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CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS Caracterización de componentes bioactivos del espárrago Instituto de la Grasa (Sevilla) CSIC Departamento de biotecnologia de alimentos Grupo de Pared Celular y Componentes Bioactivos de Alimentos Rocio Rodriguez Arcos Ana Jimenez Araujo Sara Jaramillo Carmona Sara Vazquez Castilla Rafael Guillén Bejarano Planteamiento General CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS Desarrollo de nuevas variedades de espárrago Composición química Características agronómicas Calidad como alimento: •Organoléptica •Nutricional •Funcional •Producción •Resistencia a enfermedades •Calibre •Características morfológicas Obtener un producto claramente diferenciado en el mercado y más saludable Composición nutricional y funcional del espárrago CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS 94% agua MINERALES 18 Kcal/100g (referido a 100g) 1% hidratos de carbono Potasio: 220 mg 3% proteínas Sodio: 3,5 mg 2% fibra Calcio: 30 mg Hierro: 1,5 mg VITAMINAS (referido a 100g) Vit.A: 53 mg (eq. Retinol) Folatos: 113 mg Vit.C: 21,6 mg Vit.B1: 0,1 mg Vit.B2: 0,2 mg Fósforo: 55 mg Compuestos azufrados Azufre: 42 mg Cobre: 0,19 mg Flavonoides Oligosacaridos Saponinas Esteroles CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS “Compuestos con propiedades fisiológicas y biológicas más allá de las nutricionales” •Se consumen como parte de la dieta habitual. •Sus efectos son pequeños y a largo plazo. •No cura nada, sino que previene y sólo si se emmarca en una dieta saludable. •El segmento de los alimentos funcionales es el que más ha crecido en los últimos años en el mercado de los alimentos alcanzando a nivel mundial del orden de los 40000 Millones de Euros. Composición Funcional del espárrago Flavonoides y Saponinas Tipos de espárrago Espárrago Triguero Silvestre Hibridos Comerciales Espárrago de Huetor Tájar Poblaciones estudiadas CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS 30 variedades Hibridos Comerciales Espárrago Huetor Parentales (60) Descendencias (60) Silvestres (5) Flavonoides del esparrago CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS Los Híbridos comerciales tienen como flavonoide mayoritario la rutina El espárrago triguero contiene mayor cantidad y variedad de flavonoides que los cultivares mundiales. Maritimus 100 4: Diode Array 360 2.56e6 Los flavonoides del espárrago triguero derivan no sólo de quercitina sino también de isoramnetina y kaemferol. % -0 Time 10.00 20.00 30.00 40.00 50.00 60.00 70.00 80.00 90.00 Flavonoides del esparrago CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS Se han aislado y caracterizado 8 flavonoides distintos a partir del espárrago triguero OH Quercitina R1: Rhamnosa – Rhamnosa – Glucosa – ( Quercitin - 3 – rhamnosyl – rutinosido) OH HO O R2: Glucosa – Rhamnosa – Glucosa – (Quercitin – 3 – glucosil – rutinosido) R3: Rhamnosa – Glucosa – (Quercitin – 3 – rutinósido) (Rutina) O OH HO R O Kamferol OH O R1: Rhamnosa – Glucosa – (Kamferol – 3 – rutinósido) (Nicotiflorin) O OH R O OCH3 Isoramnetina OH HO R1: Rhamnosa – Rhamnosa – Glucosa - = Isorhamnetin - 3 – rhamnosyl - rutinosido O R2: Glucosa – Rhamnosa – Glucosa - = Isorhamnetin – 3 – glucosil - rutinosido R3: Rhamnosa – Glucosa - = Isorhamnetin – 3 – rutinósido (Narcisin) O OH O R R4: Glucosa - = Isorhamnetin – 3 – glucósido CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS Clasificación en base a la composición en flavonoides K-means clustering analysis for 97 cases 2 1 2A 21 cases: 21 TRIG Compound 2B 21 cases: 16 CH and 15 TRIG %Relative Compound %Relative 55 cases: 16 CH and 39 TRIG Compound %Relative Q-triglycoside 9 Q-triglycoside 0 Q-triglycoside 0 Q-triglycoside 8 Q-triglycoside 18 Q-triglycoside 5 IR-triglycoside 4 IR-triglycoside 0 IR-triglycoside 0 Rutin 54 Rutin 78 Rutin 90 IR-triglycoside 6 IR-triglycoside 1 IR-triglycoside 1 Nicotiflorin 4 Nicotiflorin 1 Nicotiflorin 1 Narcissin 15 Narcissin 1 Narcissin 2 IR-3-O-glucoside 0 IR-3-O-glucoside 0 IR-3-O-glucoside 0 Saponinas del espárrago CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS O PLAVERD 100 % Los cultivares