabajo. Jamás se saldrá de la misma con los
guantes puestos, ni con ellos se cogerá el teléfono, se tocarán las boletas de trabajo, etc
2. Tras quitarse los guantes, se realizará un lavado de manos.
3. En todo momento el personal del laboratorio deberá utilizar gabacha apropiada y
limpia. Se debe tener en cuenta que la gabacha puede ser un foco de contaminación hacia
las personas más cercanas, por lo tanto no se debe salir del laboratorio con la gabacha o
uniforme contaminado, sino que se debe cambiar y colocarlo en una bolsa plástica para su
posterior lavado.
4. La gabacha se debe lavar separada del resto de la ropa, para evitar la contaminación
cruzada de miembros de la familia del personal.
5. Se usarán gafas protectoras y mascarillas faciales si existe riesgo de salpicaduras y/o
aerosoles.
6. El personal con el cabello largo es preferible que lo lleve recogido.
7. El personal debe lavarse las manos frecuentemente durante las actividades rutinarias,
tras acabar la jornada laboral y siempre antes de abandonar el laboratorio (almorzar). Se
usará un jabón antiséptico y el secado se realizará con papel.
8. Las heridas y cortes en las manos, si se han producido en el laboratorio, serán
comunicados al responsable del laboratorio. Las heridas y cortes deben ser
convenientemente vendados y después es imprescindible ponerse guantes.
2. DESECHOS ESPECIALES
Son los residuos peligrosos generados durante las actividades auxiliares. Estos residuos
constituyen un peligro para la salud por sus características agresivas tales como,
corrosividad, reactividad, inflamabilidad, toxicidad, explosividad y radioactividad.
Estos son:
o Residuos químicos
o Residuos Radiactivos
3. DESECHOS COMUNES
Son aquellos desechos generados por las actividades administrativas, auxiliares y
generales que no son peligrosas para la salud y sus características son similares a los
residuos domésticos comunes.
Se incluye en esta categoría a los: papeles, cartones, cajas, plásticos, restos de alimentos,
entre otros.
MANEJO DE DESECHOS EN EL LABORATORIO
A) MANEJO DE DESECHOS INFECCIOSOS O BIOPELIGROSOS.
El manejo de los desechos biopeligrosos es muy importante en un laboratorio clínico ya
que así se evita el contagio de enfermedades y cortaduras no sólo para el personal que
labora en el laboratorio sino también para los encargados de la recolección de los mismos.
Entre las normativas para el manejo de los desechos bioinfecciosos, esta:
1. Reuso y reciclaje: Se debe intentar reducir la generación de desechos, para esto se
puede realizar un proceso de esterilización de objetos como, pipetas, puntas, cristalería
para así reutilizar estos.
2. Separación: Los desechos deben ser clasificados y separados inmediatamente después
de su generación, es decir, en el mismo lugar que se originan.
B) DESECHOS ESPECIALES.
Son los residuos peligrosos generados durante las actividades auxiliares. Estos residuos
constituyen un peligro para la salud por sus características agresivas tales como,
corrosividad, reactividad, inflamabilidad, toxicidad, explosividad y radioactividad.
Estos son:
 Residuos químicos
 Residuos Radiactivos
C) DESECHOS COMUNES.
Son aquellos desechos generados por las actividades administrativas, auxiliares y
generales que no son peligrosas para la salud y sus características son similares a los
residuos domésticos comunes.
Se incluye en esta categoría a los: papeles, cartones, cajas, plásticos, restos de alimentos,
entre otros.
REGLAS PARA LA CLASIFICACIÓN Y SEPARACIÓN
 Los desechos líquidos y semilíquidos especiales serán colocados en recipientes
resistentes
 Los desechos infecciosos y especiales serán colocados en bolsa plástica roja. Y
serán almacenados para luego ser llevados por la empresa encargada de su
destrucción. Deberán ser manejados con guantes y equipo de protección.
