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Practicas de Laboratorio Biología de Procariotas PRACTICA 8 Antibiograma Introducción Se entiende por antibiograma el estudio de la sensibilidad "in vitro" de las bacterias a los antibióticos, aunque se extiende a algunos quimioterápeuticos. El antibiograma es un método de diagnóstico rápido y preciso, ya que no se puede predecir la susceptibilidad de las bacterias, hongos y virus a los agentes antimicrobianos, con frecuencia es necesario estudiar la sensibilidad individual de cada patógeno a estas drogas, pudiéndose elegir entonces el agente apropiado que provee mayores posibilidades de una evolución favorable. Objetivos 1. Que el alumno conozca el efecto que tienen las bacterias ante los antibióticos. Material de laboratorio por Material del Equipo equipo Pinzas Cinta adhesiva transparente Círculos de papel filtro estéril Cerillos Diferentes tipos de antibióticos Franela Cultivo bacteriológico Marcador indeleble o lápiz graso Espátula de vidrio Cloro Alcohol 100% Cajas de Petri con AN Practicas de Laboratorio Biología de Procariotas Actividad practica Método de la difusión en medio sólido 1. Se siembra el microorganismo a estudiar esparciéndolo por toda la caja de Petri. 2. Las pinzas de disección se colocan en un vaso precipitado con alcohol al 96%. 3. Se toman las pinzas de disección se pasan por la llama del mechero y se toma un disco de papel filtro estéril y 4. sobre la superficie del medio se coloca el disco (observar figura) 5. Se repite los paso 2,3 y 4 por cada disco 6. Se le agrega a cada disco 5 l de un determinado antibiótico o quimioterápeutico. 7. Para que la concentración de antibiótico que impregna los discos no sea ni excesiva ni insuficiente, realizar un banco de diluciones. La concentración de 100 g/ml ya es adecuada para trabajar. 8. Incubar a 37C por 24 hrs. C Cl Rf P St T E Practicas de Laboratorio Biología de Procariotas Paso 4. Se muestra la forma como se colocan los discos en la superficie del medio de cultivo. Cl, cloranfenicol; P, penicilina; T, tetraciclina; E, eritromicina; St, estreptomicina; Rf, rifampicina; C, control. Resultados Reportar los resultados del antibiograma. Recopilar sus resultados en el cuadro incluyendo el diámetro del halo de inhibición. Discutir en cada caso cuáles fueron el rango de sensibilidad del microorganismo ante las diferentes drogas. (resistente, intermedia y sensible) de acuerdo a el diámetro del halo de inhibición. Discutir en cada caso el rango de acción de las drogas con los diferentes microorganismos. (de amplio espectro, de bajo espectro) Bacteria 1 Esquema Diámetro del halo para: Penicilina Cloranfenicol Eritromicina Estreptomicina Tetraciclina Rifampicina Bacteria 2 Bacteria 3 Practicas de Laboratorio Biología de Procariotas Cuestionario 1. ¿Cuales son las estrategias para disminuir la aparición de resistencias a los antibióticos? 2. Clasifica a los antimicrobianos usados en la práctica de acuerdo a su estructura química y mecanismo de acción en la estructura celular. 3. ¿Cuáles son las bases para la utilización clínica de los antimicrobianos? 