mundiales contienen básicamente una sola saponina la protodioscina que es un glicósido de la diosgenina. O RO H1 0 10.00 20.00 30.00 40.00 sapraiz 100 50.00 Time 60.00 70.00 80.00 90.00 3: Scan ESSum 7.88e4 H1 H3 En el espárrago triguero se distinguen hasta seis saponinas distintas. Todas son glicósidos de sarsasapogenina. H2 % H6 H4 H5 0 Time 10.00 20.00 30.00 40.00 50.00 26 3: Scan ESSum 2.90e3 60.00 70.00 80.00 90.00 CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS Se han aislado y caracterizado 6 saponinas distintas a partir del espárrago triguero OH O O R2 O O R1 R1 ESPIROSTANOIDE FUROSTANOIDE OH O R2 R2= Glc Ra O R1= -Glc Ra R1 Clasificación en base a la composición en Saponinas Sólo Protodioscina Protodioscina y otras saponinas derivadas de sarsasapogenina CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS Sólo contienen saponinas derivadas de la sarsasapogenina 80% Huetor Especies Silvestres excepto Officinalis •Híbridos comerciales (96%) •Asparagus Officinalis •Híbridos comerciales (4%) •Huetor (20%) Conclusiones CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS La mayoria de las especies de espárrago triguero silvestre son distintas a la Officinallis: •Sus flavonoides derivan no solo de quercitina sino además de isoramnetina y kaemferol. •Sus saponinas derivan de sarsapogenina y no de diosgenina. Los cultivares mundiales tienen una composición similar al Officinallis. Los genotipos de espárrago de Huetor-Tájar tienen una composición más parecida al resto de las especies silvestres. Efectos en la salud del consumo de espárrago Metabolismo lipídico y Citotoxicidad frente a celulas tumorales Efecto del consumo de espárrago sobre el metabolismo lipídico (modelo de rata) Grupo control sin colesterol Dieta alta en colesterol Dieta alta en colesterol suplementada con espárrago o con sus componentes •Niveles de colesterol y trigliceridos •Estado antioxidante CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS Metabolismo Lipídico CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS Triglicéridos 80 mg/dL 60 * ** *** *** 40 20 Colesterol total 200 FS FF V F E LE C C C S 0 mg/dL 150 100 ** *** *** *** El consumo de espárrago mejora el perfil lipídico plasmático 50 FS FF V F E LE C C C S 0 LDL-c HDL-c 150 40 *** mg/dL 100 20 ** *** *** 50 *** 10 FS FF V F E LE C C C FS FF V F E LE C C S S 0 0 C mg/dL 30 Estado antioxidante CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS CATALASA 1500 mU/mg prot *** *** 1000 SOD 500 2.5 *** 0 FS FF V F LE C S 2.0 *** ** *** * GP U/mg prot E C C El consumo de espárrago mejora el estado antioxidante general 200 1.5 1.0 0.5 * 100 50 FS FF V F E LE C C C 0.0 S 150 GR 50 * * * 30 20 10 FS FF V F E LE C S 0 C mU/mg prot 40 C FS FF V F E LE C C S 0 C mU/mg prot ** CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS Daño celular PEROXIDACIÓN LIPÍDICA 4 *** *** *** *** *** 2 FS FF V EF LE C C S 0 C nmoles M DA/100mg tejido 6 Macromorfologia del hígado CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS Dieta alta en colesterol Grupo control Dieta alta en colesterol suplementada con espárrago CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS Citotoxicidad de saponinas: 120 24 h 48 h Cell Viability 100 80 60 40 20 0 0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 Concentración μg/ml Las saponinas del espárrago presentan actividad citostática Actividad citostática de flavonoides y saponinas CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS •Actividad citostática frente a células HTC116. •Ciclo celular mediante citometria de flujo. •Apoptosis/necrosis. •Los flavonoides originales no presentan actividad citostatica •Las geninas sin embargo si, aunque con distintos efectos sobre el ciclo celular y sobre la relación apoptosis/necrosis. Colaboraciones Departamento de farmacognosia Universidad de Sevilla. Dra. Rocio de la Puerta. Departamento de Genetica Universidad de Córdoba. Dr. Juan Gil. CIFA Las Torres. Dr. Pedro Cermeño. Grupo de nutrición celular y molecular del Instituto de la Grasa. Dr. Francisco J. García Muriana. CENTROSUR. Consejo Regulador de la denominación específica Espárrago de Huétor Tájar. Dr. Juan Antonio Espejo