 Los desechos comunes irán en bolsa plástica de color negro o verde.
 Todos los profesionales, técnicos y auxiliares son responsables de la separación y
depósito de los desechos en los recipientes específicos.
 Las agujas no deben ser dobladas ya que aumenta la posibilidad de auto
inoculación.
 El vidrio quebrado no debe ser manipulado con las manos. Debe de usarse
escobas, palitas o pizas.
 Los objetos punzocortantes deberán ser colocados en recipientes a prueba de
perforaciones.
MANEJO DE REACTIVOS Y DESECHOS QUIMICOS PELIGROSOS.
La disposición adecuada de residuos químicos es esencial para la salud y seguridad de los
trabajadores de la Empresa y/o Institución, y a la comunidad circundante. La disposición
responsable de los residuos químicos también reducirá presentes y futuras amenazas
sobre el medio ambiente. De esta manera, resulta imperativa la disposición de todos los
residuos químicos de una manera segura, eficiente, legal, y de costo adecuado.
Los principales agentes químicos utilizados en el laboratorio clínico:
A. AGENTES DESINFECTANTES
 Hipoclorito sódico:
Los desinfectantes que contienen este químico son potentes agentes oxidantes que
liberan Cl2 (gas cloro). La exposición al cloro produce irritación de mucosas, piel y del
tracto respiratorio superior. Las salpicaduras en los ojos pueden provocar daños
permanentes (irreversibles).
En las áreas en las que se manipulen estos productos deberá existir una adecuada
ventilación y deben usarse guantes resistentes, protectores oculares y ropa adecuada
(gabacha).
 Yodo:
La excesiva exposición a este agente pueden provocar irritación de mucosas, ojos y
sistema respiratorio. De nuevo, el uso de protectores personales es indispensable.
 Compuestos de amonio cuaternario:
Incorporados a múltiples soluciones desinfectantes, son generalmente menos dañinos que
muchos otros desinfectantes. Aun así se debe tener cuidado en su manipulación ya que
son causantes de irritaciones en piel y alergias.
B. COLORANTES Y REACTIVOS
 Son utilizados en el laboratorio de microbiología en cantidades pequeñas. No
obstante, se deben tomar precauciones para evitar la exposición a estos.

 Los colorantes más dañinos son los derivados del benceno y acridina ya que son
carcinogénicos. Los más conocidos son la auramina, rodamina y naranja de
acridina.
 Debe evitarse el contacto con estas sustancias utilizando guantes, etc.
TRATAMIENTO DE DESECHOS INFECCIOSOS.
Se realiza para inactivar los desechos infecciosos, las 2 técnicas principales son:
AUTOCLAVE Y DESINFECCION QUIMICA.
AUTOCLAVE:
 Sirve para esterilizar los equipos y materiales reusables, mediante la combinación
de calor y presión. Los parámetros usados son 121°C por un tiempo de 15 a 20
minutos.
 Se requiere realizar pruebas de eficiencia del proceso de esterilización mediante
indicadores físicos o biológicos.
 Todo microorganismos puede ser eliminado por este método dependiendo de los
parámetros utilizados
DESINFECCION QUIMICA
 Los desinfectantes son peligrosos para la salud humana y el medio ambiente, por
lo tanto deben aplicarse con técnicas especiales. El personal debe utilizar equipo
de protección.
 Esta desinfección está indicada para: desechos líquidos, heces, sangre y sus
derivados, secreciones piógenas, desechos punzocortantes y en accidentes y
derrames contaminantes.
MANEJO DE DERRAMES Y ACCIDENTES BIOINFECCIOSOS.
1. ACCIDENTES CON PUNZOCORTANTES
 Los pinchazos son los accidentes más comunes que ocurren en los laboratorios
clínicos. Los factores de riesgo son: la cantidad de material inoculado, la
susceptibilidad del huésped, la profundidad del traumatismo y la existencia de
lesiones previas en la piel

Si ocurre un accidente se debe lavar la zona afectada con abundante agua y jabón,
aplicar una solución antiséptica y acudir al médico.