4. ¿Qué otros métodos se pueden utilizar para la valoración y selección de antimicrobianos? Practicas de Laboratorio Biología de Procariotas Fichas catolográficas del material bibliográfico sugerido que se encuentran en la biblioteca de la UMAR Ficha No. 583 CLASIFICACION 664.07 S737a ISBN: 0-306-44199-3 Título: Analisis of antibiotic/drug residues in food products of animal origin / Editet by Vipin K. Agarwal Autor: Editorial: New York : Plenum Press, 1992 Descripción: 263 p. TEMAS: 1. MEDICAMENTOS VETERINARIOS - CARNES Y DERIVADOS - ANALISIS \ 2. ALIMENTOS - ANTIBIOTICOS RESIDUOS \ 3. DROGAS Y ANTIBIOTICOS - RESIDUOS CONGRESOS Ficha No. 490 CLASIFICACION 641.37 127 542 P628b ISBN: 968-18-1643-9 Título: Bioquímica y microbiología de la leche / Jorge Pérez Gavilan Escalante, Jose Pablo Pérez Gavilan Escalante Autor: Pérez Gavilán Escalante, Jorge Editorial: México : Limusa, 1984 Descripción: 202 p. TEMAS: 1. LECHE - BIOQUIMICA – ANÁLISIS Ficha No. 541 CLASIFICACION 543.001 82 A118 V.I 2000 ISBN: Título: Official methods of analysis of AOAC International : volume I, agricultural chemicals, contaminats, drugs / William Hortwitz Autor: Editorial: Maryland : AOAC, 2000 Descripción: pág. varia TEMAS: 1. ANALISIS QUIMICO - METODOLOGIA - MANUALES \ 2. CROMATOGRAFIA - ESTEQUIOMETRIA - QUIMICA ANALITICA \ 3. MICROBIOLOGIA - LABORATORIO - ANALISIS \ 4. SUSTANCIAS QUIMICAS - DROGAS \ 5. FERTILIZANTES QUIMICOS - CONTAMINANTES AMBIENTALES – ANÁLISIS Practicas de Laboratorio Biología de Procariotas Ficha No. 542 CLASIFICACION 543.001 82 A118 V.II 2000 ISBN: Título: Official methods of analysis of AOAC International : volume II, food composition; additives; natural contaminants / William Hortwitz editor Autor: Editorial: Maryland : AOAC, 2000 Descripción: pág. varia TEMAS: 1. ANALISIS QUIMICO - METODOLOGIA - MANUALES \ 2. CROMATOGRAFIA - ESTEQUIOMETRIA - QUIMICA ANALITICA \ 3. MICROBIOLOGIA - LABORATORIO - ANALISIS \ 4. ADITIVOS ALIMENTICIOS - CONTAMINANTES ORGANICOS \ 5. PLANTAS - DROGAS – ANALSIS Ficha No. 1558 CLASIFICACION 636.089 692 C176m ISBN: 968-435-114-3 Título: Manual de métodos estandarizados en microbiología veterinaria / George E. Cottral, trad. Fernando Olguín Romero Autor: Cottral, George E. Editorial: México : La Prensa Médica Mexicana, 1986 Descripción: 648 p. TEMAS: 1. MICROBIOLOGIA VETERINARIA - MANUAL DE LABORATORIO \ 2. VIROLOGIA - MICOLOGIA – BACTERIOLOGÍA Ficha No. 2014 CLASIFICACION 579 T759 1996 ISBN: 84-458-0371-9 Título: Tratado de microbiología / Bernanrd D. Davis ... (et.al.), trad. Diorki, S. L. Autor: Editorial: Barcelona : Masson, 1996 Descripción: 1145 p. TEMAS: 1. BACTERIOLOGIA - FISIOLOGIA - GENETICA \ 2. INMUNOLOGIA - VIROLOGIA - BACTERIAS \ 3. MICROBIOLOGIA - VIRUS Y MICROBIOS ESTUDIO Y ENSEÑANZA \ 4. PATOLOGIA - MICROORGANISMOS VIRALES Ficha No. 2194 CLASIFICACION 579 S713m ISBN: 84-282-1030-6 Título: Microbiología general / Hans G. Schlegel Autor: Schlegel, Hans G. Editorial: Barcelona : Omega, 1997 Descripción: 654 p. Practicas de Laboratorio Biología de Procariotas TEMAS: 1. BACTERIOLOGIA - METABOLISMO CELULAR \ 2. HONGOS MICROBIOS - BACTERIAS \ 3. BACTERIAS - ESTRUCTURA CELULAR – GENETICA Ficha No. 2761 CLASIFICACION 579 C159m 1979 ISBN: 968-25-0205-5 Título: Microbiología / Philip L. Carpenter, trad. José Rafael Blengo, Roberto Espinosa Zarza, Alberto Folch Pi. Autor: Carpenter, Philip L. Editorial: México : Interamericana, 1979 Descripción: 518 p. TEMAS: 1. MICROORGANISMOS - MORFOLOGIA - IDENTIFICACION \ 2. BACTERIAS - VIRUS - METABOLISMO Y MECANISMOS GENETICOS \ 3. PROTISTAS - PROTOZOARIOS - ALGAS \ 4. MOHOS - LEVADURAS ECOLOGIA \ 5. ENFERMEDADES INFECCIOSAS - MICROBIOLOGIA AMBIENTAL E INDUSTRIAL Notas: Incluye índice, glosario y referencias bibliográficas