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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO COLEGIO DE CIENCIAS Y HUMANIDADES PLANTEL ORIENTE ÁREA DE CIENCIAS EXPERIMENTALES “Proyectos Experimentales para el Laboratorio de Ciencias de la Materia de Biología I” Autor: M. en C. María Angélica Médicis de Vélez. Agosto de 2011 Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 1 ÍNDICE Presentación del Manual-------------------------------------------------------- Pag. 3 Indicaciones al Profesor para la utilización del Manual de Proyectos Experimentales. ------------------------------------- Pág. 5 Sugerencias de formas de Evaluación.------------------------------------- Pág. 7 Proyecto Experimental: “Actividad de la Enzima Catalasa” : ---------- Pág. 8 Proyecto Experimental: “Respiración Aerobia en las Semillas”---------Pág. 23 Proyecto Experimental: “Identificación y Cruzas entre Mutantes de Drosophila melanogaster”---------------------------------------------------------------------- Pág. 34 Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 2 Presentación: La biología debe considerarse como una disciplina del conocimiento que se caracteriza tanto por sus métodos y estrategias, como por el objeto de estudio sobre el cual pone atención para obtener nuevos conocimientos, así un curso de Biología deberá tratar de lograr que el alumno desarrolle su capacidad para formular preguntas, encontrar respuestas y explicaciones racionales acerca de la vida. Por otra parte, la Biología como ciencia experimental, tiene como forma básica de trabajo la observación y la experimentación; lo que significa tener o desarrollar una habilidad especial para registrar los hechos, organizar la información y fundamentar para explicar, predecir, analizar, y verificar fenómenos. Una forma de acercarnos a conocer el mundo natural, es posible si tomamos un fenómeno y lo llevamos a la dimensión de un modelo, permitiéndonos acercarnos tanto a la descripción como a la predicción, tratando con ello de hacer generalizaciones que puedan permitirnos avanzar en el conocimiento. Si el alumno es capaz de reconocer en los modelos su función explicativa y como analogías sucesivas que pueden servir como herramienta para visualizar ciertos aspectos que manejan las teorías; la consecuencia de esta forma de pensar, será el poder establecer la síntesis de los diferentes elementos en un gran complejo. La idea predominante entre los educadores de ciencias es que la experiencia práctica es la esencia del aprendizaje científico, ya que promueve la adquisición de una serie de procedimientos y habilidades científicas, desde las más básicas (utilización de aparatos, medición, tratamiento de datos, etc.) hasta las más complejas (investigar y resolver problemas haciendo uso de la experimentación). Es clara la importancia de que los trabajos experimentales deben tener como actividad de aprendizaje estos procedimientos. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 3 El logro de dichas habilidades, a diferente nivel, como una manera de ilustrar o de comprobar experimentalmente los hechos y leyes científicas presentadas previamente por el profesor (paradigma de enseñanza por transmisión), son los objetivos didácticos de las actividades de laboratorio. Sin embargo, el enfoque que se da a los trabajos experimentales, depende de los objetivos que se quieren conseguir a través de su realización, y éstos objetivos dependen de la concepción que se tiene de cómo se hace ciencia y de cómo se puede aprender ciencia, en un ámbito escolar. El surgimiento de una concepción constructivista de la enseñanza y aprendizaje de la ciencia, ha logrado que los maestros valoren la importancia de los conocimientos previos de los alumnos y las expectativas teóricas que se tienen respecto a los fenómenos que se investigan. Entonces no se trata tanto de descubrir, sino de construir este conocimiento, a partir de la interacción de nuestras ideas con las de los demás y con la experiencia fundamentada en nuestras concepciones. El trabajo aquí elaborado, trata de alejarse de la interpretación simplista de las prácticas de laboratorio, se trata de actividades semi-abiertas que inducen al alumno al planteamiento de sus propias hipótesis lo que significa tener en cuenta explicaciones alternativas a las científicas que pueden ser comprobadas por los alumnos mediante experimentos y/o razonamientos, que los hagan compatibles o no con sus planteamientos y concepciones. En las investigaciones experimentales, el profesor debe guiar a los alumnos en el planteamiento de preguntas y problemas para propiciar que ellos propongan sus hipótesis, y sugieran estrategias experimentales para comprobarlas. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 4 Indicaciones al Profesor para la utilización del Manual de Proyectos Experimentales: El Manual de Proyectos Experimentales para el Laboratorio de Ciencias del bachillerato de la UNAM, tiene como objetivo apoyar los temas del Programa de Biología I, utilizando el equipo de cómputo, sensores, simuladores y materiales con los que se cuenta en estos laboratorios de los Colegios de Ciencias y Humanidades. Los proyectos que se proponen son actividades semi-abiertas, es decir, el trabajo del profesor es la de mediador y guía para que los alumnos resuelvan una problemática planteada, con base en las preguntas planteadas sobre temas interesantes y reales, para despertar la curiosidad en ellos. Con estas investigaciones experimentales, se pretende desarrollar habilidades y destrezas, en la utilización y manipulación del equipo, con el uso de las TIC para enriquecer la enseñanza aprendizaje. En cada uno de los proyectos experimentales, se señala su ubicación en el programa, la unidad y el tema correspondiente. Se indican también, los conceptos previos que son necesarios para abordar la investigación. Para la realización de las investigaciones experimentales de forma semi-abierta se sugieren preguntas generadoras, que el profesor podrá plantear a los alumnos, con el fin de despertar su curiosidad e interés por investigar, el profesor solicitará a sus alumnos sus posibles respuestas, para guiarlos en el planteamiento de las hipótesis. En cada proyecto de investigación que aquí se propone, se plantean los aprendizajes que se pretende lograr en los alumnos, los cuales son pertinentes con los de la asignatura, la unidad y el tema del programa de Biología I. Se describen los procedimientos experimentales, incluyendo el equipo, materiales y sustancias requeridos, sin embargo, se deja al criterio del profesor Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 5 solicitar a los alumnos que elaboren sus propios diseños experimentales, aunque siempre con la guía y asesoría del mismo. En cada una de las actividades se detalla el número de sesiones y su posible duración. Dependiendo de la actividad que el profesor vaya a realizar, se anexa la liga de los tutoriales para el manejo de los sensores y los simuladores. También se incluyen anexos para cada una de las actividades en las que fueron requeridos. Se deben tomar en cuenta los rasgos psicológicos y socioculturales del alumno así como sus expectativas para la correcta implementación de las investigaciones experimentales. Se sugieren al profesor, en este manual, las posibles formas de evaluación de las investigaciones de los alumnos. Se recomienda al profesor orientar el trabajo del alumno en torno al problema planteado, promoviendo que se generen ideas de acuerdo a sus conceptos previos y las investigaciones bibliográficas, guiando en la investigación experimental, así como en la posterior interpretación de sus resultados y elaboración de conclusiones para que el alumno logre la estructuración de sus conocimientos. Con éstas investigaciones se buscará que el alumno construya los conceptos básicos, incremente su capacidad de observación, análisis y elaboración de conclusiones. El profesor promoverá el desarrollo habilidades, actitudes y valores en los alumnos. Finalmente se propone organizar el proceso de enseñanza aprendizaje en torno al planteamiento de un problema que promueva la discusión, con cuestionamientos que conduzcan al alumno a la búsqueda de fuentes de diversos tipos, como es el uso de las TIC, para que le brinden una mayor comprensión del tema estudiado. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 6 Sugerencias de formas de evaluación: La evaluación del trabajo experimental debe ser formativa, esto es, debe realizarse durante el desarrollo de la actividad por medio de registros observables realizados por el profesor, tanto de las habilidades como de los conceptos que se pretende que alcancen los alumnos, la evaluación debe abarcar tanto la participación individual como la de equipo. La evaluación debe ser funcional, continua y retro alimentadora. Las actividades experimentales se deben evaluar tanto conceptualmente como procedimentalmente, mediante la observación directa durante el desarrollo de los experimentos y los informes escritos entregados por los alumnos. Las actividades experimentales desarrolladas en el laboratorio permitirán a los alumnos los aprendizajes significativos propios de la disciplina. La evaluación considerada para este tipo de actividades experimentales debe ser holística es decir global y no atomizada en cada fase o actividad del alumno, también debe ser formativa, ya que, el cambio en las actitudes y valores mostradas por los alumnos deben ser evidentes durante el desarrollo de las actividades experimentales realizadas en el Laboratorio de Ciencias. Para cada investigación experimental se proponen al final, cuestionarios abiertos y cuestionarios de opción múltiple. Se sugiere al profesor, también considerar lo siguiente: a) Hacer un examen diagnóstico sobre el tema. b) Revisión sobre el trabajo de investigación con el propósito de valorar las habilidades y destrezas en el manejo de la información. c) Valoración de la capacidad de observación y habilidades durante el desarrollo de la investigación experimental. d) Sesiones para valorar y retro alimentar los resultados de las investigaciones experimentales y temas desarrollados. e) Resolver Cuestionarios y la Elaboración de la “V” de Gowin. f) Revisión de los Informes escritos de los alumnos sobre su Investigación Experimental. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 7 UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO COLEGIO DE CIENCIAS Y HUMANIDADES PLANTEL ORIENTE PROYECTO EXPERIMENTAL PARA EL LABORATORIO DE CIENCIAS: ACTIVIDAD DE LA ENZIMA CATALASA Asignaturas que apoya: BIOLOGÍA I: Segunda Unidad ¿Cómo se lleva a cabo la regulación, conservación y reproducción de los sistemas vivos? Tema II. Procesos de conservación Biología III: Primera Unidad ¿Cómo se explica la diversidad de los Sistemas vivos a través del metabolismo? Tema I. Metabolismo: Enzimas Conceptos previos: Enzima, sustrato, sitio activo, energía de activación, oxidación, velocidad de reacción, coenzima. Cuestionario diagnóstico: El profesor aplicará un cuestionario diagnóstico antes de iniciar el tema para verificar los conceptos previos de los alumnos y así planear su tratamiento en clase. Aprendizajes del alumno: Comprenderá cuál es la función de las enzimas Describirá las características y función de la enzima catalasa. Comprenderá la relación enzima-sustrato. Observará y determinará la producción de oxígeno al descomponer la catalasa en el peróxido de hidrógeno. Determinará cómo afecta el Ph la actividad de la enzima catalasa. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 8 Determinará como afecta la temperatura la función de la enzima catalasa. Realizará diferentes experimentos con el simulador “Laboratorio de Enzimas” del Laboratorio de Ciencias, cambiando las variables que intervienen en la actividad enzimática. Comprenderá, a través de la elaboración de un modelo, la relación enzima sustrato. Lograrán una mayor comprensión de los factores que afectan la actividad enzimática. PRIMERA SESIÓN (Duración 2 horas) Preguntas generadoras: ¿Sabes por qué se utiliza el agua oxigenada como desinfectante para las heridas? ¿Sabes por qué cuando una persona aplica agua oxigenada en una herida, se produce un burbujeo? ¿Te has preguntado por qué se menciona frecuentemente en los comerciales, que son muy importantes los antioxidantes para mantener la salud y evitar el envejecimiento? Introducción al Tema: El profesor expone el tema sobre metabolismo y actividad enzimática, la relación enzima –sustrato, la energía de activación y los conceptos de óxido reducción. Las enzimas son proteínas de alto peso molecular, que actúan como catalizadores y controlan los procesos metabólicos de la célula. Una enzima hace que una reacción química, que es energéticamente posible, pero que transcurre a una velocidad muy baja, sea cinéticamente favorable, es decir, transcurra a mayor velocidad, que sin la presencia de la enzima. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 9 En estas reacciones, las enzimas actúan sobre unas moléculas denominadas sustratos, las cuales se convierten en moléculas diferentes denominadas productos. Casi todos los procesos en las células necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas significativas. Como todos los catalizadores, las enzimas funcionan disminuyendo la energía de activación de una reacción, de forma que se acelera sustancialmente la tasa de reacción. Las enzimas no alteran el balance energético de las reacciones en las que intervienen, ni modifican por lo tanto, el equilibrio de la reacción, pero si consiguen acelerar el proceso incluso millones de veces. Una reacción que se produce bajo el control de una enzima, o de un catalizador en general, alcanza el equilibrio mucho más rápido que la correspondiente reacción no catalizada. Factores físico-químicos que pueden modificar la actividad enzimática Temperatura: Las enzimas son sensibles a la temperatura pudiendo verse modificada su actividad por este factor. Los rangos de temperaturas óptimos pueden llegar a variar sustancialmente de unas enzimas a otras. Normalmente, a medida que aumente la temperatura, una enzima verá incrementada su actividad hasta un punto en que comience la desnaturalización de la misma, lo que dará lugar a una reducción progresiva de su actividad. PH: El rango de Ph óptimo, también es muy variable entre diferentes enzimas. Si el Ph del medio se aleja del óptimo de la enzima, esta verá modificada su carga eléctrica al aceptar o donar protones, lo que modificará la estructura de los aminoácidos y por tanto la actividad enzimática. Concentración salina: Al igual que en los casos anteriormente mencionados, la concentración de sales del medio es crucial para una óptima actividad enzimática. Una elevada concentración o una ausencia de sales en el medio pueden impedir su actividad, ya que las enzimas requieren de una adecuada concentración de iones para mantener su carga y su estructura proteica. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 10 Durante los procesos biológicos y en el constante intercambio con el medio, en el organismo, se generan los radicales libres, que se caracterizan por presentar un electrón desapareado y por ser muy reactivos. De todos los radicales libres resultan de gran interés las especies reactivas derivadas del oxígeno, como: el anión súper óxido (O2), el radical hidroxilo (OH+), y el peróxido de hidrógeno (H2O2). Estos radicales están implicados en el daño celular de forma tal que las agresiones oxidantes pueden resultar en carcinogénesis, enfermedades inflamatorias, senectud celular y enfermedades neurodegenerativas, entre otros procesos patológicos. En el organismo existe un sistema de protección antioxidante formado por enzimas y compuestos de bajo peso molecular. Una de las enzimas que interviene en la protección y en consecuencia, en el mantenimiento del balance oxidante/antioxidante es la catalasa. La enzima catalasa es una oxidorreductasa, es decir que cataliza reacciones de oxido-reducción. Tras la acción catalítica queda modificada en su grado de oxidación por lo que debe ser transformada antes de volver a actuar de nuevo. La catalasa es una enzima que se encuentra en organismos vivos y cataliza la descomposición del peróxido de hidrógeno (H2O2) en oxígeno y agua. El peróxido de hidrógeno es un residuo del metabolismo celular de muchos organismos vivos y tiene entre otras una función protectora contra microorganismos patógenos, principalmente anaerobios, pero dada su toxicidad debe transformarse rápidamente en compuestos menos peligrosos. Esta función la efectúa esta enzima que cataliza su descomposición en agua y oxígeno. El mecanismo completo de la catalasa se describe en la reacción química: 2 H2O2 2 H2O + O2 La enzima catalasa se encuentra en el hígado y en la sangre, su función es evitar que el peróxido de hidrógeno se acumule en las células, donde puede intervenir en otras reacciones celulares. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 11 Cuando se aplica agua oxigenada (peróxido de hidrógeno al 3 %) sobre una herida la enzima catalasa, presente en la sangre, cataliza el peróxido de hidrógeno y lo descompone en agua y oxígeno. El profesor expone al grupo los conceptos básicos. El tutorial para desplegar las pantallas es: Ver desde el laboratorio Ver desde internet Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 12 SEGUNDA SESIÓN (Duración 2 horas) PARTE 1: Efecto de la temperatura sobre la actividad de enzima catalasa: Investigación Experimental: Se propone que ésta sea una investigación semi-abierta, donde el profesor dirige al alumno para que a partir del planteamiento del problema, el alumno proponga sus hipótesis y realice una experimentación para comprobarla, con la guía del profesor. Planteamiento del problema: ¿Qué es una enzima? ¿Cuál es la función de la enzima catalasa? ¿Cómo afecta la temperatura a la función de enzima catalasa? Planteamiento de la hipótesis El profesor discutirá con sus alumnos, (con base en la información dada por la exposición del profesor y las investigaciones bibliográficas que realicen los alumnos) las posibles hipótesis para responder a los planteamientos del problema. Ver desde el laboratorio Ver desde internet Material: 6 tubos de ensaye 3 tapones de hule horadado Balanza granataria o digital. Rejilla para tubos de ensaye Tubo de vidrio angosto Kit de sensor de presión LESA. Peróxido de hidrógeno Papa (se puede utilizar también plátano) Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 13 Procedimiento: 1.- Rotule los tubos de ensayo del 1 al 3. 2.- Introduzca 4 gr., de papa macerada a cada tubo 3.- Mantenga los tubos a las siguientes temperaturas: Tubo 1 = 37 °C Tubo 2 = 80 °C Tubo 3 = Congelador a 4 °C por 20 minutos 4. Añada 2 ml de peróxido de hidrógeno a cada tubo*. 5. Observe la reacción que se produce de inmediato. 6. Los alumnos utilizarán el sensor de PRESIÓN, para determinar la cantidad de oxígeno liberado durante la reacción, para cada tubo experimental. *Inmediatamente después de haber agregado el peróxido de hidrógeno hay que poner el tapón conectado a un tubo de vidrio al sensor de presión. Programe el tiempo de registro, se sugieren intervalos de cada 5 segundos por 2 minutos, para cada registro. Obtenga las gráficas para cada tubo. Sensor de presión LESA Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 14 Resultados: Los alumnos analizarán sus resultados de acuerdo a sus gráficas y los mostraran (a través de las computadoras del laboratorio) a sus compañeros para discutirlos en el grupo. El tutorial para manejo de sensores LESA del laboratorio: Ver desde los laboratorios Ver desde internet Los alumnos grabarán en video la actividad enzimática de los tubos de experimentación, como un registro de sus resultados. El tutorial para gravar el video es: Ver desde los laboratorios Ver desde internet Conclusiones: Los alumnos discutirán en el grupo las conclusiones. Elegir alumno modelo y mostrar la actividad de una mesa de trabajo en todas las computadoras del laboratorio. Usar el siguiente tutorial: Ver desde los laboratorios Ver desde internet Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 15 Parte 2 El efecto del Ph sobre la actividad de la enzima catalasa: Planteamiento del problema: ¿Cómo afecta el Ph la actividad de la enzima catalasa? Investigación Experimental: Se propone que ésta sea una investigación semi-abierta, donde el profesor dirige al alumno para que a partir del planteamiento del problema, el alumno proponga sus hipótesis y realice una experimentación para comprobarla, con la guía del profesor. Procedimiento: 1. Rotular tres tubos de ensaye. 2. Al tubo número 1, poner 2ml. de agua destilada y agregar 4 gr. de papa triturada, y a continuación agregar 2ml.de peróxido de hidrógeno o agua oxigenada. 3. Al tubo número 2, agregar 2ml. de ácido clorhídrico (HCL) al 1 Molar, agregar 4 gr. de papa triturada y a continuación agregar 2ml.de peróxido de hidrógeno. 4. Al tubo número 3, agregar 2ml. de hidróxido de sodio., (NaOH) al 1 Molar poner 4 gr. de papa triturada y a continuación agregar 2ml.de peróxido de hidrógeno. 5. Después de haber agregado el agua oxigenada se tapará de inmediato cada tubo con el tapón conectado con tubo de vidrio al sensor de presión Anteriormente, se habrá programado el tiempo de medición, (intervalos de cada 5 segundos por 2 minutos). 6. Registrar las gráficas para cada experimento, y analizar sus resultados. Resultados: Los alumnos exponen al grupo sus resultados y los discuten para obtener sus conclusiones. Discusión de resultados: El profesor guiará la discusión, donde cada equipo presentará sus resultados, a través del despliegue de pantallas: Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 16 Ver desde los laboratorios Ver desde internet Conclusiones: El profesor dirigirá la discusión grupal para que los alumnos planteen sus conclusiones, donde cada equipo las plasmará en la plantilla correspondiente en su computadora. Utilizar el tutorial: Ver desde el laboratorio Ver desde internet TERCERA SESIÓN (Duración 2 horas) ACTIVIDADES DE REFORZAMIENTO DE CONCEPTOS Con la implementación de estas actividades se pretende que los alumnos refuercen sus conceptos la actividad de las enzimas. 1. Manejo del Simulador “Laboratorio de Enzima” Los alumnos reforzarán los conceptos a través de simulador para la actividad enzimática, donde podrán seleccionar el tipo de enzima, y experimentar, cuantificando la velocidad de reacción, con diferentes variables como: Concentración de Enzima Concentración de Sustrato Temperatura Ph. Al final obtendrán las gráficas de sus resultados experimentales para elaborar sus conclusiones. . (Se sugiere que cada equipo trabaje sobre diferente enzima con variables diferentes, para poder contrastar sus resultados con sus compañeros). Al usar el simulador es importante, como lo especifica el tutorial, que los alumnos observen en el zoom, la actividad enzimática a nivel de moléculas El tutorial para desplegar y usar el simulador es: Ver desde el laboratorio Ver desde internet Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 17 2. Elaboración de “Modelo de la Actividad Enzima-Sustrato” Con base en la plantilla (Anexo 1) se indicará a los alumnos que diseñen y elaboren su propio modelo de enzima, con la interacción Enzima-Sustrato. Objetivos: El alumno comprenderá que las enzimas catalizan de manera específica las reacciones químicas de la célula. El alumno comprenderá la interacción enzima-sustrato. El alumno comprenderá el significado de sitio activo de la enzima. Material: Tres hojas foami de diferente color Tijeras y Pegamento blanco I plumón y hojas blancas Procedimiento: 1.- Solicitar a los alumnos que diseñen y elaboren los moldes que representarán a su modelo. 2.- Recortar los moldes en las hojas de foami, considerando diferente color para la enzima-sustrato, pegar en una hoja de papel y rotular, de acuerdo a la reacción de la enzima, para cada caso. 3.- El alumno deberá representar las diferentes reacciones que se producen en la interacción enzima-sustrato. 4.-E l modelo que se muestra puede ser una guía para que el alumno diseñe y elabore su propio modelo: Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 18 Modelo de la interacción Enzima-Sustrato: Resultados: Los alumnos de los diferentes equipos mostrarán al resto del grupo a través del video cámara los modelos que hayan construido para hacer la discusión de su resultado y conclusiones. Ver desde los laboratorios Ver desde internet Cuestionario de evaluación de la actividad: 1.- Explica cómo catalizan las enzimas una reacción. 2.