2. MANEJO DE DERRAMES
Procedimiento:
 Usar el equipo necesario según sea el caso: gabacha, gafas, guantes, mascarilla
 Si es un vidrio recoger los fragmentos con pinzas o pala y escoba según lo amerite,
colocarlos en un recipiente para material punzocortante. La escoba y pala luego
deben ser lavadas y secadas.
 Si el derrame es líquido, absorber con papel o gasa y colocar la misma en una bolsa
roja
 Lavar con gasa y detergente la superficie manchada y luego enjuagar
repetidamente con agua si el material derramado no es infecciosos. Si el derrame
es infeccioso desinfectar con hipoclorito de sodio al 10%, colocando un volumen
superior al derrame.
 El material con el que se realiza la limpieza debe ser preferiblemente papel
absorbente que pueda ser utilizado y desechado.
 Las bolsas de basura siempre deben estar etiquetadas según su contenido si se
dejan fuera del área de almacenamiento de los desechos
 Reportar el derrame
 En caso de que alguna persona haya sufrido exposición debe acudir al médico.
INSTRUMENTOS.
Microscopio: Instrumento óptico destinado a observar de cerca objetos extremadamente
diminutos. La combinación de sus lentes produce el efecto de que lo que se mira aparezca
con dimensiones extraordinariamente aumentadas, haciéndose perceptible lo que no lo
es a simple vista.
Los SISTEMAS que forman al Microscopio Óptico son:
- Sistema Óptico, constituido por Ocular, Objetivo, Tornillos Macro y Micrométricos
- Sistema Mecánico, constituido por el Brazo, Platina y el Pie.
- Sistema Lumínico, constituido por el Espejo, Condensador y Diafragma
Las PARTES del Microscopio son:
- OCULAR: Es la lente situada cerca del ojo del observador. Su función: Capta y amplía la
imagen formada en los objetivos.
- OBJETIVO: Es la lente situada cerca de la preparación. Función: Amplía la imagen de ésta,
lo que significa que es muy importante este elemento del microscopio, es un elemento
vital que permite ver a través de los oculares
- CONDENSADOR: Es la lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación.
Función: Concentra más o menos el haz luminoso sobre la preparación mediante su
acercamiento o alejamiento de la Platina, al accionar un tornillo similar al macrométrico.
- DIAFRAGMA: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador. Función: Permite
regular la cantidad de luz proveniente del Espejo mediante un mecanismo de apertura y
cierre similar al de la pupila del ojo humano.
- BRAZO es una pieza metálica de forma curvada que gira sobre el PIE. Función: Sostiene
por su extremo superior al Tubo Óptico y en el inferior lleva varias piezas importantes
como la Platina, el Condensador y el Diafragma.
- TORNILLO MACRO y MICROMÉTRICO: Son tornillos de enfoque, mueven la platina hacia
arriba y hacia abajo. El macrométrico lo hace de forma rápida y el micrométrico de forma
lenta. Llevan incorporado un mando de bloqueo que fija la platina a una determinada
altura.
- PLATINA: Es una plataforma horizontal con un orificio central, sobre el que se coloca la
preparación, que permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de iluminación
situada por debajo. Dos pinzas sirven para retener el portaobjetos sobre la platina y un
sistema de cremallera guiado por dos tornillos de desplazamiento. Función: Permite
mover la preparación de delante hacia atrás o de izquierda a derecha y viceversa.
El cálculo de aumento total resulta de multiplicar el aumento producido por el Objetivo
por el aumento del Ocular. La imagen definitiva es invertida debido al aumento del ocular
con el Objetivo.
Bibliografía:
Suardíaz Cruz, Celso y Colina, Ariel. Técnicas y procedimientos de laboratorio para
Medicina 3. México, D.F. UAM. Editorial Ciencias Médicas. 2004.
