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INSTRUCCIONES DE USO Revisión 1 Feb. 2014 AGAR MUELLER-HINTON II Agar Agar Agar Agar Mueller-Hinton Mueller-Hinton Mueller-Hinton Mueller-Hinton II II II II 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catálogo 1055 presentación Frascos 100 ml Caja 12 unidades. Catálogo 5052 presentación placas de 90 mm Caja 10 unidades Catálogo 873 presentación placas de 90 mm Caja 20 unidades Catálogo 874 USO PREVISTO Agar Mueller-Hinton II está recomendado para test de sensibilidad a los antibióticos de patógenos clínicamente importantes. Ampicilina 10 µg FORMULA EN g/l Peptona Caseína acida (H) 17.50 Almidón 1.50 Infusión de Carne 2.00 Agar Bacteriológico 17.00 Final pH 7.4 ± 0.2 a 25ºC Sulfamethoxazole Gentamicina 10 µg 1.25 µg Staphylococcus aureus ATCC 25923 PREPARACION Agar Mueller-Hinton II 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catálogo 1055 (Medio Deshidratado) Suspender 38 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien. Calentar agitando frecuentemente hasta disolución completa y hervir un minuto. Distribuir y esterilizar en autoclave a 121ºC durante 15 minutos. Enfriar a 45 ó 50ºC y si se desea, añada 5% sangre desfibrinada. NO SOBRECALENTAR. Para refundir el medio frío calentar lo más brevemente posible. El color del medio preparado es ámbar ligeramente opalescente. El medio preparado en placa debe conservarse entre 8-15°C. El medio deshidratado debe ser homogéneo, libre de floculos y de color beige claro. Si hay algún cambio físico no utilizar el medio. Agar Mueller-Hinton II palcas de 90 mm Caja 10 unidades. Catálogo 873 y Caja 20 unidades Catalogo 874, Agar Mueller-Hinton II placas con sangre de 90mm Caja 20 unidades Catálogo 875. Agar Mueller-Hinton II Frascos 100 ml Caja 12 unidades. Catálogo 5052. Medio preparado. Listo para su uso. (Fundir y dispensar en placas) PRINCIPIOS Y APLICACIÓN AGAR MUELLER HINTON II Es utilizado para test de sensibilidad antimicrobiana. Ha llegado a ser el medio estándar para el método Bauer-Kirby y su funcionamiento se especifica en NCCLS (National Committee for Clinical Laboratory Standards). El uso del medio con buenas características de crecimiento, es esencial para probar la sensibilidad de microorganismos a antibióticos, cumpliendo las exigencias de la OMS. La infusión de carne y la Peptona de caseína ácida aportan nitrógeno, vitaminas, minerales y amino ácidos esenciales para el crecimiento. El almidón actúa como factor de crecimiento, probablemente actúa como un coloide protector y neutraliza los productos tóxicos que se forman durante el desarrollo de los microorganismos. El Agar bacteriológico es el agente solidificante. El medio cumple con los requerimientos de NCCLS y es fabricado cuidadosamente eligiendo las materias primas que contengan bajas concentraciones de timina-timidina, así como apropiados niveles de calcio y magnesio. 1 LABORATORIOS CONDA, S.A. www.condalab.com TIPO DE MUESTRAS Bacterias aisladas de orina La recolección, el manejo y el procesamiento de las muestras se llevan a cabo según Recomendaciones Standards en Microbiología Clínica. PROCEDIMIENTO 1.- Inocular según método Bauer-Kirby, inundación en superficie y aplicación de los discos de antibióticos. 2.- Incubar a 35 ± 2°C durante 24 - 48 horas. 3.-Lectura e interpretación de los resultados CONTROL MICROBIOLOGICO Los siguientes resultados, fueron obtenidos en el desarrollo del medio a partir de cepas patrón, temperatura de 35 ± 2°C y observados después de 24 -48 horas. después de incubación a Diámetro del halo en mm según NCCLS Sulfamethoxazole Microorganismos Ampicilina Tetraciclina Gentamicina Polimixina B 1.25 µg 10 µg 30 µg 10 µg 300 µg Trimethoprim 23.75 µg Escherichia coli ATCC 25922 Staphylococcus aureus ATCC 25923 Steptococcus faecalis ATCC 33186 Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 15-20 24-35 18-25 19-27 19-26 19-27 12-16 7-13 24-32 24-32 16-23 16-21 BIBLIOGRAFIA Mueller and Hinton A. Protein-Free Medium for Primary Isolation of the Gonococcus and Meningococcus. Proc. Soc. Exp. Biol. and Med. 48:330. 1941. Harris and Coleman Diagnostic. Procedures and Reagents. 4th Edition APH, Inc. New York, 1963. National Committee for Clinical Laboratory Standards. 1993. Atlas, R.M. 1993 Handbook of microbiological media. CRC Press, Boca Raton. Fl.. Diagnostico in vitro Solo para uso profesional Ver indicaciones generales de uso y ficha de seguridad www.condalab.com 25ºC ALMACENAMIENTO Una vez abierto guardar el medio cerrado para evitar la hidratación. Utilizable hasta la fecha de caducidad. 2ºC Frascos preparados almacenar entre 2-8°C Utilizable hasta la fecha de caducidad Laboratorios Conda S.A C/ La Forja 9 28850 Torrejón de Ardoz Madrid, España 2 LABORATORIOS CONDA, S.A. www.condalab.com