- Explica cómo se regula la función de las enzimas. Actividades de aprendizaje y evaluación: El efecto del Ph en la función de las enzimas: El profesor indicará a los alumnos que se conecten a la página que aquí se indica para que en equipo realicen la actividad virtual y que resuelvan el test correspondiente a la actividad, en la siguiente página http://media.educ.ar/skoool/biology/ph_enzymes/index.html Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 19 El efecto de la temperatura en la función de las enzimas: Consulta la siguiente página y con base en la información que se te proporciona resuelve test correspondiente a la actividad, en la siguiente página: http://media.educ.ar/skoool/biology/temp_enzymes/index.html Conclusiones: Utilizar las plantillas para que cada equipo comparta con sus compañeros las conclusiones de su investigación. Utilizar el tutorial de plantillas de Datos: Ver desde el laboratorio Ver desde internet Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 20 Evaluación Cuantitativa de Contenidos Conceptuales: Evaluación Final o Sumativa de la Investigación Experimental: 1 ¿Cuál es la función de las enzimas? 2. ¿Cuál es la función de la enzima catalasa? 3. ¿Dónde se encuentra la catalasa? 4. ¿Cuál es el producto que obtuviste en tu experimento en la reacción del machacado de papa con el agua oxigenada? ¿Cuál fue la reacción que se llevó a cabo? 5.- ¿En tu experimento cuál fue el sustrato sobre el que actúo la enzima catalasa? 6.- ¿Por qué es importante la función de la enzima catalasa, en los seres vivos? 7.- ¿En tu experimento cómo afectó la temperatura a la actividad de la enzimática catalasa? 8.- ¿Cómo afectó el Ph la actividad de la enzima catalasa en el experimento? 9.- ¿Por qué se utiliza el agua oxigenada como un desinfectante? 10.- ¿Cita alguna enfermedad que se deba al mal funcionamiento de una enzima? 11.- ¿A qué conclusiones llegaste con la investigación experimental que realizaste? Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 21 Solución y discusión del cuestionario: El profesor realizará con el grupo la revisión y discusión del cuestionario, para aclarar las dudas y reforzar los conceptos adquiridos por los alumnos. Utilizar el alumno modelo, alternando los equipos, para la discusión. Ver desde el laboratorio Ver desde internet Bibliografía: Wallace Robert A., King Jack L. y Sanders Gerald P. Biología Molecular y Herencia, La Ciencia de la Vida, Editorial Trillas México 2007. Merchant Horacio y Jiménez Luis Felipe, Biología Celular y Molecular Editorial Prentice Hall 2005. Lehninger Albert L. Bioquímica Las Bases Moleculares de la Estructura y Función Celular Ediciones Omega S. A. Barcelona 2006 Brown T, Lemay Química La ciencia central Quinta Edición, PrenticeHall Hispanoamérica S.A. México. 2008 Burton D, J, Química Orgánica y Bioquímica. Sistemas Editoriales Técnicos S.A. de C.U. México 2006 Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 22 UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO COLEGIO DE CIENCIAS Y HUMANIDADES PLANTEL ORIENTE PROYECTO EXPERIMENTAL PARA EL LABORATORIO DE CIENCIAS: RESPIRACIÓN AEROBIA EN LAS SEMILLAS Asignaturas que apoya: Programa de Biología I Segunda Unidad: ¿Cómo se lleva a cabo la regulación, conservación y reproducción de los sistemas vivos? Tema: II Procesos de conservación 1. Respiración aerobia 2. Respiración celular Conceptos previos: Metabolismo: Anabolismo y catabolismo como procesos bioenergéticos. Respiración: Aspectos generales de la glucólisis, Mitocondria Ciclo de Krebs. Aprendizajes del alumno: Reconocerá que la respiración es una de las funciones vitales de todos los seres vivos. Comprobará que las semillas respiran. Cuantificará la liberación de bióxido de carbono en la respiración de las semillas. Comprenderá el proceso de la respiración aerobia. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 23 PRIMERA SESIÓN (Duración 2 horas) Cuestionario diagnóstico: El profesor aplicará un cuestionario diagnóstico antes de iniciar el tema para verificar los conceptos previos que tienen los alumnos y así planear su tratamiento en clase. Preguntas Generadoras: ¿Te has preguntado para qué respiramos? ¿Crees que las plantas respiran igual que nosotros? ¿Crees que las semillas respiran? Introducción al Tema: Las células emplean el oxígeno en la respiración para efectuar la oxidación de los alimentos ingeridos, esta oxidación trae como consecuencia el consumo del oxígeno y la constante producción del bióxido de carbono. Las células necesitan, por lo tanto renovar continuamente su provisión de oxígeno y desprenderse de bióxido de carbono. Las plantas, tanto como los animales respiramos, pero ¿respiran las semillas? Con una semilla en germinación podemos ver el cambio de un estado de latencia a un estado activo. Los requerimientos de la germinación son: agua para activar las enzimas de la semilla, oxígeno para la respiración celular y una temperatura adecuada para que la actividad de las enzimas sea óptima. La materia prima y fuente de energía para la respiración y el crecimiento en la germinación es el material nutritivo ya almacenado en la semilla, por lo tanto no es necesaria la fotosíntesis y por consiguiente la germinación no necesita luz, como tampoco necesita tierra. Los factores agua, aire, luz y tierra solo son necesarios para que la planta pueda vivir luego de la germinación. En la respiración aerobia en presencia de oxígeno, el ácido pirúvico proveniente de la glucólisis, se oxida totalmente en la mitocondria, este proceso se divide en dos fases. En la primera, el ácido pirúvico ingresa a la mitocondria donde es fraccionado y oxidado completamente hasta liberar CO 2, a este Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 24 proceso se le llama Ciclo de Krebs. (Hans Krebs postuló esta vía metabólica en 1937 y posteriormente recibió el premio Nobel por su trabajo) Como oxidantes en este proceso, actúan coenzimas, que a su vez son reducidas. El hidrógeno unido a las coenzimas es transferido en la segunda fase al oxígeno molecular, con formación de agua. La fórmula general de la respiración aerobia es: Estructura de la mitocondria. ¿En qué consiste el proceso de respiración? ¿Para qué respiramos? ¿Qué producimos durante el proceso de respiración? ¿Las semillas respiran? Planteamiento de Hipótesis: El profesor discutirá con sus alumnos, con base en la información dada por la exposición del profesor y las investigaciones bibliográficas que realicen los alumnos, ellos plantearán las hipótesis para responder a los planteamientos del problema. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 25 Aprendizajes de los Alumnos: Comprobarán que las semillas respiran como todos los seres vivos, para obtener energía. Comprobar que las plantas tienen respiración aerobia por lo que necesitan consumir oxígeno para liberar energía. Comprobarán que durante la respiración de las semillas se libera bióxido de carbono. Demostrarán que durante la respiración de las semillas hay liberación de energía, en forma de calor. Demostrarán que la respiración es una reacción exotérmica. Material: 4 Frascos de vidrio 1 Parrilla eléctrica 1 Balanza granataria Algodón 1Kg. De semillas de chícharo o de garbanzo. 2 vasos de precipitados de 250 ml. Equipo: Sensor de LESA (Presión) Equipo Alternativo: KIT de sensores para determinar bióxido de carbono y oxígeno) marca VERNIER Computadora Procedimiento: 1.- Se pesa la misma cantidad de semillas de chícharo, (200 gr.) para hacer cuatro lotes los cuales se etiquetarán de acuerdo a los siguientes lotes: Lote 1 semillas de chícharo sin remojo Lote 2 semillas chícharo con 12 horas de remojo Lote 3 semillas germinadas (poner a germinar con anterioridad) Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 26 Lote 3 semillas hervidas 2.- Se propone la utilización del sensor marca VERNIER, para determinación de bióxido de carbono y oxígeno, ya que el LESA, no cuenta con sensor de oxígeno y además no tiene la sensibilidad requerida para éste experimento. Explicar a los alumnos la metodología, y el uso del sensor para bióxido de carbono y oxígeno. Ajustar bien el sensor (para que no escape el gas) en el frasco con las semillas pesadas y tratadas según el lote experimental y programar el tiempo de medición que será de 12 hrs. Equipo de sensores VERNIER para oxígeno y bióxido de carbono. El profesor expone la metodología El tutorial para desplegar las pantallas es: Ver desde el laboratorio Ver desde internet Obtención de resultados: Al finalizar la medición obtener las gráficas en la computadora con los datos del sensor. Analizar los datos y elaborar las conclusiones. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 27 SEGUNDA SESIÓN (Duración 2 horas) PARTE 2 LIBERACIÓN DE ENERGÍA EN FORMA DE CALOR EN LA RESPIRACIÓN DE LAS SEMILLAS Investigación Experimental: Se propone que ésta sea una investigación semi-abierta, donde el profesor dirige al alumno para que a partir del planteamiento del problema, el alumno proponga sus hipótesis y realice una experimentación para comprobarla. Aprendizajes de los alumnos: Demostrar que durante la respiración de las semillas hay liberación de energía. Demostrar que la respiración es una reacción exotérmica. Comprender que mediante el proceso de respiración los seres vivos obtienen la energía para realizar sus funciones metabólicas. Planteamiento del problema: ¿Durante la respiración se libera energía? ¿Qué tipo de energía que se libera durante la respiración? ¿Las semillas cuando respiran liberan calor? ¿Qué tipo de reacción es la respiración? Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 28 Desarrollo de la investigación experimental: El profesor planteará las preguntas problema al grupo, para que ellos formulen sus respuestas y las planteen a manera de hipótesis, para comprobarlas experimentalmente. El profesor guiará a los alumnos en el manejo de variables y los asesorará en la utilización del material y el equipo. Material: 3 matraces erlemayer de 500 ml. ó frascos de vidrio. Algodón. Termómetro 30 Semillas de chícharo sin germinar 30 Semillas de chícharo germinadas 30 Semillas de chícharo hervidas Tapón de hule horadado. (También se pueden usar semillas de garbanzo) Equipo: Kit del sensor de temperatura de LESA Procedimiento: 1. Hacer tres lotes con las semillas y etiquetar cada uno de los matraces a) Semillas sin germinar b) Semillas germinadas c) Semillas hervidas 2. Colocar las semillas dentro del matraz ó frasco e introducir el sensor de temperatura de LESA y ajustar con un tapón de algodón muy apretado, para que no se escape el aire. 3. Programar la toma de datos en la computadora de cada 10 minutos hasta completar los 60 minutos. Realizar las seis mediciones y graficar los resultados. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 29 4. También se deberá registrar la temperatura ambiente del laboratorio, al mismo tiempo que se realiza el experimento. Nota: también se puede utilizar el termómetro como una alternativa. El cual debe ir colocado en un tapón horadado a presión en el matraz. Dispositivo para el experimento con el sensor de temperatura. Sensor de temperatura LESA. El profesor indicará a los alumnos su manejo. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 30 Tutorial para manejo de sensores LESA del laboratorio: Ver desde el laboratorio Ver desde internet Obtención de Resultados: Usar la tabla siguiente para registrar los resultados y a continuación, represéntela como un gráfico. TABLA DE RESULTADOS Temperatura / ° C Tiempo de mediciones Temperatura del laboratorio Frasco de las semillas Frasco de Frasco de las las semillas semillas germinadas Sin germinar hervidas 10 min. 20 min 30 min. 40 min. 50 min. 60 min. Análisis de resultados: Los alumnos observarán, registraran sus datos y graficarán sus resultados del experimento. Discusión de resultados: Los alumnos discutirán los resultados obtenidos para obtener sus explicaciones, con respecto a las hipótesis planteadas. Conclusiones: El profesor dirige la discusión en el grupo para que cada equipo exponga sus resultados y plantee sus conclusiones. El tutorial de manejo de computadora es: Ver desde el laboratorio Ver desde internet Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 31 Evaluación Final o Sumativa de la Investigación Experimental: Evaluación cuantitativa de contenidos conceptuales: 1.- Explica qué es la respiración celular: 2.- Define qué es la respiración aerobia. 3.- ¿Por qué el oxígeno es indispensable en la respiración celular? 4.- ¿Qué tipo de respiración tienen las plantas y las semillas? 5.- Con base en el experimento que realizaste, ¿podría servir éste método experimental, para determinar si las semillas están muertas? ¿Por qué? 6.- En experimento que realizaste ¿las semillas liberaron calor? ¿Por qué? 7.- ¿En el experimento las semillas germinadas, respiraron más que las semillas remojadas? ¿Por qué? 8.- ¿En el experimento las semillas remojadas en agua, respiraron más que las semillas secas? ¿Por qué? 9.- En el experimento que realizaste ¿Las semillas hervidas respiran? ¿Por qué? 10.- ¿Cuál es el balance energético final de la respiración aerobia de la degradación total de una molécula de Glucosa? 11.- ¿Cuántas moléculas de CO2 liberan en una vuelta del ciclo Krebs? El tutorial de manejo de despliegue de pantallas es: Ver desde el laboratorio Ver desde internet Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 32 BIBLIOGRAFÍA: Alberts, B., D. Bray, A. Johnson, J. Lewis, M. Raff, K. Roberts y P. Walter “Essential Cell Biology. An Introduction to the Molecular Biology of the Cell”. Garland Publishing, Inc., New York & London. (2006) Lehninger Albert L. Bioquímica Las Bases Moleculares de la Estructura y Función Celular Ediciones Omega S. A. Barcelona 2006. Lodish H, Berk A. Et Al. Biología Celular y Molecular, Editorial Médica Panamericana, México 2005. Purves, K.W., D. Sadava, G.H. Orians & H.C. Heller Vida. La Ciencia de la Biología, 6ª. Edición. Editorial Médica Panameicana, México 2005. Cooper, G.M. La Célula. 3ª Edición. Marbán Libros, S.L., Madrid España. 2005. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 33 UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO COLEGIO DE CIENCIAS Y HUMANIDADES PLANTEL ORIENTE PROYECTO EXPERIMENTAL PARA EL LABORATORIO DE CIENCIAS: IDENTIFICACIÓN Y CRUZAS ENTRE MUTANTES DE Drosophila melanogaster Asignaturas que apoya: BIOLOGÍA I: Tercera Unidad ¿Cómo se transmite y modifica la información genética en los sistemas vivos? Tema I. Mecanismos de la herencia: Concepto de mutación. Importancia de las mutaciones como mecanismos de variabilidad biológica. Conceptos previos: Concepto de nucleótido, gen, alelo, genoma, cromosoma, núcleo, fenotipo, genotipo, heterocigoto, homocigoto, híbrido, mutación. Aprendizajes del Alumno: Diferenciarán las características que distinguen las hembras de los machos en Drosophila melanogaster. Diferenciarán las características fenotípicas entre la mosca silvestre y .las moscas mutantes de Drosophila melanogaster. Comprenderán que el estudio de las características ó marcadores genéticos de las moscas mutantes de Drosophila melanogaster, son de gran importancia para la investigación sobre la función de los genes. Comprobarán las leyes de la Herencia Mendeliana a través de las cruzas de moscas mutantes, en el simulador “Drosophila Genetics Laboratory”. Comprenderán que las mutaciones, producen variaciones en las poblaciones y que éstas producen la evolución de los seres vivos. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 34 PRIMERA SESIÓN (Duración 2 horas) Cuestionario diagnóstico: El profesor aplicará un cuestionario para determinar los conceptos previos de los alumnos y así planear su exposición de clase e investigaciones de los alumnos. Preguntas generadoras: ¿Crees que podrías identificar a un mutante? ¿Existirán moscas de la fruta mutantes? ¿Se podrá diferenciar el sexo en las moscas de la fruta? ¿Qué pasará si se cruzan entre sí moscas mutantes de Drosophila? Introducción al Tema: La mosca Drosophila es una especie de díptero que ha sido utilizada frecuentemente en la experimentación genética, dado que posee un reducido número de cromosomas que son cuatro pares, tiene un breve ciclo de vida de 15 días a 20°C, y aproximadamente el 61% de los genes de enfermedades humanas que se conocen, tienen una contrapartida identificable en el genoma de las moscas Drosophila, y el 50% de las secuencias proteínicas de la mosca tienen analogía con las de los mamíferos. Para propósitos de investigación, fácilmente pueden reemplazar a los humanos. Como se reproducen rápidamente, se pueden estudiar muchas generaciones en un corto espacio de tiempo. Además en las glándulas salivales de sus larvas, se forman unos "cromosomas gigantes", que permiten observar las mutaciones de este organismo con una gran facilidad. Desde que Thomas Morgan a principios del siglo XX, la adoptó como una especie animal para la experimentación en genética, hasta ahora que su genoma completo ha sido secuenciado desde el año 2000, sigue siendo la “estrella” de la genética. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 35 Si existe un organismo del que se conoce mucho es la Drosophila melanogaster. Los biólogos han llegado a conocer la función de muchos genes de la Drosohila, estudiando sus mutantes: Si una alteración en un gen determinado causa la aparición de alas cortas consecuentemente, sabrán qué versión correcta del gen es la que originará a las alas normales en la mosca. Drosophila melanogaster tipo silvestre La mosca Drosophila ha facilitado el análisis de la inducción de mutaciones, por lo que es el eucarionte más estudiado y mejor conocido desde el punto de vista genético. Se puede asegurar que las mutaciones son una de las bases de las investigaciones en genética, ya que la variabilidad fenotípica resultante permite investigar los genes que controlan las características que se han modificado. En este sentido, las mutaciones sirven de “marcadores” para identificar a los genes, de manera que pueda seguirse su transmisión de padres a hijos. SEGUNDA SESIÓN (Duración 2 horas) IDENTIFICACIÓN DEL SEXO EN LA Drosophila melanogaster: Los alumnos identificarán el sexo en la mosca Drosophila melanogaster Trabajarán con cultivos de moscas silvestres, con el propósito de abordar conceptos como genotipo y fenotipo, mediante el reconocimiento de la morfología y dimorfismo sexual de la especie. En la primera parte de la investigación realizarán consultas en internet, con la intención de que los equipos utilicen las herramientas tecnológicas para hacer la búsqueda de la información. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 36 Preguntas Problema: ¿En todas las especies animales se podrá distinguir a las hembras de los machos? ¿Qué importancia tiene el dimorfismo sexual en los seres vivos? ¿Se podrá diferenciar el sexo en las moscas Drosophila melanogaster? *El profesor desplegará las pantallas de las computadoras de los alumnos para que éstos sigan los procedimientos. Tutorial para desplegar pantallas. Ver desde el laboratorio Ver desde internet Material: *Tubos de cultivo con moscas silvestres de Drosophila melanogaster *Tubos de cultivo con diferentes líneas mutantes de Drosophila melanogaster* *Nota. Las cepas de moscas Drosophila silvestres vivas que se requieren para esta actividad pueden solicitarse con anticipación a la fecha de uso, al “Banco de Drosophila”, en Facultad de Ciencias, UNAM. Tel fax.56225194 o en la dirección electrónica, prm@hp.fciencias.unam.mx Ver Nota Eterificadores (Construidos en el laboratorio) Algodón 2 Cajas de petri 2 Pinceles # 00 de pelo de camello Éter etílico Algodón Agujas de disección Cubre objetos y porta objetos Morgue (frasco de vidrio con tapa que contenga la mitad de glicerina o aceite y la otra mitad de alcohol al 70%) Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 37 Equipo: Microscopio Óptico Esteoscopio Cañón y pantalla para proyección Cámara fotográfica o cámara de video Computadora con el programa del simulador de Mutantes de Drosophila melanogaster Procedimiento: 1.-Para hacer sus observaciones se deberá anestesiar primero a las moscas, utilizando los eterificadores de la siguiente manera: Agregar de de 5 a 7gotas éter en el algodón del eterificador. 2.- Colocar el eterificador (por el lado del embudo), sobre el frasco ó tubo que contiene a las moscas en medio de cultivo. 3.- Invertir el frasco con las moscas sobre el eterificador y dar pequeños golpes para que las moscas caigan dentro del eterificador. 4.- Esperar el efecto anestésico de las moscas y vaciarlas dentro de una caja petri, para observarlas al estereoscopio, a diferentes aumentos. 5.- Para observar la morfología de las moscas, (dorsal y ventral), moverlas con ayuda del pincel de cerda fina. 6.- Con base en el esquema sobre la morfología de hembras y machos identificar ambos sexos. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 38 Registro de observaciones: 1. Identifique ambos sexos, basándose en los esquemas siguientes: Esquema del peine sexual del macho y la vista ventral del extremo abdominal de la hembra y del macho de Drosophila melanogaster. Esquema de los dos ejemplares, hembra y macho, comparar su tamaño y franjas en el abdomen. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 39 Cuadro comparativo: Machos Hembras Menor tamaño corporal 5 últimos segmentos abdominales con bandas oscuras que se ensanchan progresivamente El abdomen termina redondeado placa anal y genital pigmentada, castaño a gris oscuro Peine sexual en el tarso del primer par de patas Mayor tamaño corporal 7 últimos segmentos abdominales con bandas oscuras de igual grosor El abdomen termina en punta, placa anal y vaginal claras. Ausencia de peine sexual Característica de los fenotipos de hembra y macho de Drosophila melanogaster Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 40 TERCERA SESION (Dos horas) IDENTIFICACIÓN Y CRUZAS ENTRE MUTANTES DE Drosophila melanogaster: Preguntas Problema: ¿Qué son las mutaciones? ¿Podremos observar las mutaciones en el fenotipo de la mosca Drosophila melanogaster? ¿Qué resultado daría la cruza entre organismos mutantes de Drosophila melanogaster? ¿Algunas mutaciones serán dominantes con respecto a otras? Procedimiento: 1.-Para hacer sus observaciones se deberá anestesiar primero a las moscas de distintas cepas de mutantes, utilizando los eterificadores de la siguiente manera: Agregar de de 5 a 7 gotas éter en el algodón del eterificador. 2.- Colocar el eterificador (por el lado del embudo), sobre el frasco ó tubo que contiene a las moscas en medio de cultivo. 3.- Invertir el frasco con las moscas sobre el eterificador .y dar pequeños golpes para que las moscas caigan dentro del eterificador. 4.- Esperar el efecto anestésico de las moscas unos dos minutos y vaciarlas dentro de una caja petri, para observarlas al estereoscopio, a diferentes aumentos. Utilizar sólo el pincel de cerdas finas par mover las moscas. 5.- Observar el fenotipo de las moscas e identificar el tipo de mutante al que corresponde, (Ver Anexos 1,2 y 4) de acuerdo con la tabla ilustrada que se adjunta. 6.- Los alumnos tomarán una fotografía de cada mutante que hayan identificado. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 41 En la tabla adjunta (Anexo 3), harán una descripción de las características o fenotipos, observados en cada tipo de mutante de Drosophila. * El profesor indicará a los alumnos el uso de la cámara fotográfica. El tutorial para el uso de la cámara y video es: Ver desde los laboratorios Ver desde internet Cruza de mutantes en el simulador Drosophila Genetics Laboratory. : 1.- Utilizando el simulador. Los alumnos elegirán tres tipos de cruzas diferentes, utilizando progenitores machos y hembras mutantes. 2.- Los alumnos plantearán su hipótesis de resultados para cada cruza, basándose en los conocimientos previos, de Herencia Mendeliana y Herencia Ligada al Sexo. 3.- Realizar las cruzas en el simulador, observa y registra los resultados de las mismas. 4.- En cuadro señalar las características observadas en cada uno de los mutantes. SEXO CARÁCTER Color de ojos MACHO Forma de las alas Símbolo _________ Símbolo__________ Símbolo _________ Característica ______________ HEMBRA Color de cuerpo Característica _____________ Característica _____________ Símbolo _________ Símbolo__________ Símbolo _________ Característica ______________ Característica _____________ Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Característica _____________ Página 42 *El profesor indicará a los alumnos donde abrir la pestaña del simulador y la manera de usarlo. El tutorial para uso de simulador es: Ver desde el laboratorio Ver desde internet *Nota. Los mutantes de moscas Drosophila vivas que se requieren para esta actividad pueden solicitarse con anticipación a la fecha de uso, al “Banco de Drosophila”, en Facultad de Ciencias, UNAM. Tel fax.56225194 o en la dirección electrónica, prm@hp.fciencias.unam.mx Análisis de resultados: Los alumnos registrarán en una tabla los resultados obtenidos para cada cruza, utilizando cuadros de Punnet, señalando con letras la nomenclatura para cada característica o alelo en cuestión. En equipo los alumnos contrastarán las hipótesis planteadas. El alumno hará una discusión de porqué la mosca Drosophila ha sido y sigue siendo un organismo muy utilizado en los estudios de genética, (Ver Anexo 6). Conclusiones: Los alumnos elaborarán las conclusiones que hayan obtenido de sus observaciones de las cruzas entre mutantes de Drosophila, las registrarán en la pantalla de la computadora para discutirlas por equipo y luego en el grupo. El profesor seleccionará el “estudiante modelo” para proyectar en la pantalla el equipo que expondrá al grupo sus conclusiones. Tutorial para desplegar pantallas. Ver desde el laboratorio Ver desde internet Actividades de aprendizaje: 1.