SEMANA 2 / TEMA 2
BACTERIAS
OBSERVACIÓN DE MUESTRAS DE ORINA
1. INTERPRETACIÓN DE LA TIRA REACTIVA DE ORINA.
PARÁMETRO
Densidad
pH
Leucocitos
Nitritos
Proteínas
CAUSAS PROBABLES
Valores bajos (≤1.010) pueden indicar
deficiencia de Hormona Antidiurética (ADH) o
diabetes
insípida,
diabetes
mellitus,
hiperaldosteronismo y otras enfermedades
renales. Los valores en la primera orina del día
pueden ser alrededor de 1.020
Malnutrición proteica (↓), acidosis diabética
(↓), infección bacteriana (↑, neutro, ↓), fallo
renal agudo o crónico (↓), acidosis metabólica
(↓),
alcalosis
metabólica
(↑),
hiperparatiroidismo (↑).
Enfermedades renales: pielonefritis, nefritis
inducida por fenacetina, glomérulonefritis,
desórdenes del tracto genitourinario:
- Cistitis
- Uretritis
- Prostatitis
Causas potenciales a considerar: tuberculosis
renal o genitourinaria, urolitiasis o tumores
con drenado deteriorado, infección bacteriana
específica, tricomoniasis, gonorrea.
Es un producto del metabolismo de las
enterobacterias, siendo la más frecuente
Escherichia coli. Se ve en cistitis, pielonefritis,
uropatía obstructiva, bacteriuria asintomática
crónica.
Enfermedad renal, mieloma múltiple, gota,
toxemia, fiebre aguda, glomérulonefritis,
enfermedad poliquística, insuficiencia renal,
pielonefritis, toxemia por embarazo.
EXÁMENES ADICIONALES
Corroborar: proteínas, glucosa y pH.
En suero: ordenar Nitrógeno ureico
y creatinina.
Corroborar: leucocitos, nitritos y
bacterias.
Corroborar: Nitritos, proteínas,
sangre oculta.
Enviar a cultivar con prueba de
sensibilidad a antibióticos.
Corroborar: Proteínas, sangre oculta.
Enviar a cultivar con prueba de
sensibilidad a antibióticos.
Corroborar: leucocitos, nitritos,
sangre oculta.
Solicitar exámenes de sangre:
Creatinina,
Nitrógeno
ureico,
proteinuria en 24 horas.
Pedir nuevamente orina: si la
proteinuria sólo se presenta en la
primera orina del día, el transcurso
es benigno y se descartan patologías
graves. En niños, sobre todo
varones, puede haber proteinuria
Glucosa
Cuerpos cetónicos
Urobilinógeno
Bilirrubina
Sangre oculta
transitoria de la infancia, también
benigna.
Diabetes mellitus, enfermedad tubular renal, Corroborar:
densidad,
cuerpos
terapia de esteroides, shock, dolor agudo, cetónicos, sangre oculta.
infarto agudo al miocardio, pancreatitis, Pedir en sangre: glucosa.
glucosuria alimentaria.
Acidosis diabética, fiebre aguda por Corroborar: Glucosa.
enfermedad, hipertiroidismo, estarvación y Solicitar en sangre: Glucosa.
caquexia, glucosuria renal, dieta baja en
carbohidratos,
enfermedad
por
almacenamiento de glucógeno.
Cirrosis, hepatitis viral, daño hepático, Solicitar exámenes de sangre: GGT,
enfermedad
hemolítica,
talasemia, TGO, TGP, hemograma, hierro sérico
enfermedad hemolítica.
y perfil de bilirrubinas.
Carcinoma de cabeza del páncreas, hepatitis Corroborar de manera conjunta:
viral, Síndrome de Jaundice, obstrucción del Urobilinógeno.
tracto biliar, cirrosis, hepatitis inducida por Solicitar a laboratorio en sangre:
medicamentos.
GGT, TGO, TGP, perfil de bilirrubinas.
Cáncer de hígado o riñón, desórdenes de la Analizar conjuntamente: leucocitos,
hemostasia, cirrosis, riñones poliquísticos, nitritos, proteínas.
hipertrofia prostática, infección renal,
cálculos, al aumentar la edad, infecciones
crónicas, anemia hemolítica, hemólisis
intravascular
por
transfusión
ABO
incompatible, infarto renal, mieloma múltiple.
Las estructuras denominadas cilindros también pueden aparecer en la orina, se
clasifican en diferentes tipos y pueden tener interpretaciones diversas. Dentro de
este grupo se pueden incluir:





Los cilindros grasos se observan en personas que tienen lípidos en la
orina, usualmente como complicación del síndrome nefrótico.
Los cilindros granulares son una señal de muchos tipos de nefropatías.
Los cilindros hialinos generalmente son causados por deshidratación,
ejercicio o medicamentos diuréticos.
Los cilindros de glóbulos rojos son una señal de sangrado dentro del
riñón y se observan en muchas enfermedades renales.
Los cilindros de células epiteliales tubulares renales reflejan daño a las
células en el riñón llamadas células tubulares (túbulos). Estos cilindros se
observan en afecciones tales como la necrosis tubular renal, enfermedad
viral (como nefritis por CMV) y rechazo al trasplante de riñón.


Los cilindros cerosos se pueden encontrar en personas con enfermedad
renal avanzada e insuficiencia renal crónica.
Los cilindros de glóbulos blancos son más comunes con las infecciones
renales agudas.
Bibliografía:
Gerber GS, Brendler CB. Evaluation of the urologic patient: history, physical
examination, and urinalysis. In: Wein AJ, Kavoussi LR, Novick AC, et al.,
eds. Campbell-Walsh Urology. 10th ed. Philadelphia, Pa: Elsevier Saunders;
2011:chap 3.
McPherson RA, Ben-Ezra J. Basic examination of urine. In: McPherson RA, Pincus
MR, eds. Henry’s Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods.
22nd ed. Philadelphia, Pa: Elsevier Saunders; 2011:chap 28.
Actividades: Los procedimientos son la parte más importante de la bitácora.
Recuerde llevarlos resumidos, esquematizados y con espacio para responder o
tomar apuntes. De los resultados anotados en la bitácora y los dibujos o fotos que
se tomen, se deberá confeccionar el reporte a entregar dentro de 15 días en la
siguiente práctica.
PARTE 1
1. En esta parte de la práctica se le proporcionará a cada mesa una muestra
de orina de un paciente real, pero si lo desea puede llevar su propia
muestra, con no más de 2 horas de recolectada, en un frasco estéril de
boca ancha, que se consigue en la farmacia.
2. Llene un tubo de vidrio con la muestra y deje uno o dos dedos sin llenar en
la parte superior para evitar salpicaduras.
3. Analice el color y anote si es Amarillo claro, amarillo paja, amarillo fuerte,
ámbar, u otro color de los visto en la parte introductoria. Recuerde que los
aspectos físicos como color y aspecto se anotan con palabras.
4. Coloque un papel escrito detrás del tubo y determine si la muestra es
transparente, ligeramente turbia o turbia, y anote lo observado.
5. Prepare un fragmento de toalla de papel desechable e introduzca la tira
reactiva de orina dentro del tubo, asegurándose de que todas las
almohadillas se mojen. Meta y saque durante 2 o 3 segundos y escurra el
exceso de orina impregnado en la tira colocándola ladeada y con uno de
sus bordes en contacto con papel absorbente. Espere un minuto para que
cada reacción química se complete.
6. Tome el frasco de tiras reactivas y lea por colores las reacciones acercando
la tira a la banda cromógena para cada reacción. Anote los resultados a
manera de cruces según el color que obtuvo en cada almohadilla.