- El profesor solicitará a los alumnos que investiguen sobre Las leyes de Mendel y Herencia Ligada al Sexo. Se sugiere que elaboren una presentación en Power point y la expongan a sus compañeros así como los resultados de su investigación documental. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 43 Evaluación de la investigación experimental: Se sugiere al profesor aplicar la V de “Gowin” en el (Ver Anexo 6) y una evaluación de contenidos conceptuales final o sumativa. Evaluación Final o Sumativa de la Investigación Experimental: Evaluación cuantitativa de contenidos conceptuales: Responde las siguientes preguntas: 1.- ¿Explica qué es una mutación? 2.- De acuerdo a las observaciones que realizaste al estereoscopio de la mosca Drosophila, explica cuáles fueron las características fenotípicas del tipo silvestre. 3.- De acuerdo a tu experimentación en el Simulador de “Drosophila Laboratory” menciona las características de tres moscas mutantes de Drosophila, que hayas observado. 4.- ¿Qué posibilidades tendría un macho de sobrevivir con alas vestigiales, si estas las utiliza para buscar alimento y en el cortejo para el apareamiento? 5.- ¿Algunas mutaciones en la mosca Drosophila serán dominantes con respecto a otras? ¿Cuáles, por ejemplo? 6.- ¿En todas las especies animales se podrá distinguir a las hembras de los machos, es decir, presentan el dimorfismo sexual? 7.- ¿Qué importancia tiene el dimorfismo sexual en los seres vivos? 8.- ¿A través de tus observaciones en tu experimento pudiste diferenciar el sexo en las moscas Drosophila melanogaster? 9.- ¿Qué importancia tienen las mutaciones como mecanismos de variabilidad biológica? 10.- ¿Cómo influyen las mutaciones en la evolución de los seres vivos? Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 44 Cuestionario de Evaluación: Selecciona la respuesta que consideres que es la correcta: 1.- Alteración en el ADN, que origina nuevas características en el individuo: a) b) c) d) e) recombinación hibridación mutación conjugación codificación 2.- Una mutación puntual ocurre en: a) b) c) d) e) un par de bases nitrogenadas la piel un cromosoma todo el organismo un grupo fosfato 3.- Cuando un cromosoma pierde un fragmento se produce una mutación por: a) b) c) d) e) inversión deleción translocación duplicación recombinación 4.- Cuando se produce una duplicación en un cromosoma alterando el número cromosómico se produce: a) b) c) d) un híbrido un síndrome un homocigótico un heterocigótico 5.- Los agentes mutágenos son: a) b) c) d) e) los que producen cambios en el ADN los rayos X las drogas todas las anteriores ninguna de las anteriores Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 45 6.- Cuando una mutación se hereda a la progenie es que ocurrió en células: a) b) c) d) e) somáticas diploides autosomas gametos cancerígenas 7.- El conjunto de características hereditarias que se manifiestan externamente: a) Genotipo b)Fenotipo c)Heterocigoto d)Homocigoto 8.- El gene que no expresa su genotipo a menos que se encuentre en forma homocigótica a) Dominante b) recesivo c) síndrome d) co-dominante 9.- Cómo se le denomina a la característica heredable, que se presenta en un mayor número de individuos de la población. a) Dominante b) recesivo c) genotipo d) fenotipo 10.- Cuando un individuo porta un gen con característica dominante en un alelo y en el otro un recesivo es: a) Homocigoto b) heterocigoto c) mutante d) síndrome 11.- Las anomalías ligadas al sexo, como el daltonismo y la hemofilia se deben a: a) genes del cromosoma X b) genes del cromosoma Y c) genes del autosoma d) se expresan sólo en mujeres e) se expresan sólo en heterocigotos Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 46 Relaciona las siguientes columnas: 12.-Cuerpo filamentoso en forma de a) gene bastón que contiene los genes y se encuentra en el núcleo 13.- Conjunto de anomalías causadas b) cromosoma por una alteración cromosómica. 14.- Gene que expresa su genotipo c) síndrome sólo si se presenta en forma homocigótica. 15.- Unidad de información genética d) recesivo que se localiza en una porción definida del cromosoma. 16.- Gen que se expresa en el e) dominante fenotipo en una mayor proporción en la población. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 47 Problemas: Con base en tus experimentos en el simulador “Drosophila Genetics Laboratory” resuelve lo siguiente: 1.- En Drosophila melanogaster las alas vestigiales vg son recesivas respecto al carácter normal de las alas largas vg+ y el gen para este carácter no se halla en el cromosoma sexual. En el mismo insecto el color blanco de los ojos es producido por un gen recesivo situado en el cromosoma X, respecto del color rojo dominante. Si una hembra homocigótica de ojos blancos y de alas largas se cruza con un macho de ojos rojos y con alas largas, descendiente de otro con alas cortas, ¿cómo será la descendencia? 2.- Realiza una cruza de moscas mutantes de Drosophila melanogaster; en donde el macho tiene la mutación de alas vestigiales (vg) y la hembra la mutación de las Curly. (Cy) que son alas rizadas ¿Cómo será la descendencia? Calcular los genotipos y fenotipos de la F1 Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 48 BIBLIOGRAFÍA: Audersirk, T., G. Audersirk, Biología. Ed. Prentice Hall, México. 2008 Ayala, T.F. y J.A. Kinger, Genética moderna, Fondo Educativo Interamericano México 2006 Demerec, M., B. Kaufmann, (1961), Introducción a la genética y citología de Drosophila melanogaster, Traducción: Estrada R. F. Instituto Nacional de Energía Nuclear México 2004 Griffiths, A., W. Gelbart, J. Miller, R. Lewontin Genética Moderna. Ed. Mc Graw Hill Interamericana, España,2006, Ramos, P., Abundis, J. Gaytán, Ma. Ordáz, eT AL Manual de Laboratorio de Genética de Drosophila melanogaster .Ed. Mc Graw-Hill, México, 2000 Klug, W., M. Cummings, Conceptos de Genética 5° Ed. Prentice Hall Iberia Madrid. 2006. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 49 ANEXO 1 ALTERACIÓN EN LAS ALAS Mosca silvestre: Esta es una mosca normal de la fruta, o silvestre, Observa la forma y la longitud de sus alas. Comparar con las siguientes mutantes. Mosca mutante con las alas cortas ó vestigiales las moscas no les permiten volar. Esta mutación se encuentra en el segundo cromosoma. Debido a que éste gen es recesivo se debe encontrar en forma homocigótica en el individuo para que pueda manifestarse en su fenotipo. La mutación de las alas rizadas se encuentra en el segundo cromosoma, es una mutación dominante, lo que significa que sólo una copia del gen alterado produce el defecto. De hecho, si ambas copias están mutadas, la mutación es letal ya que las moscas no sobreviven. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 50 ALTERACIÓN EN EL COLOR DEL CUERPO Mosca normal o silvestre, tiene el color normal que es marrón con rallas negras. Comparar con las siguientes mutantes. Moscas de cuerpo amarillo “Yelow” más amarillas que las moscas normales. Tienen un defecto en el gen que se encuentra en el cromosoma X. El gen del color amarillo en las moscas mutantes no les permite producir pigmento normal Moscas mutantes “ebony” que tienen un color oscuro, casi negro, en el cuerpo. Llevan a un defecto en su gene de ébano, en el tercer cromosoma. Normalmente, el gen de ébano es responsable de la producción de los pigmentos de color canela en la mosca de la fruta normal. Con el gen defectuoso los pigmentos negros se acumulan en todo el cuerpo. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 51 ALTERACIÓN EN EL COLOR DE LOS OJOS Mosca normal, o tipo silvestre. Observa que sus ojos son de color rojo brillante. Comparar con los de las moscas mutantes. Mosca mutante que tiene ojos de color naranja. Tienen un gen defectuoso, que normalmente produce el pigmento rojo en el ojo. En estas moscas, el gen para el color de los ojos sólo funciona parcialmente, produciendo menos pigmentos rojos de lo normal. Moscas mutantes con ojos blancos “White” al igual que las moscas de ojos de color naranja, también tienen un defecto en el gen, pero en estas moscas, el gen para el color de los ojos está totalmente defectuoso: no produce pigmento rojo en absoluto. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 52 ALTERACIONES EN LA CABEZA Mosca normal de la fruta o silvestre. Observar que las antenas salen delante de sus ojos. Comparar con las siguientes moscas mutantes. Moscas mutantes que no tienen ojos. La mutación del gen que instruye a las células de las larvas para formar un ojo está alterado. Moscas mutadas que en lugar de antenas en la cabeza, tienen patas. Presentan un defecto en su gen “antenapedia” que normalmente instruye a algunas células del cuerpo para convertirse en patas. En estas moscas, el gen “antenapedia” falsamente instruye a las células, que normalmente forman las antenas en la cabeza, originando patas en su lugar. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 53 ANEXO 2 FENOTIPOS COMPARATIVOS DE LA MOSCA SILVESTRE Y LAS MUTANTES DE Drosophila melanogaster. Drosophila melanogaster tipo silvestre Ojos Silvestre: Ojo compuesto color rojo característico brillante, forma oval. Mutantes: Ojo blanco, ojo durazno, ojo rojo escarlata, ojo café; cambios en la forma y número de omatidios, ojos en barra. Alas Silvestre: Superficie lisa, venación uniforme, de 1/3 de longitud mayor que el cuerpo. Mutantes: Cambios en tamaño y forma; como vestigiales, rizadas y ausencia de venas específicas; cambios en la posición en la que se colocan las alas en el reposo. Cerdas Silvestre: Rectas, largas y lisas (distribución especifica en cabeza, tórax y abdomen). Mutantes: Cerdas acortadas, engrosadas o deformes; cambios en los patrones de distribución. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 54 Color del cuerpo Silvestre: Básicamente gris o café claro (pardo) con patrones de pigmentación característico. Mutantes: Yellow, color de cuerpo amarillo, negro ó ebony (en grados variables), el color puede determinarse más claramente en las venas de las alas, en las patas y en el tórax. Moscas de ojos blancos White Moscas con alas vestigiales Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 55 Moscas ebony, color cuerpo negro. Moscar de alas rizadas, Curly. Moscas de cuerpo amarillo. Yellow Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 56 ANEXO 3 Identifique y dibuje en la tabla las características fenotípicas que observó en las moscas silvestres y las mutantes, en éstas últimas señalen que tipo de mutantes observó. TABLA DE OBSERVACIONES Y RESULTADOS COLOR COLOR FORMA DE LAS DE OJOS DE CUERPO ALAS MOSCA SILVESTRE MOSCA MUTANTE 1 MOSCA MUTANTE 2 MOSCA MUTANTE 3 MOSCA MUTANTE 4 Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 57 ANEXO 4 Entre los mutantes más utilizados para la enseñanza experimental de la genética se tienen los siguientes: Marcador Descripción B Bar (1-57.0). Los ojos están reducidos a una barra vertical en el macho y en las hembras homocigóticas. Las hembras homocigóticas son muy viables; las heterocigóticas tienen un número de facetas intermedio entre las homocigóticas y las silvestres. Tiene buena viabilidad. bw Cy e Vg brown (2-104.5). Color de los ojos café al emerger, obscureciéndose después hasta granate; los testículos sin color; los tubos de Malpigio un poco más pálidos que en el tipo silvestre. Los ojos de las dobles combinaciones recesivas: v/v; bw/bw, cn/cn; bw/bw y st/st; bw/bw son blancos. Curly (2). Asociado con una inversión en el segundo cromosoma. Las alas fuertemente rizadas (abarquilladas). La condición homocigótica es generalmente letal. ebony (3-70.7). Color del cuerpo negro brillante mucho más oscuro que el del silvestre. Las moscas recién emergidas son de color más claro que las moscas de mayor edad. Para evitar confusiones al separar moscas ebony jóvenes se dejan madurar unas horas o un día para clasificarlas. La viabilidad es aproximadamente igual a 0.8 de la del tipo silvestre. Vestigial (2-70) Origen: espontáneo. Descubrió Morgan, en las moscas las alas reducidas a vestigios; por lo general dispuestas en ángulo recto respecto al cuerpo. Las venas de las alas ligeramente visibles, halterios también reducidos. Cerdas erectas. Viabilidad algo reducida. El tamaño final de la larva es más pequeño que el Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 58 tipo silvestre: la pupación ó formación de la pupa, es ligeramente tardía. b Y white (1-1.5). Ojos casi tan blancos como la nieve; ocelos, tubos de Malpigio y cubierta de los testículos, incoloros. Se presenta (alrededor de 1 en 300,000 moscas) y tiene numerosos alelos de efecto intermedio entre w y el tipo silvestre. yellow (1-0). Color del cuerpo amarillo claro. Cerdas y pelos amarillos en la punta; pelos de las alas y venas con el mismo color; cerdas de la larva y partes bucales de color café variable; por esta característica el mutante puede ser identificado desde el estado larvario. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 59 ANEXO 5 Características de la mosca Drosophila melanogaster Uno de los organismos más utilizados en experimentos de genética es la Drosophila melanogaster, la mosca de la fruta. Las razones por las que este organismo ha sido utilizado masivamente en experimentos de análisis mendeliano son las siguientes: El género Drosophila está extendido por todo el mundo y comprende una enorme cantidad de especies locales y cosmopolitas. La Drosophila es un animal díptero (de dos alas) muy pequeño (de 2 a 3 mm), Su ciclo vital corto (10 – 11 días a 25ºC de temperatura) Produce un elevado número de descendientes por pareja Es fácil de criar en el laboratorio, donde se mantiene en viales de vidrio alimentándolo con una papilla compuesta por levadura, azúcar y/o melaza, mezclada con agar-agar para darle consistencia. La Drosophila melanogaster tiene 4 pares de cromosomas: Los cromosomas sexuales (X) y (Y) y 3 parejas de autosomas Los cromosomas (X) y (Y) son pequeños y telocéntricos y la mayoría de los genes se localizan en los cromosomas X, El cromosoma II y III, son metacéntricos y grandes. El cromosoma Y es heterocromático y lleva algunos genes relacionados con la espermatogénesis. Las larvas tienen unas glándulas salivares con cromosomas politénicos, los cuales son de gran tamaño, lo que facilita enormemente el análisis cromosómico y el estudio de los muy abundantes y variados polimorfismos que son tan característicos del género Drosophila. A lo largo de 8 décadas se ha ido acumulando una amplia y variada colección de cepas mutantes con variantes génicas y cromosómicas de fácil identificación. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 60 El fenotipo de la mosca silvestre Drosophila melanogaster es el que se observa en la figura: El cuerpo es de color beige claro Los ojos son grandes y rojos Las alas sobrepasan la longitud del abdomen y son transparentes y ligeramente puntiagudas. Las nerviaciones de las alas están compuestas por 5 venas longitudinales y dos transversales. El número y disposición de las cerdas o quetas también es característico, especialmente en el caso de las macro-quetas. En los machos, la parte distal del abdomen es oscura, en la parte dorsal, y en la parte ventral lleva el pene rodeado por las placas genitales (que le sirven para sujetarse a la hembra). Son más pequeños que las hembras, como promedio, y, en el tarso del primer par de patas, poseen una estructura compuesta de unos pelos gruesos y cortos, llamada “peine sexual” que permite distinguir sexos incluso en las pupas maduras, antes de la emergencia del adulto. Las hembras tienen un abdomen más grande que el macho, son de coloración clara y de terminación puntiaguda; en la parte ventral, el último segmento lleva la placa vaginal, de coloración blanquecina. Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 61 ANEXO 6 COLEGIO DE CIENCIAS Y HUMANIDADES PLANTEL ORIENTE Alumno:____________________________________Grupo:______ Instrucciones: Utiliza la V de Gowin para reportar tu actividad experimental. Conceptual Teoría Metodológico Preguntas centrales Conclusión Principios Análisis de resultados Conceptos Resultados Hechos y / o eventos Profesor: María Angélica Médicis de Vélez C. C. H. UNAM Página 62