Normalmente se reportan: negativo, positivo (+), positivo (++) y positivo
(+++). Algunas veces los colores no son exactamente iguales a los que
indica la envoltura del frasco. En tal caso, reporte el más parecido.
Recuerde que las pruebas químicas no se reportan en forma de
concentración como sería por ejemplo: Glucosa 250 mg/dL, sino que se
cuenta el número de cuadrados que avanzó a partir del color que
indica el negativo, y si avanzó 2 cuadros hasta el color más parecido o
idéntico son dos cruces. Sólo el pH y la densidad o gravedad
específica irán con números. Otra excepción en la parte química eran los
nitritos, que reportan o positivo o negativo, ya que su importancia
radicaba en que los positivos orientan el diagnóstico hacia la familia
Enterobacteriacea, en específico o mayor número de casos
correspondientes a Escherichia coli.
7. Introduzca el tubo en la centrífuga por 5 minutos a velocidad media y al final
decante el sobrenadante invirtiendo completamente el tubo en la pila con la
llave del grifo abierta, esto para que a lo sumo quede una gota con la cual
redisolver el botón o precipitado. Dé unos golpecitos al botón sedimentado
para que se desprenda fácilmente, y coloque una gota en un portaobjetos.
Ponga el cubreobjetos y observe la gota en el microscopio.
8. Distinga: los cristales, el filamento mucoso y las bacterias. A diferencia del
reporte de la tira reactiva, que se hace por cruces, en el microscopio, el
sedimento se reporta de manera apreciativa como: “no se observan”, de lo
contrario se hacen las observaciones en 40X y se anota como escasos,
pocos, muchos. Si en al menos 5 campos microscópicos 40x no se observa
ningún hallazgo, pase a examinar el borde de la preparación, que es donde
por lo general se van a localizar los cilindros. Si del todo no observa nada
reporte: “no se observan”. Si en algunos campos se ven los hallazgos
mencionados pero en otro no, se reporta: “escasos”. Si en todos los
campos se observan, pero en cantidades pequeñas, se reporta: “pocos”. Si
se observan en todos los campos en gran cantidad, se reporta “muchos” o
“abundantes” (Incorrecto: escribir “negativo” o “no hay”)
9. Leucocitos y eritrocitos se cuentan para dar un estimado de la cantidad en
el sedimento. Recuerden que es útil conocer dos sistemas: si es posible
contarlos y sobre todo ver varios campos para sacar un promedio, entonces
se cuentan tal como aparecen. Si la cantidad es alta, de acuerdo con la
introducción que se va a dar para este laboratorio, el campo se divide en 4
cuadrantes, se cuentan los leucocitos o eritrocitos en un cuadrante, se
multiplica por cuatro y el resultado se anota en el reporte, normalmente
estimando a redondear en múltiplo de 5 para las infecciones, o un dígito del
1 al 5 para las normales.
10. Recuerde dibujar todo lo que observó y repita el ejercicio las veces que
considere necesarias. Una vez listo y dominada esta parte proceda con la
incógnita.
Para el reporte de la muestra de orina copie en la bitácora el siguiente cuadro o
reporte estándar y para la incógnita cada estudiante o grupo de estudiantes (si
deciden hacer la incógnita grupal) recibirá un formato como el siguiente.
Fecha:
Número de incógnita:
EXAMEN GENERAL DE ORINA
FISICO
Color:
Aspecto:
Gravedad específica:
QUIMICO
Reacción:
Proteínas:
Nitritos:
Cuerpos cetónicos:
Leucocitos:
ANALISIS MICROSCOPICO
Células epiteliales:
Leucocitos (por c. De 400X):
Eritrocitos (por c. De 400X):
Cilindros:
Cristales:
Sedimento amorfo:
Filamento mucoso:
Bacterias:
OBSERVACIONES:
pH:
Urobilinógeno:
Glucosa:
Sangre oculta:
Bilirrubinas:
La parte física se hace por observación de la orina una vez que esté decantada en el tubo
de ensayo. La gravedad específica la da la tira al igual que toda la parte química. En el caso
de reacción se especifica si es ácida, neutra o alcalina y para ello se deben fijar en el pH
que indica la tira reactiva.
Ahora realice la siguiente autoevaluación para detectar qué puntos domina y cuáles debe repasar
de nuevo. Recuerde que la prueba cumple su función sólo si la realiza después del estudio de la
materia desarrollada.
AUTOEVALUACIÓN DEL LABORATORIO 1 DE MICROBIOLOGÍA PARA FARMACIA
Selección única:
1. Una diferencia entre un laboratorio de nivel de bioseguridad tipo 1 y un laboratorio de
nivel de bioseguridad tipo 2, consiste en que en el segundo:
A) el acceso no es restringido porque se trabajan con bacterias no infecciosas.
B) la descontaminación incluye el lavado de manos con agua y jabón.
C) debe haber un croquis visible al público en general.
D) ciertos procedimientos se realizan en cámara de flujo laminar.
2. El trabajo con agentes exóticos que por lo general tienen ciclos de vida selváticos como los
virus Hanta y bacterias como Bacillus anthracis se lleva a cabo en laboratorios de nivel de
bioseguridad tipo:
A) 4
B) 3
C) 2
D) 1
3. Una medida de seguridad para el personal en el trabajo rutinario de laboratorio consiste
en que:
A) los guantes pueden reutilizarse siempre y cuando se laven con un desinfectante.
B) para evitar salpicaduras o contacto con aerosoles se usa mascarilla protectora.
C) después de lavarse las manos éstas deben dejarse secar al contacto con el aire.
D) los reactivos inflamables se deben descartar en contenedores para biopeligrosos.
4. Una diferencia entre el descarte de desechos infecciosos y el de desechos comunes
consiste en que el primero se realiza…
A) por medio de calor húmedo en autoclave.
B) en bolsa plástica negra o verde.
C) en bolsa plástica roja.
D) poniéndolos en contacto con hipoclorito de sodio al 10%.
5. No se debe permitir el ingreso al área de trabajo a personas que presenten riesgo
aumentado de adquirir infecciones como:
A) individuos sin gabacha
B) pacientes con tratamiento con antibióticos
C) niños e inmunosupresos
D) pacientes recién vacunados
6.
A)
B)
C)
D)
Entre las buenas prácticas de laboratorio una regla general importante es:
minimizar los derrames y la generación de aerosoles.
aplicarse la menor cantidad de maquillaje y labiales posibles.
comer únicamente alimentos procesados y empacados.
mantener abiertas puertas y ventanas para evitar la respiración de esporas.
7.
A)
B)
C)
D)
Un mal uso de los guantes durante las prácticas de laboratorio corresponde a:
usar un par de guantes diferente si se trabajan orinas y luego heces.
contestar el teléfono celular con los guantes puestos.
recoger un derrame químico con los guantes puestos.
descartar en bolsa roja todo par de guantes contaminados.
8.
A)
B)
C)
D)
La corrosividad, reactividad, inflamabilidad y toxicidad, son características de los:
Residuos radiactivos
Desechos biopeligrosos
Residuos químicos
Desechos comunes
9.
Una de las reglas para la clasificación y separación de los desechos que se generan en el
laboratorio consiste en que:
los desechos comunes irán en bolsa plástica roja.
los desechos líquidos y semilíquidos especiales se colocan en bolsa plástica negra.
el vidrio quebrado se coloca en una esquina lejos de las mesas de trabajo.
los punzocortantes se depositan en recipientes sólidos con símbolo de biopeligro.
A)
B)
C)
D)
10. Un agente desinfectante usado en el laboratorio que produce irritación de mucosas, ojos y
tracto respiratorio, por lo que se aplica con implementos especiales, se denomina:
A) Amonio cuaternario
B) Alcohol de 70˚
C) Peróxido de hidrógeno
D) Hipoclorito de sodio
11. El tratamiento de inactivación de desechos como sangre, heces y secreciones piogénicas,
se lleva a cabo mediante:
A) Desinfección química
B) Autoclavado
C) Incineración
D) Tindalización
12. En cuanto al manejo de derrames en el laboratorio, si se trata de un líquido, el primer paso
de contención para su eliminación es:
A) evitar que se expanda recogiéndolo con una escobilla y una palita.
B) lavar con gasa y detergente la superficie manchada.
C) absorber con papel o gasa y colocar los en bolsa roja.
D) recoger todo cuaderno, libro o papel cerca de la superficie contaminada.
13.
A)
B)
C)
D)
El sistema lumínico de un microscopio está constituido por:
Objetivo, micrométrico y macrométrico
Fuente de luz, espejos y ocular
Espejo, condensador y diafragma
Brazo, platina y regulador de luz
14. La parte del microscopio que concentra el haz luminoso sobre la preparación mediante su
acercamiento o alejamiento de la platina recibe el nombre de:
A) Diafragma
B) Condensador
C) Objetivo
D) Espejo
15. El cálculo del aumento total resulta de multiplicar el aumento producido por el objetivo
por el aumento del ocular. Si el ocular tiene un aumento de 10X y la preparación se enfoca
con un objetivo de 40X, el aumento total de observación será igual:
A) 400 veces el tamaño original
B) 4000 veces el tamaño original
C) 50 veces el tamaño original
D) 500 veces el tamaño original
16. Tres parámetros importantes de la tira reactiva que orientan hacia un desorden del tracto
genitourinario como cistitis, uretritis o prostatitis, además de leucocitos en más de (1+)
son:
A) Nitritos, proteínas y sangre oculta
B) Nitritos, bacterias y pH
C) Proteínas, sangre oculta y bacterias
D) Proteínas, glucosa y pH
17. La presencia de proteínas en orina en más de (2+), como en la sospecha de mieloma
múltiple, glomérulonefritis o enfermedad poliquística, se acompaña con una solicitud de
exámenes de sangre que determinen:
A) El microorganismo causal con la Prueba de Sensibilidad a Antibióticos.
B) Glucosa y albuminuria.
C) Proteinuria y perfil de bilirrubinas.
D) Proteinuria en 24 horas, Nitrógenos ureico y Creatinina
18. La TGO, TGP, GGT y el perfil de bilirrubinas, son exámenes de sangre que orientan el
diagnóstico del tipo de hepatitis cuando la tira reactiva de orina da positividad por:
A) Glucosa y cuerpos cetónicos
B) Sangre oculta
C) Bilirrubina y Urobilinógeno
D) Proteínas y glucosa
19. Con respecto de la interpretación de la acidez (pH) que brinda la tira de orina, es posible
que obtengamos un pH:
A) alto en la acidosis diabética
B) bajo en la alcalosis metabólica
C) alto en la malnutrición proteica
D) bajo en la acidosis metabólica
20. En una paciente con tricomoniasis o en un paciente con gonorrea es característico
observar en la orina al microscopio:
A) abundantes bacterias
B) muchos eritrocitos
C) pocos cilindros granulares
D) muchos leucocitos
RESPUESTAS: 1. D – 2. B – 3. B – 4. C – 5. C – 6. A – 7. B – 8. C – 9. D – 10. D – 11. A – 12. C – 13. C – 14. B – 15. A – 16. A –
17. D – 18. C – 19. D – 20. D.
CALIFICACIÓN = Número de aciertos x 5 = ___________ x 5 = ______________ %
EXCELENTE: 100
MUY BUENO: 90
ACEPTABLE: 80
MENOS DE 80: Conviene repasar nuevamente los temas fallidos.